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文档简介
临床医学检验:分子生物学检验技术学习资料1、单选
重叠群是一群克隆。在这个克隆群体中各个体()A.相互之间重叠B.都是来自不同生物的克隆C.插入片段位于不同染色体的不同区段D.位于同一染色体的不同区段(江南博哥)E.目前这种现象还没有得到解释正确答案:D2、名词解释
调节基因正确答案:调节基因是指基因组中调控复制和转录的序列。3、名词解释
基因表达正确答案:是指生物基因组中结构基因所携带的遗传信息经过转录、翻译等一系列过程,合成特定的蛋白质,进而发挥其特定的生物学功能和生物学效应的全过程。4、判断题
Kuru、CJD、GSS和FFI与朊病毒感染有关()正确答案:对5、判断题
提取DNA的原则要将DNA的双链打开()正确答案:错6、单选
神经纤维瘤病发生过程中,相对应的特异的主要相关抑癌基因表达产物异常的是()A.BRCA1B.APCC.p16D.p53E.NF1正确答案:E7、判断题
应用TaqDNA聚合酶进行PCR时,为了保持pH稳定,一般用10~50mmol/L的TrisHCL把反应体系的pH值调整为8.5左右,在扩增时,当温度上升至72℃时,反应体系的pH在7.2左右()正确答案:对8、多选
DNA样品可通过下列哪些方法进行纯化()A.透析B.层析C.电泳D.选择性沉淀E.PCR正确答案:A,B,C,D9、判断题
DNase足纹分析用于蛋白质精确结合位点的研究方法()正确答案:对10、多选
在RNA的分离与纯化过程中,为了避免RNase对RNA的降解,应注意以下哪些问题()A.要避免细胞外RNase的污染抑制其活性B.操作时必须戴手套和口罩C.所有的玻璃器皿与溶液均应以RNase的抑制剂DEPC进行处理D.对各种材料和试剂均要进行严格的洗涤、纯化和高压消毒处理E.在冰浴的条件下进行操作,也是减低RNase活性的有效措施
正确答案:A,B,C,D,E11、单选
限制性内切酶特异性酶活力升高的是()A.反应体系中甘油含量高(>5%)B.酶的用量过大(>100U/μgDNA)C.低离子强度(<25mmol/L)D.较低pH(pH=6.8)E.含有有机溶剂正确答案:D12、单选?男,45岁,发现有动脉硬化症状。查体:见角膜有老年性色素环。查血:TC12.00mmol/L,TG2.6mmol/L。最可能的诊断是()A.混合性高脂血症B.高甘油三酯血症C.家族性高胆固醇血症D.Ⅰ型高脂血症E.Ⅱ型高脂血症正确答案:C13、问答题
试述RNA的基本分类和各自的功能。正确答案:RNA按结构和功能不同可分为:(1)转运核糖核酸(tRNA),tRNA的主要功能是在蛋白质生物合成中特异地转运氨基酸,即将氨基酸从胞液中定向转运到与mRNA结合的核蛋白体或多核蛋白体上去,并使之与mRNA分子中的密码子形成对号入座互补结合,从而准确地供应肽链生成时所需的各种氨基酸原料。(2)信使核糖核酸(mRNA),mRNA的功能是作为翻译蛋白质的的模板,它们直接决定着生物合成什么样的蛋白质。(3)核蛋白体核糖核酸(rRNA),rRNA它们在细胞质中并非单独存在,而是与多种小型蛋白质分子结合成核蛋白体存在和执行功能。14、单选
基因工程中所用的质粒载体大多是改造过的,真正的天然质粒载体很少,在下列载体中只有被视为用作基因工程载体的天然质粒载体()A.pBR322B.pSC101C.pUB110D.pUC18E.pUC28正确答案:B15、问答题
简要写出HBVDNA结构的特点。正确答案:HBV基因组存在负链上,包括S区段、C区段、多聚酶区段和X基因区段。S区段由S基因、前S1基因、前S2基因三部分组成。S区段编码病毒颗粒的外膜蛋白。C区段编码HBV核心抗原。多聚酶区段又称P区段,具有逆转录酶活性。X区段可能与肝癌的发生发展有密切关系。16、问答题
