基于碳量子点荧光淬灭检测生蚝中铜离子的含量

基于碳量子点荧光淬灭检测生蚝中铜离子的含量【摘要】目的：建立一种基于碳量子点荧光淬灭检测铜离子的方法。方法：采用一锅合成法合成醛基碳量子点，研究铜离子淬灭醛基碳量子点的淬灭效率，并分别对反应时间、温度、pH值进行了优化。结果：铜离子可以显著淬灭醛基碳量子点荧光并在0-400μM呈现良好线性关系,最低检测限达0.29μM,回收率为：88.9%-113.4%。结论：本法具有灵敏度高、选择性强，应用于生蚝的铜离子浓度检测取得了较好的结果。【关键词】碳量子点;荧光淬灭;铜离子AcarbonquantumdotsbasedfluorescencequenchingmethodtodeterminethecontentofcopperioninFreshOyster【Abstract】Purpose:Establishmentofacarbonquantumdots(CQDs)basedfluorescencequenchingmethodtodetectcopperion.Method:Onepotsynthesismethodwasusedtosynthesizealdehydiccarbonquantumdotstoexplorethequenchingabilityofcopperiontothefluorescenceemittedbyaldehydiccarbonquantumdots.Andthereactiontime,temperatureandpHvalueonthequenchingprocesshavealsobeenoptimizedinthisstudy.Results:Copperiondemonstratedasignificantquenchingeffectwithagoodlinearrelationshipbetweenfluorescencequenchingefficiencyandtheconcentrationofthecopperionrangingfrom0-400μM.Thelowestdetectionlimitis0.29μM.Thequantitativerecoveryisbetween88.9%and113.4%Conclusion:Themethoddevelopedinthisstudyissensitiveandselectivetodetectthecopperion.Agoodresultwasobtainedwhenitwasusedtodeterminethecontentofthecopperionoffreshoyster.【Keywords】carbonquantumdots,fluorescencequenching,copperion目录基于碳量子点荧光淬灭检测生蚝中铜离子的含量 1诚信声明 2基于碳量子点荧光淬灭检测生蚝中铜离子的含量 31前言 51.1铜离子检测的意义 51.2分析检测铜离子的方法 51.2.1电感耦合等离子体发射光谱法与电感耦合等离子体质谱法 51.2.2原子吸收光谱法 61.2.3荧光光谱法 61.3碳量子点的性质 61.3.1碳量子点简介 61.3.2碳量子点的荧光特性 81.4碳量子点荧光探针 92实验部分 102.1仪器与试剂 102.2实验方法 112.2.1醛基碳量子点制备 112.2.2铜离子的检测 123结果与讨论 123.1碳量子点材料表征 123.2碳量子点荧光光谱 143.3碳量子点在不同浓度铜离子情况下的荧光光谱图 143.4实验条件优化 153.5选择性考察 193.6抗干扰性考察 193.7线性考察 203.8样品测定及回收率 214结论 22参考文献 23致谢 261前言1.1铜离子检测的意义铜(Cu)是人类必须的微量元素之一，在许多生命活动过程中具有非常重要的作用，如血红蛋白水平的调节、神经元功能、线粒体呼吸和细胞代谢等[1]，铜离子的缺乏会带来一系列健康问题如脑细胞中的色素氧化酶减少、活力下降，进而导致记忆衰退、思维紊乱等。