种子生活力测定

关于种子生活力测定一、实验目的

通过实验，掌握主要作物种子生活力测定方法、基本操作和结果计算。氯化三苯基四氮唑（TTC）法红墨水（酸性大红Ｇ）染色法第2页,共12页，2024年2月25日，星期天二、实验原理1、氯化三苯基四氮唑（TTC）法

凡有生活力的种子胚部在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，而无生活力的种胚则无此反应。当TTC溶液渗入种胚的活细胞内，并作为氢受体被脱氢辅酶(NADH2或NADPH2)还原时，可产生红色的三苯基甲腙（TTF），胚便染成红色。当种胚生活力下降时，呼吸作用明显减弱，脱氢酶的活性亦大大下降，胚的颜色变化不明显，故可由染色的程度推知种子的生活力强弱。第3页,共12页，2024年2月25日，星期天2、红墨水（酸性大红Ｇ）染色法

有生活力的种子其胚细胞的原生质具有半透性，有选择吸收外界物质能力，某些染料如红墨水中的酸性大红Ｇ不能进入细胞内，胚部不染色。而丧失活力的种子其胚部细胞原生质膜丧失了选择吸收的能力，染料进入细胞内使胚部染色，所以可根据种子胚部是否染色来判断种子的生活力。第4页,共12页，2024年2月25日，星期天第5页,共12页，2024年2月25日，星期天三、试材与设备【实验材料】玉米种子【仪器与用具】培养皿、镊子、单面刀片、垫板（切种子用）、烧杯、棕色试剂瓶、搪瓷盘、pH试纸。【试剂】TTC溶液的配制：取1gTTC溶于１L蒸馏水或冷开水中，配制成0.1％的TTC溶液。药液pＨ应在6.5～7.5，以pH试纸试之（如不易溶解，可先加少量酒精，使其溶解后再加水）。红墨水溶液的配制：取市售红墨水稀释20倍（1份红墨水加19份自来水）作为染色剂。第6页,共12页，2024年2月25日，星期天四、实验步骤

1.将玉米种子用温水（30℃）浸泡2～6h，使种子充分吸胀。（待充分吸胀后取出一部分种子，在沸水中煮沸3～5min，作为死种子）2.随机取种子50粒，沿种胚中央准确切开，并取几粒死种子作为对照。3.将每粒种子的一半用TTC法染色，溶液以浸没种子为度。

第7页,共12页，2024年2月25日，星期天4.TTC染色的种子放入30～35℃的恒温箱内保温30min.也可在20℃左右的室温下放置40～60min；红墨水法室温染色10～20min5.保温后，倾出药液，用自来水冲洗2～3次，立即观察种胚着色情况，判断种子有无生活力，把判断结果记入表1内。第8页,共12页，2024年2月25日，星期天表1染色法测定种子生活力记载表种子活力（％）＝有活力的种子数/种子总数×100%第9页,共12页，2024年2月25日，星期天【注意事项】

1.TTC溶液最好现配现用，如需贮藏则应贮于棕色瓶中，放在阴凉黑暗处，如溶液变红则不可再用。2.染色温度一般以25～35℃为宜。3.判断有生活力的种子应具备：胚发育良好、完整、整个胚染成鲜红色；子叶有小部分坏死，其部位不是胚中轴和子叶连接处；胚根尖虽有小部分坏死，但其它部位完好。4.TTC反应结束，从黑暗下取出后立即观察，因光下久放TTC本身会变色。5.不同作物种子生活力的测定，所需试剂浓度、浸泡时间、染色时间不同。现将主要作物种子生活力测定所需条件列入下表。第10页,共12页，2024年2月25