简要叙述PCR-SSCP技术的原理。正确答案:聚合酶链式反应一单链构象多态性(PCR-SSCP)分析技术为分子生物学的研究提供了一个简单、快捷、经济的手段。在该技术中,首先利用PCR技术扩增目的DNA,扩增时利用引物标记法或碱基掺入法使扩增的产物带有标记,如荧光物质、同位素、生物素等。然后将扩增产物变性并进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,区别扩增产物一定长度核苷酸的单链DNA的碱基变化。ssDNA因碱基序列的变异而导致构象改变,其泳动速度必然发生改变,从而将变异的DNA与正常的DNA区分开来。该技术的优点是无需经特殊的限制性内切酶作用,直接对PCR扩增产物或其他方法制备的DNA片段进行分离,测出单链的突变点。17、名词解释
细胞癌基因正确答案:存在于正常的细胞基因组中,与病毒癌基因有同源序列,具有促进正常细胞生长、增殖、分化和发育等生理功能。在正常细胞内未激活的细胞癌基因叫原癌基因,当其受到某些条件激活时,结构和表达发生异常,能使细胞发生恶性转化。18、判断题
PCR技术待扩增的靶基因在人工合成引物的诱导下,合成大量的核蛋白()正确答案:错19、多选
下列为可移动基因的是()A.插人序列B.转座子C.染色体DNAD.质粒E.可转座噬菌体正确答案:A,B,D,E20、单选
下列哪项不是滤膜结合法的应用()A.前提是利用硝酸纤维素膜结合双链DNAB.将与蛋白质结合的DNA片段与游离DNA片段分离C.从多种核酸混合液中筛选出含有特异结合位点的DNA片段D.分离与蛋白质结合及游离的DNA片段E.进行常规的DNA结合作用的动力学研究正确答案:A21、单选
关于穿梭质粒载体,下面哪一种说法最正确()A.能在原核细胞中复制不能在真核细胞中复制B.在不同的宿主中具有不同的复制机制C.在不同的宿主细胞中使用不同的复制起点D.在不同的宿主细胞中使用不同的复制酶E.在不同的宿主细胞中具有不同的复制速率正确答案:D22、填空题
如果两个质粒不能稳定地共存于同一个寄主细胞中,则属于__________________群,这是因为它们的__________________所致。正确答案:相同;DNA具有同源性23、问答题
简述RNA提取方法及其注意事项。正确答案:由于RNAase的影响,为获得完整的基因RNA分子,必须在总RNA分离纯化的最初阶段,尽可能地灭活胞内RNAase的活性,因RNAase非常稳定,可降解标本中的RNA,许多组织和细胞中都含有活性很高的RNAase,因此在纯化RNA的过程中要保证无RNAase污染。选择性地使用针对RNAase的蛋白质变性剂、蛋白水解酶和能与蛋白质结合的阴离子去污剂,并联合使用RNAase的特异性抑制剂能极大地防止内源性RNAase对RNA的水解。提取RNA的方法有硫氰酸胍分离法等。24、填空题
核酸分子杂交可分为:________________、________________、_____________________。正确答案:DNA与DNA杂交;DNA与RNA杂交;RNA与RNA杂交25、填空题
RNA按基本功能分三大类分别为:________________、____________、________________。正确答案:tRNA;rRNA;mRNA26、判断题
在DNA杂交后洗脱过程中在一定的温度下,相同的时间内,表现为温度越高洗脱越彻底()正确答案:对27、单选
点突变中的“转换”是指()A.DNA分子上的一个嘧啶被另一个嘧啶替换或一个嘌呤被另一个嘌呤取代B.DNA分子上的一个嘧啶被一个嘌呤替换或一个嘌呤被一个嘧啶取代C.DNA分子上的碱基组成中增加或减少D.DNA分子摄取一段外源核苷酸E.紫外线引起碱基突变正确答案:A28、单选
将A、B、C混合样品经过Sephadex-25凝胶柱分离,洗脱的先后顺序是B、A、C,可以认为()A.C是糖类,亲和力大B.C的分子量比A小C.C的分子量最大D.A的溶解度最小E.A的分子量比B大正确答案:B29、单选
人类有些疾病患病率不低,有遗传基础,常表现为家族倾向性,这些疾病所具有的形状是以基因数量形状为基础,即在正常数量基础上的增加或减少()A.染色体病B.分子病C.线粒体遗传病D.多基因遗传病E.单基因遗传病正确答案:D30、单选