但是铜作为一种重金属离子如果摄入过量也会对人体造成极大的危害，急性铜离子中毒会引起胃肠道中毒症状，慢性铜离子中毒会导致肝、肾和神经系统受损，溶血、血红蛋白降低，血清乳酸脱氢酶升高以及脑组织病变[2]，因此，对食品中的铜离子含量进行监测具有重要的现实意义，而要实现对食品铜离子含量的检测最基本的要求是要有检测铜离子含量的技术手段，尤其是快速、低成本的检测食品中铜离子浓度对于食品监督非常有价值。1.2分析检测铜离子的方法目前铜离子检测主要方法包括电感耦合等离子体发射光谱法、电感耦合等离子体质谱法、原子吸收光谱法以及荧光光谱法等。1.2.1电感耦合等离子体发射光谱法与电感耦合等离子体质谱法电感耦合等离子体原子发射光谱法（ＩＣＰ－ＡＥＳ）是以电感耦合等离子体炬（ＩＣＰ）为激发光源的光谱分析法，可同时测定包括铜在内的多种元素[3]。电感耦合等离子体质谱法（ＩＣＰ－ＭＳ）是以ＩＣＰ为电离源，电离产生的离子通过接口装置进入质谱仪，再对元素进行测定，可对μｇ·Ｌ－１级或以下的元素含量进行测定，实现对包括铜在内的多种元素的同时测定。[3]MojtabaShamsipur等[4]采用电感耦合等离子体原子发射光谱法对预富集水样中的铜离子进行定量，检出限为0.078ng/mL。吴学倩等[5]采用微波消解提取啤酒用糖浆中的铜离子，随后用电感等离子体质谱法对铜离子进行检测，精密度可达0.40%-2.78%。此方法缺点是成本高，一般的实验室难以采用。1.2.2原子吸收光谱法原子吸收光谱法（AAS）是利用原子的中外层电子不稳定，可以吸收一定波长的光辐射，使电子从基态跃迁到激发态的现象而建立的一种元素分析方法[6]。GuoqiangXiang等人[7]采用火焰原子发射光谱法FAAS对大豆壳样品中痕量的Cu2+进行测定。该方法对Cu2+的检出限为0.8ngmL-1。于刚[8]等用石墨炉原子吸收光谱法测定解聚糖膜样品中铜离子的含量，检测限为0.096mg/g。此方法的缺点是操作繁琐，前处理麻烦，导致应用受到了限制。1.2.3荧光光谱法荧光光谱法是指利用原子外层电子吸收光子后,由基态跃迁到激发态,再回到较低能级或者基态时,会发射出一定波长荧光的现象而建立的一种分析方法[9]。王鹏[10]报道采用新型罗丹明B-色氨酸荧光探针对铜离子进行检测，线性范围为:0～1.2μM范围呈现良好线性关系，最低检测限为128nM。梁国熙等[11]利用合成的红色荧光碳量子点对铜离子进行定量检测，他们的研究证实该铜离子在浓度范围0.01~150μM区间对该红色碳量子点有明显的荧光强度淬灭响应，检测限为3.4nM。相较于前述两种方法，荧光光谱法具有灵敏度高、选择性强、样品量少，操作方便且环保等优点，正因为荧光光谱法有这些优点，因此，本项目也将采用荧光光谱法进行检测。本项目所使用的荧光光谱法是以碳量子点作为荧光探针来进行检测的。1.3碳量子点的性质1.3.1碳量子点简介量子点（QuantumDots,QDs）作为一种全新概念的纳米级半导体发光粒子，最早是由俄罗斯固体物理学家AlexeyI.Ekimov发现的[12]，量子点材料三个维度尺寸均在纳米数量级，由Ⅱ～Ⅳ族或Ⅲ～Ⅴ族元素组成，一般含有数百到数万个原子组成的原子簇，粒径约为１～１００ｎｍ，小于或接近激子玻尔半径[113]，QDs根据其核心种类，可分为以下3种类型:基于镉(Cd)的金属QDs、无镉的金属QDs和无金属的QDs[14-15]，传统的以镉为核心的QDs包括碲化镉（CdTe）、硒化镉(CdSe）、硫化镉（CdS）等；无镉金属QDs主要有：硒化银（Ag2Se）QDs、磷化铟(InP)QDs和氧化锌（ZnO）QDs；无金属QDs材料的发展。无镉金属QDs主要有：硒化银（Ag2Se）QDs、磷化铟（InP）QDs和氧化锌（ZnO）ＱDs,无金属的QDs主要有：基于硅的QDs和基于碳的QDs[16]。