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文档简介

一、目的1、学习微生物涂片、染色的基本技术；2、掌握细菌的简单染色和革兰氏染色；3、了解革兰氏染色法的原理及其在细菌分类鉴定中的重要性；4、巩固显微镜油镜的使用方法。二、基本原理

革兰氏染色法是由丹麦医生C.Gram于1884年发明，是细菌学中最重要的鉴别染色法。革兰氏染色法的基本步骤是：先用初染剂结晶紫进行染色，再用碘液媒染，然后用乙醇脱色，最后用复染剂复染。各种细菌经革兰氏染色法染色后，能区分成两大类，一类最终染成紫色，称革兰氏阳性细菌（G＋），另一类被染成红色，称革兰氏阴性细菌（G－）。革兰氏染色阴性革兰氏染色阳性

三、器材1、菌种大肠杆菌、四联球菌

12～18h营养琼脂斜面培养物；2、染色剂革兰氏染色液3、仪器或其他用具光学显微镜、酒精灯、载玻片、香柏油、二甲苯、擦镜纸、牙签。四、操作步骤1、细菌的简单染色用牙签挑取少许牙垢涂片、固定、干燥染色1～2min水洗、干燥、镜检。2、细菌的革兰氏染色在无菌操作下用接种环挑取少许细菌斜面培养物涂片、固定、干燥、初染1分钟媒染1分钟脱色20～30s复染1分钟、水洗、干燥、镜检。五、实验报告1、绘图示你自己牙垢的细菌形态图；2、说明染色观察各菌的形状、颜色和革兰氏染色反应；3、思考题见实验教材（老）P.30～31

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