有关pUC质粒的组成部分中,错误的是()A.与pBR322质粒载体具有相同的复制起始位点B.含有Ampr基因C.具有lacZ基因D.具有多克隆位点E.含有TaqDNA聚合酶正确答案:E31、单选
下列不属于病毒基因组结构特点的有()A.含有大量基因重叠现象B.基因组多数是单倍体C.编码区在基因组中的比例极少D.病毒核酸类型可能是DNA,也可能是RNAE.转录产物为多顺反子正确答案:C32、名词解释
a卫星DNA正确答案:是由较复杂的重复单位所组成的重复序列,这种重复序列为灵长类所独有。33、名词解释
转染正确答案:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。34、名词解释
退火正确答案:指将温度降至引物的TM值左右或以下,引物与DNA摸板互补区域结合形成杂交链。35、单选
在人类线粒体基因组中()A.几乎所有的DNA都用于编码基因产物B.几乎所有编码蛋白质的基因都从不同的方向进行转录C.产生惟一一个大的转录物,然后剪接加工,释放出各种RNA分子D.大多数编码蛋白的基因被tRNA基因分隔开E.复制形式不属于半保留复制正确答案:C36、填空题
质粒DNA常用的提取方法有:__________、________________、________________。正确答案:碱裂解法;煮沸裂解法;SDS裂解法37、单选
下列有关乙肝病毒,描述错误的是()A.是目前感染人类最小的DNA病毒B.负链DNA核苷酸序列为转录模板C.转录模板上有五个ORF,分别为S、C、P、X、U区D.S区段编码病毒颗粒的外膜蛋白E.P区是跨度最大并与其它区有重叠正确答案:C38、填空题
基因克隆的基本策略有以下几种:________________、______________、______________。正确答案:功能克隆法;定位克隆法;消减杂交等策略39、单选?某女,29岁,由于感冒、发烧住院,实验室检查:免疫球蛋白降低,CD4分子数量减少。经询问,该病人有不洁性接触史。进一步检查应做()A.梅毒抗体或抗原检查B.泌尿生殖道感染C.HIV抗原检测D.分子生物学检查染色体E.不需要检查,直接治疗正确答案:C40、填空题
蛋白质结构数据库有:_______________、__________________________和_______________。正确答案:蛋白质数据仓库(PDB);蛋白质结构分类数据库(SCOP);PROSITE数据库41、问答题
简述肿瘤发生学说中致癌的过程。正确答案:肿瘤的发生是由多种致癌因素综合作用的结果。当正常细胞受到物理因素、化学因素以及生物因素等致癌因子作用后,经过多次打击多阶段变化便形成了肿瘤。(1)启动阶段在启动因子的作用下,细胞的DNA分子已发生改变,但表型仍显示正常。启动因子以极低剂量与细胞接触一次,既可启动细胞癌变过程。(2)促癌阶段表型正常而DNA已发生变化的癌前细胞,在启动子和促癌因子的协同作用下,细胞的表型发生变化,表现出癌细胞的表型。促癌因子单独无致癌作用,必须有启动因子作用的基础,才能促进细胞转化。这类因子要与细胞反复接触才能促进细胞的恶化。(3)转化阶段为细胞恶变的终末阶段,即已恶化的细胞进入自主分裂增殖状态。促癌阶段形成的增生性病灶会进一步浸润、转移。42、多选
酚抽提法可用于基因组DNA的分离纯化,所用试剂分别具有不同的功能,下列说法正确的是()A.SDS为生物阴离子去污剂,主要引起细胞膜的降解并能乳化脂质和蛋白质B.EDTA为二价金属离子螯合剂,可抑制DNase的活性,同时降低细胞膜的稳定性C.蛋白酶K有水解蛋白的作用,可消化DNase和细胞中的蛋白质并裂解细胞D.酚可使蛋白质变性沉淀,也可抑制DNase的活性E.pH8.0的Tris溶液能保证抽提后DNA进入水相,避免滞留在蛋白质层正确答案:A,B,C,D,E43、填空题