金属量子点由于存在制备条件比较苛刻、试剂成本高、毒性较大等缺点，使人们对无金属QD的研究产生了浓厚的兴趣，其中，碳量子点（CarbonQuantumDots,CQDs）由于其具有低毒、水溶性好、易于功能化和光稳定性等优异性能，是碳纳米家族中的一颗闪亮的明星。碳量子点的研究最早可追溯至2004年XuXY等[17]的研究工作，随后，孙亚平等[18]在2006年也获得了这种荧光碳纳米颗粒，2007年，LiuH等[19]制备出具有不同发光特性的碳量子点。同年，又有文献报道制备出发蓝光的碳量子点（CarbonQuantumDots，CQDs）[20]。此后，多种碳量子点制备技术和方法如：电化学氧化石墨法，碳纤维法，石墨烯和碳黑制备法等被先后开发出来，现在，碳量子点一般泛指一类粒径小于10nm，具有荧光性质，以碳为主体的、富含表面基团的碳纳米颗粒。根据碳量子内核的不同可将碳量子点分为石墨烯量子点（graphenequantumdots,GQD）和无定形碳量子点（amorphousquantumdots,AQD）[21]。石墨烯量子点由小于十层石墨烯晶格组成，具有比石墨烯更大的比表面积更多的表面活性中心和更易接近的边缘，由于量子限制和边缘效应，GQD具有高速电子传输和优异的导电性，因此在电化学方面的应用广泛，一般是以石墨或石墨烯作为前驱体合成[22]。无定形碳量子点的核心是准球形碳纳米颗粒，由不同比例的石墨和涡轮层状碳组成，尺寸范围在2～10nm之间。AQD通常具有非晶态结构，是由sp3与sp2杂化的混合结构形式构成，合成原料来源广泛。作为一种新型的荧光材料，碳量子点具有毒性小、生物相容性好、具有宽而连续的激发光谱、发光波长可调、荧光性能稳定，并且可以通过化学修饰的手段实现功能化等突出优势而备受关注，与有机染料相比，碳量子点的粒径和分子量更小，因而被广泛应用于像荧光光谱检测，药物递送，细胞成像等诸多领域[23]，近年来，碳量子点荧光材料在这些领域的研究报道也日渐增多，为这些领域带来了很多新的研究机遇和研究方向，促进了这些领域的发展。1.3.2碳量子点的荧光特性与传统的发光纳米粒子相比，碳量子点具有很多优越的性能，碳量子点毒性低、生物相容性好同时具有宽而连续的激发光谱、发光波长可调、荧光性能稳定，并且可以通过化学修饰的手段实现功能化等突出优点，在结构上，碳量子点通常被认为是由碳核和表面有机基团构成，碳核一般由SP2杂化碳形成的无定形或晶体碳结构，又或者是两者的混合结构。其表面含有许多含氧官能团（羟基、羧基等），因此，碳量子点一般具有很好的水溶性，碳量子点的结构特征决定了碳量子点具有优异的光学特性，如光学吸收、光致发光、化学致发光和电化学致发光，这些光学性能使得碳量子点能广泛应用于许多不同的领域。碳量子点比较明显的一个光谱特征是在紫外光区有较强的吸收峰[24]，并且延伸到可见光区。其紫外吸收峰大多集中在260～320nm，通常表现出荧光最大发射波长、激发波长依赖性等光学特征。有些光谱中还出现了吸收肩，可能的原因是碳量子点结构中的C=C键的π→π*跃迁和C=O键的n→π*跃迁[24]。碳量子点另一个光谱特征是它具有光致发光的特性，一般而言，具有良好水溶性的碳量子点在光照下，其自身会发出明亮的荧光，而且，它的光学稳定性很好[24]。传统的量子点荧光特征是尺寸相关的光学吸收和荧光发射。目前，碳量子点光学性质中关于荧光产生机理仍不清晰存在一些争议，近年来的一些研究表明碳量子点尺寸、结构和表面修饰等是影响碳量子点荧光特性的主要因素，而在一定尺寸和特定的合成条件下，影响碳量子点性能的关键因素是其表面基团，一般来说，量子点表面进行钝化修饰可以增加碳量子点荧光量子产率。