Sanger法使用特异性引物与___________________模板退火,在DNA聚合酶作用下进行延伸反应,并在_________________作用下进行碱基特异性的链终止,然后采用聚丙烯酰胺凝胶电泳区分长度相差_____________的单链DNA,从而完成的测序反应方法。2’,3’-ddNTP与普通的dNTP不同之处在于_________________。正确答案:单链DNA双脱氧核苷三磷酸(ddNTP);一个核苷酸;在脱氧核糖的;3’位置缺少一个羟基44、单选
关于DnaseⅠ足纹分析原理,下列有关描述正确的是()A.DnaseⅠ可以随机水解核苷酸中的磷酸二酯键,而结合有蛋白质的DNA免于DnaseⅠ的水解B.DnaseⅠ可以水解蛋白质中的肽键,通过电泳对产物进行分析C.核苷酸中的DnaseⅠ在一定条件下被酶水解而电泳,通过对产物进行分析的一种技术D.核苷酸和蛋白质结合物被特殊性酶水解而得到的产物E.核苷酸和蛋白质结合物被加热处理而通过电泳,最后用DnaseⅠ处理得到的产物正确答案:A45、单选?常采用质粒DNA小量提取的方法是()A.碱裂解法B.SDS裂解法C.煮沸裂解法D.酚抽提法E.牙签少量制备法正确答案:A46、单选
下列各项中、需要进行液相杂交的是()A.Northern印迹B.Southern印迹C.Slot印迹D.Sl作图E.原位杂交正确答案:E47、单选
有关朊病毒,述说错误的是()A.是一种不同于病毒、细菌、霉菌的传染性病原体B.Prusiner因为对朊病毒研究有突出贡献而获得诺贝尔医学奖C.朊病毒只对人类有致病作用D.朊病毒能对部分蛋白酶有抵抗作用E.朊病毒主要作用于脑部,直接破坏脑神经细胞正确答案:C48、单选?某女,29岁,由于感冒、发烧住院,实验室检查:免疫球蛋白降低,CD4分子数量减少。经询问,该病人有不洁性接触史。初步考虑为()A.梅毒感染B.淋病感染C.HIV感染D.自身免疫性疾病E.染色体异常正确答案:C49、单选
非复制转座()A.复制转座子,即在原位点上留有一个拷贝B.移动元件到一个新的位点,在原位点上不留元件C.要求有转座酶D.涉及保守的复制,在这个过程中转座子序列不发生改变E.要求解离酶正确答案:B50、名词解释
splitgene正确答案:真核细胞中的基因大多由不连续的几个编码序列所组成,称断裂基因。51、单选
分子生物学检验技术不能用于以下临床实验诊断的哪些方面()A.病毒的检测B.支原体的检测C.亲子关系的鉴定D.个体身份的识别E.细菌感染能力的鉴定正确答案:E52、单选
人体基因组有多少碱基()A.10亿B.20亿C.30亿D.40亿E.50亿正确答案:C53、判断题
普通光学显微镜和电子显微镜是细胞形态学检测的方法之一()正确答案:对54、名词解释
结构基因正确答案:结构基因是指基因组中能够编码蛋白质的序列。55、多选
下列哪些是新近蛋白质相互作用的体外研究方法()A.蛋白质工程中的定点诱变技术B.生物传感芯片质谱C.酵母双杂交D.噬菌体展示E.免疫诱导正确答案:A,B,C,D56、填空题
野生型的M13不适合用作基因工程载体,主要原因是:__________________、________________和____________________。正确答案:没有多克隆位点序列;拷贝数低;没有遗传标记57、多选
对核酸一蛋白质杂交实验的描述,正确的是()A.又称为Southwestern杂交B.可鉴定蛋白质与DNA的特异结合C.可以大概确定结合蛋白质的分子量D.该技术最先由中国人应用E.蛋白质-DNA复合物经紫外线照射后可分离正确答案:A,B,C58、单选
pBR322是一种改造型的质粒,含有两个抗性基因,其中四环素抗性基因来自()A.pSF2124B.Ri质粒C.pSC101D.pUC18E.pUC28正确答案:C59、填空题
遗传病一般分为________________病和________________病两大类。染色体病可按________________和______________分为两大类。正确答案:基因;染色体;常染色体异常;性染色体异常60、单选
真核基因经常被断开()A.表明初始转录产物必须被加工后才可被翻译B.因为编码序列“外显子”被非编码序列“内含子”所分隔C.因为真核生物的DNA为线性而且被分开在各个染色体上,所以同一个基因的不同部分可能分布于不同的染色体上D.反映了真核生物的mRNA是多顺反子E.表明真核基因可能有多种表达产物,因为它有可能在mRNA加工的过程中采用不同的外显子重组方式正确答案:B61、单选
因研究重组DNA技术而获得诺贝尔奖的科学家是()A.W.GilbertB.A.A.KkornbergC.P.BergD.B.McClintockE.K.Mullis正确答案:A62、配伍题
表达产物为核内DNA结合蛋白类或反式作用因子类的基因是()表达产物为蛋白激酶类的基因是()A.erb-A和masB.ras和srcC.C-myc和fosD.Rh和p53E.C-myc和c-sis正确答案:D,C63、配伍题
是研究基因工程产品蛋白质间相互作用的技术()是目前蛋白质组研究中最有效的分离技术()是根据不同离子间的质量、电荷比值差异来确定分子量的技术()A.二维凝胶电泳B.图像分析技术C.同位素标记亲和标签法D.质谱技术E.噬菌体展示正确答案:E,A,D64、单选
细胞内寿命最短的RNA是()A.tRNAB.mRNAC.snRNAD.rRNAE.环状RNA正确答案:B65、单选
作为理想质粒,应该具备下列条件,错误的是()A.具有松弛型复制子B.在复制子外存在几个单一的酶切位点C.DNA聚合酶ⅢD.具有粘性末端E.分子量相对较少但有较高的拷贝数正确答案:D66、单选?女,45岁,由于低热、盗汗、感冒、咳嗽并带血丝入院。实验室检查:痰普通培养无致病菌生长;X片见肺纹理增粗,肺门有发光点状物。初步考虑为()A.矽肺B.肺结核C.肺出血D.COPDE.肺炎正确答案:B67、多选
下列有关限制性内切酶的描述,正确的是()A.是一种可以水解核酸的酶,能识别和切割DNA分子中的特定核苷酸序列B.Ⅱ型限制性内切酶是基因重组中最常使用的工具酶C.Ⅰ型和Ⅲ型限制性内切酶具有修饰和依赖ATP活性的作用D.通常识别的是4~8个特异性核苷酸顺序E.水解核酸后可以形成粘末端或平末端正确答案:A,B,C,D,E68、名词解释
定量PCR正确答案:基因表达涉及的转录水平的研究常需要对mRNA进行定量测定,对此采用的PCR技术就叫定量PCR。69、单选
使用有机溶剂沉淀法得到的核酸,往往含有少量共沉淀的盐,可用多少浓度的乙醇洗涤去除()A.20%B.35%C.45%D.70%E.95%正确答案:D70、判断题
RFLP又称限制性核酸内切酶片段长度多态性()正确答案:对71、名词解释
转位因子正确答案:指可移动的基因成分,即能在一个DNA分子内部或两个DNA分子之间移动的DNA片段。72、单选
人类肿瘤中最常被激活的癌基因是()A.sisB.rasC.mybD.mycE.erb正确答案:B73、单选
关于质粒的相容性,下面哪一种说法不正确()A.质粒的不相容性是绝对的B.质粒可以分成若干个不相容群,但不能分成若干个相容群C.如果A、B两种质粒不相容,说明它们的复制机制相同D.属于同一个不相容群中的质粒,不仅复制机制相同,而且拷贝数和分子量也相同E.不同相容群的质粒能够共存于同一个细胞正确答案:C74、填空题
蛋白质相互作用的研究方法较多,常用的有:______________________、____________________和__________________。正确答案:亲和层析亲和印迹;免疫沉淀;交联75、问答题
原癌基因激活机制表现在哪些方面?正确答案:原癌基因具有正常的生理功能,被激活时又具有致癌作用。原癌基因表现为致癌作用主要通过以下方式进行的。(1)原癌基因点突变,表现为由于核苷酸某个碱基突变,影响到它所决定的氨基酸变异,由一种氨基酸转变为另一种氨基酸,如果出现某个特殊位置发生改变,必然出现蛋白质功能的变化,从而表现出不同的蛋白质功能。(2)获得外源性启动子而激活,表现为在原癌基因的上游插入外源性启动子或增强子激活原癌基因,使表达产物增多。(3)DNA分子中的甲基化对抑制基因的转录具有重要的作用,如果甲基化水平降低,可激活原癌基因。(4)在细胞中出现了基因不同程度的扩增,表现为决定的蛋白质大量表达,相应的产物增加。(5)从基因内部来讲,如果出现基因易位或染色体出现重排,使得原癌基因转移到某些较强的启动子或增强字附近,因而被激活,使得相应蛋白质得到大量增加。76、填空题