1.4碳量子点荧光探针近年来，碳量子点作为新型的荧光纳米材料被认为是最有前途的荧光纳米材料之一，已经被广泛报道应用于金属离子检测，现有的基于荧光碳量子点荧光探针检测金属离子的方法大致可以分为两类，一类是利用金属离子对某些碳量子点荧光材料具有荧光增强的效果，并且这种效果是有一定的金属离子浓度依赖性，例如：2017年，柴芳团队[25]报道了一种生物相容性荧光氮掺杂碳量子点荧光探针用于检测Hg2+离子，其对Hg2+离子的检测具有良好的灵敏性和选择性，检测限为4.8nnmol/L。另一类方法是利用金属离子可以浓度依赖性的淬灭某些碳量子点材料所激发的荧光。荧光淬灭通常可以分为静态淬灭和动态淬灭，静态淬灭过程中，碳量子点和目标分析物结合形成非荧光基态纳米复合物[26-28］，被激发的纳米复合物可以返回基态而无需发射光子，静态淬灭机理可能与以下几种条件相关：（１）碳量子点的寿命变化；（２）基态纳米络合物的形成；（３）温度的升高降低了基态纳米络合物的稳定性，从而减少了静态淬火[29]。而动态淬灭可以解释为激发态的碳量子点与分析物碰撞后回到基态，导致能量转移。由于动态淬灭只发生在激发态，所以吸收光谱没有变化。这个过程也会影响碳量子点的荧光寿命[30-32]。例如Omer等[33]采用水热合成法制备了磷、氮掺杂的碳量子点荧光探针，并发现Fe3+可使荧光猝灭，线性浓度响应范围为Fe3+在0.1～0.9M，检测限为50nM。，这些探索研究表明基于碳量子点荧光探针检测金属离子具有潜在的可行性。然而，如何开发高选择性、特异性、线性范围宽且检测速度快的基于碳量子点淬灭技术的金属离子检测方法仍需要更多的研究与探索。在本文所研究的Cu2+检测领域也有相关的碳量子点荧光探针的研究报道，例如：Murugan等[34]报道了Cu2+对碳量子点的荧光淬灭率与Cu2+浓度在0～100μM范围内呈线性相关，检测限达10nm，同时，进一步的机理研究证明Cu2+对该碳量子点荧光材料的淬灭属于静态荧光淬灭，又如：钟世龙等[35]报道了以N-氨乙基-3-氨丙基甲基二甲氧基硅烷和无水柠檬酸为原料，合成了对Cu2+具有选择性荧光响应的碳量子点荧光探针，然后基于此碳量子点荧光探针制备了吸附型纳米荧光探针CD-MSN，Cu2+线性检测范围为在0～10.0μmol/L，检测灵敏度为0.22μmol/L。尽管这些报道的方法在一定程度上实现了对Cu2+的检测，但其也存在线性范围较窄，选择性较差及稳定性不足等问题，迫切需要开发出新型的选择性强的碳量子点荧光探针用于铜离子的分析检测。2实验部分2.1仪器与试剂主要仪器仪器名称型号生产产家超声波清洗器KQ-500M东莞市科桥超声波设备有限公司电热鼓风干燥箱GZX-9240MBE上海博讯实业有限公司医疗设备厂冷冻干燥机LGJ-10C北京四环科学仪器厂有限公司荧光分光光度计LF-1804005赛默飞世尔科技公司pH计PB-10赛多利斯科学仪器（北京）有限公司磁力搅拌器ZD267北京京伟欣业电子天平JA2003上海舜宇恒平科学仪器有限公司手动移液器Toppette大龙兴创实验仪器（北京）有限公司台式离心机LD4-2A北京金立离心机有限公司主要试剂试剂名称纯度生产产家戊二醛50%上海晶纯生化科技股份有限公司无水乙醇分析纯天津市大茂化学试剂厂聚乙烯亚胺99%上海易恩化学技术有限公司多巴胺98%上海麦克林生化科技股份有限公司乙酸99.8%上海玻尔化学试剂有限公司三水合乙酸钠分析纯江苏强盛功能化学股份有限公司磷酸二氢钠分析纯上海麦克林生化科技股份有限公司磷酸氢二钠分析纯福晨（天津）化学试剂有限公司2.2实验方法2.2.1醛基碳量子点制备（1）将4.5ml戊二醇与9ml无水乙醇于150℃水热反应180分钟得到醛基碳量子点（CHO-CQDs）。（2）量取200ml水随后加入2mlCHO-CQDs搅拌溶解。另将含有12.5gPEI、0.125gDA的无水乙醇加入上述溶液中反应6小时得到醛基碳量子点组装体。（3）将醛基碳量子点组装体透析8小时，抽滤并旋蒸，随后将溶液在-20度冷冻约8小时（4）冷冻好的溶液再用冻干机进行冻干（5）将冻干得到的固体加去离子水溶解得到醛基碳量子点组装体溶液且浓度为10mg/ml。2.2.2铜离子的检测以二水合氯化铜为原料配制1μM浓度的的铜离子溶液将800μl10mg/m的醛基碳量子点溶液加入比色管中，加入去离子水使总体积为4ml，分别用330nm、340nm、350nm、360nm、370nm、380nm、390nm、400nm、410nm、420nm的荧光扫描醛基碳量子点溶液找出发射波长和激发波长。分别加入800μl10mg/ml的醛基碳量子点溶液至19根比色管中，其中一根比色管中加入去离子水至总体积为4ml，其余18根比色管中分别加入一定量的1mM或10nM铜离子母液，随后补加去离子水至总体积4ml，铜离子含量分别为1μM、120μM、160μM、200μM、250μM、300μM、350μM、400μM、450μM、500μM、600μM，检测不同浓度铜离子对醛基碳量子点荧光强度的淬灭情况。3结果与讨论3.1碳量子点材料表征透射电镜是研究物质形貌与粒径大小的重要技术，在本工作中，我们也对合成出的样品进行了透射电镜研究，结果如图1所示，从电镜结果看，我们得到的碳量子点大小均一，粒径大约在5nm左右，具有良好的分散性，形状近似为球形的纳米颗粒。图1碳量子点的TEM图红外分光光度计可对物质表面的官能团进行分析。其主要官能团-OH，-CHO及-C=CH的红外吸收特征峰见图2醛基=C-H振动峰醛基=C-H振动峰醛基C=O振动峰-OH振动峰图2碳量子点的FTIR图3.2碳量子点荧光光谱为了研究铜离子对醛基碳量子点荧光淬灭率线性关系，首先对醛基碳量子点的荧光特性进行了研究，荧光激发波长的选择对于荧光检测信号的灵敏度及信噪比比较重要，因此，我们首先选择了在330-420nm范围内的10个不同波长作为激发波长，对醛基碳量子点的荧光特性进行了发射波长扫描，从图3结果可见当用370nm波长激发时，发射波形比较尖锐，最强荧光波长为500nm，虽然用380nm及390nm波长激发时，500nm处荧光强度比370nm时略强，但峰形没有370nm时尖锐，所以，在本项工作中我们最终选择了370nm波长作为激发波长，500nm波长作为发射波长。图3碳量子点在不同激发波长下的荧光光谱图3.3碳量子点在不同浓度铜离子情况下的荧光光谱图分别加入800μl10mg/ml的醛基碳量子点溶液至19根比色管中，其中一根比色管中加入去离子水至总体积为4ml，其余18根比色管中分别加入一定量的1mM或10nM铜离子母液，随后补加去离子水至总体积4ml，铜离子含量分别为1μM、120μM、160μM、200μM、250μM、300μM、350μM、400μM、450μM、500μM、600μM，结果见图4。实验表明随着铜离子浓度的改变，荧光强度也随之发生改变，并呈浓度依赖性变化。当铜离子浓度为600μM时，500nm处荧光信号非常弱，可以认为基本淬灭了醛基碳量子点荧光信号，因此，我们最终选择了0-600μM为铜离子浓度范围。图4碳量子点在不同浓度铜离子情况下的荧光光谱图3.4实验条件优化为了进一步研究铜离子对醛基碳量子点的淬灭是否受淬灭时间、温度及pH值的影响，探究最佳的检测条件，本研究中我们分别设计了不同的淬灭时间、温度及pH值条件研究铜离子对醛基碳量子点的淬灭的影响。淬灭时间的研究分别选择了0,1,5,10,20,30,45,60min来进行研究，从图5A及5B所示实验结果看，1min反应时间就已经大幅降低了500nm的荧光强度，5min时间就基本达到了最大荧光淬灭率，所以，本方法是一种快速检测铜离子浓度的方法。这里我们选择了5min作为实验的反应时间。图5A.反应时间对醛基碳量子点荧光淬灭的影响图5B.反应时间对醛基碳量子点荧光淬灭的影响反应温度的研究分别选择了30℃、35℃、40℃、50℃来进行研究。图6A及6B是温度对铜离子荧光淬灭的影响数据，从数据结果看，在室温（30℃）到50℃温度范围内，铜离子温度对铜离子荧光淬灭基本没有差别，说明醛基碳量子点检测铜离子浓度的温度范围比较广，检测方法对温度不敏感。