探针是一种________________,它带有供反应后检测的合适的______________。正确答案:DNA(RNA);分子标记物77、单选
程序性细胞死亡是指()A.细胞自我死亡B.主动生化过程而自杀的现象C.病理性死亡D.外界因素引起的死亡E.是有意识的死亡现象正确答案:B78、单选
肿瘤的发生发展经过不包括()A.激发阶段B.浸润阶段C.促发阶段D.转移阶段E.结束阶段正确答案:E79、名词解释
基因正确答案:合成有功能的蛋白质多肽链或RNA所必需的全部核酸序列(通常指DNA序列),它不仅包括编码蛋白质肽链mRNA的核酸序列,还包括为保证转录所必须的调控序列,5′端不翻译序列,内含子以及3′端非翻译序列等所有的核酸序列。80、问答题
简述斑点杂交的过程。正确答案:斑点杂交是一种DNA杂交法,它是将DNA待测样品直接点加在硝酸纤维素膜上使其成为斑点,然后与特异DNA探针进行杂交,以分析DNA样品之间的同源性。斑点杂交的过程是:(1)取硝酸纤维薄膜一张,铺在一描有小方格的纸上,以确定点样位点,每格中最多可点样品DNA10μl。(2)加样可分多次进行,待前一次样品干燥后再加第二次,每次约1~2μl,这样可避免斑点扩大。(3)待样品干燥后,让硝酸纤维素薄膜漂浮在0.5MNa0H、1.5MNaCl液面上,变性15min。(4)取出薄膜在滤纸上吸干。(5)再漂浮在0.5MTris-HCL(pH7.5)、1.5MNaCl液面上中和15min。在滤纸上晾干后,夹在两张纸之间,80℃烘干2h,即可进行杂交。(6)同位素探针的杂交:①将杂交膜以6×SSP浸润2min;②将湿润的杂交膜装人杂交袋,加人预杂交液,置42℃水浴2~6h;③将已标记的双链DNA探针于95℃~100℃加热5~10min后冰浴骤冷;④向杂交袋中加入已变性的标记探针,置42℃水浴摇床杂交6~12h;⑤小心取出杂交膜并洗膜;⑥干膜。81、填空题
.产生单个碱基变化的突变叫__________突变,如果碱基的改变产生一个并不改变氨基酸残基编码的________________,并且不会造成什么影响,这就是______________突变。如果改变了氨基酸残基的密码,这就是________________突变。这种突变对蛋白质功能影响程度要根据被改变的氨基酸残基在蛋白质__________或________________结构中的重要程度,或是与酶的______________________的密切性来决定,活性变化范围可从____________到接近正常。正确答案:点;核苷酸序列;无义;有义;Ⅰ级;Ⅱ级;活性中心;零82、填空题
PCR技术是一种选择性体外扩增________________的方法。正确答案:DNA或RNA83、单选
以下哪项不是人类基因组计划的基本任务()A.遗传图谱B.染色体定位C.物理图谱D.基因图谱E.序列图谱正确答案:B84、填空题
线粒体DNA是环状的双螺旋结构,外链叫做重链;内链叫__________________________________,均有__________________功能。正确答案:轻链;编码85、配伍题
可检测DNA结合蛋白和RNA结合蛋白()鉴定序列特异性蛋白质结合位点的方法()A.凝胶滞后实验B.原位杂交C.质谱技术D.蛋白质一核酸紫外交联法E.随机PCR正确答案:A,E86、名词解释
Exon正确答案:是结构基因中的编码序列,往往被内含子所间隔。87、单选
原位杂交()A.是一种标记DNA与整
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