最终我们选择了30℃作为反应温度。图6A.反应温度对铜离子淬灭醛基碳量子点荧光的影响图6B.反应温度对铜离子淬灭醛基碳量子点荧光的影响pH值的研究分别选择了4、4.4、5、5.6、6、6.4、7、7.6和8来进行研究从pH值对检测的影响看（图7A及7B），铜离子对醛基碳量子点淬灭的影响在pH4.4-8的范围内基本没有太大差别，但当pH=4时，荧光强度的下降明显比其他pH条件下降要更大，所以，用醛基碳量子点荧光淬灭法检测铜离子浓度的方法可以适用于一个较大的pH范围（pH4.4-8)。同时，相比较而言pH5.6在500nm处峰最强，因此，选择了pH5.6作为我们后面检测用的pH值。图7ApH值对铜离子淬灭醛基碳量子点荧光的影响图7BpH值对铜离子淬灭醛基碳量子点荧光的影响3.5选择性考察取800μl醛基碳量子点溶液并加入1mMCu2+、K+、Ba2+、Zn2+、Cd2+、Ca2+、Na+、Pb2+、Ag+、Mg2+母液与去离子水配制成4ml溶液并且使得离子浓度为200μM，测得只有Cu2+有淬灭如图8，故而该方法选择性较好。图8碳量子点荧光淬灭法的选择性3.6抗干扰性考察取800μl醛基碳量子点溶液并分别加入Cu2与K+、Cu2+与Ba2+、Cu2+与Zn2+、Cu2+与Cd2+、Cu2+与Ca2+、Cu2+与Na+、Cu2+与Pb2+、Cu2+与Ag+、Cu2+与Mg2+配制成4ml溶液，如图9测得结果结果能淬灭，证明醛基碳量子点荧光探针抗干扰性很好。图9铜离子对醛基碳量子点荧光淬灭的抗干扰性3.7线性考察分别加入800μl2mg/ml的醛基碳量子点溶液至19根比色管中，其中一根比色管中加入pH为5.6的缓冲溶液至总体积为4ml，其余18根比色管中分别加入一定量的1mM或10nM铜离子母液，加入pH5.6的缓冲溶液至总体积4ml，铜离子含量分别为1μM、2μM、4μM、8μM、16μM、20μM、40μM、80μM、120μM、160μM、200μM、250μM、300μM、350μM、400μM、450μM、500μM、600μM，检测结果如图10，计算得到在0-400μM时存在线性关系为y=0.0371+0.0021x，其中y为荧光淬灭效率，x为Cu2+浓度，检测限为0.29μM。图10铜离子浓度与醛基碳量子点荧光淬灭率的线性关系3.8样品测定及回收率将生蚝样品放入冰箱冷藏8小时，之后将生蚝样品取出放入冻干机冻干，将冻干样品研磨成粉状，称取2.5克样品，接着将样品放入电炉170℃碳化至无烟，移入马弗炉于510℃灰化6小时，放冷，用3%硝酸溶解过滤，用pH为5.6的缓冲溶液定容至25ml。加入800μl10mg/ml的醛基碳量子点溶液于试管，接着加入样品溶液至总体积为4ml，再配制空白对照，在370nm激发波长条件下进行荧光扫描。根据上述线性关系得出铜离子浓度为295μM。随后又进行了加标回收实验，结果显示回收率为88.9%～113.4%,表明本实验开发的检测方法可用于实际生蚝样品的检测。Table1.DeterminationresultsofCu2+offreshoyster加入量Added（μM)碳量子点荧光探针CQDsfluorescentprobe测得值Found(μM)回收率Recovery(%)相对标准偏差RSD(%,n=3)300280.293.41.2200177.888.95.6100113.4113.494结论综上所述，本论文采用水热法合成的碳量子点，研究发现该碳量子点以激发波长370nm、发射波长500nm产生的荧光能被铜离子淬灭，进一步优化条件选择pH值5.6时，可检测铜离子的线性浓度范围为0-400μM，检测范围能满足国家规定的食品中铜离子的浓度范围。同时该合成工艺绿色环保（回收率为88.9%～113.4%），灵敏度高（检测限为0.29μM），检测速度快，反应5分钟即可达最大淬灭效率，为检测生蚝中的重金属残留提供了一个快速、高灵敏的新方法。参考文献[1]吴茂江，涂长信．微量元素与健康研究，2005，22(5):64-65．[2]杨雅茹,钟瑶,李帅东,邓梦玲,杨希妍,杨雅茂,姚怡萍.水产品中重金属对人体的危害研究进展[J].农业技术与装备,2020(10):55-56.[3]黄常青,邓金花,秦惠,黄报亮.水中痕量铁的测定方法的研究进展[J].理化检验(化学分册),2018,54(11):1359-1364.[4]MojtabaShamsipur,OmidRezaHashemi,AfsanehSafavi.Flotation-separationandICP-AESdeterminationofultratraceamountsofcopper,cadmium,nickelandcobaltusing2-aminocyclopentene-1-dithiocarboxylicacid[J].AnalyticalSciences,2005,21:1063-1066.[5]吴学倩,贾建华,刘月琴.微波消解-电感耦合等离子体质谱仪（ICP-MS）检测啤酒用糖浆中的铁、锰、铜离子[J].中外酒业·啤酒科技,2019(03):24-28.[6]张恒维.电感耦合等离子体发射光谱法测定地质样品中银和铜的应用研究[D].中国地质大学(北京),2018.[7]GuoqiangXiang,YingmingZhang,XiumingJiang,etal.Determinationoftracecopperinfoodsamplesbyflameatomicabsorptionspectrometryaftersolidphaseextractiononmodifiedsoybeanhull[J].JournalofHazardousMaterials,2010,179:521-525.[8]于刚,秦朋,陈丕茂,秦传新,杨贤庆.微波消解-石墨炉原子吸收光谱法测定壳聚糖膜中铜离子含量[J].食品科学,2015,36(02):201-203.[9]曹志俊，徐丹，邵钰茹，陈丰同步荧光光谱法在分析化学中的应用研究综述科学管理2020,12[10]王鹏新型罗丹明B-色氨酸荧光探针合成及用于铜离子的检测研究西华师范大学学报（自然科学版）2018,12,390-394[11]梁国熙，潘常刚，卢庆等荧光碳量子点的制备及其在Cu2+检测中的应用江苏大学学报（自然科学版）2020,4,440-445[12]EkimovAI,OnushchenkoAA(1981)Quantumsizeeffectinthree-dimensionalmicroscopicsemiconductorcrystals.JETPLett34(6):345–349[13]BrunchezMJr,MoronneM,GinP,etal.Semiconductornanocrystalsasfluorescentbiologicallabels.Science,1998,281(5386):2013-2016[14]MateaCT,MocanT,TabaranF,etal.Quantumdotsinimaging,drugdeliveryandsensorapplications.IntJNanomedicine,2017,12:5421-5431[15]OhE,LiuR,NelA,etal.Meta-analysisofcellulartoxicityforcadmium-containingquantumdots.NatNanotechnol,2016,11(5):479-486[16]刘飞，陈双红，陈思洁，唐瑛，量子点标记在生物成像中的应用研究进展华南国防医学杂志2021Vol359:697-701[17]XuXY，RayR，GuYL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