中药制剂的含量测定

中药指纹图谱与特征指纹图谱指纹图谱：系指中药包括中药材、饮片、提取物或中成药经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示该中药主要化学成分特性的色谱或光谱图谱，中药质量评价中常用色谱指纹图谱。特征指纹图谱：系指从中药指纹图谱中选取若干专属性强的色谱峰或色谱峰组合组成特征指纹图谱。主要用于中药的专属性鉴别。中药制剂教研室中药指纹图谱与特征指纹图谱指纹图谱：系指中药包括中药材、饮片1特点中药制剂教研室特点中药制剂教研室2特点中药制剂教研室特点中药制剂教研室3中药制剂教研室中药制剂分析工作的基本程序？

一、取样二、供试品溶液的制备三、鉴别四、检查五、含量测定六、原始记录和检验报告复习中药制剂教研室中药制剂分析工作的基本程序？一、取4中药制剂教研室复习TLC鉴别的实验步骤？供试品溶液的制备

对照物的选择薄层板的制备点样展开显色与检视结果记录与保存

中药制剂教研室复习TLC鉴别的实验步骤？供试品溶液的制备5中药制剂教研室1.对照品对照：一种或几种对照品2.阴阳对照法：阳性对照液/阴性对照液3.对照药材和对照品同时对照

对照物的选择？复习中药制剂教研室1.对照品对照：一种或几种对照品对照物的选择6中药制剂教研室第四章中药制剂的含量测定中药制剂教研室第四章7中药制剂教研室大纲要求掌握中药制剂含量测定的目的特点掌握含量测定样品处理的目的及作用掌握方法学考察试验内容熟悉样品提取分离常见的方法及其特点熟悉色谱法分离净化样品常用填料及其特点中药制剂教研室大纲要求掌握中药制剂含量测定的目的特点8中药制剂教研室概述目的通过制剂中某种成分的含量高低是否符合规定来判定药物是否合格意义保证中药制剂的质量，达到临床用药有效、安全、稳定中药制剂教研室概述目的通过制剂中某种成分的含量9第一节样品处理第一节样品处理10中药制剂教研室含量测定样品的处理1.除去杂质、纯化样品，提高分析方法的重现性和准确度2.富集浓缩或进行衍生化3.制成便于分析测定的稳定试样4.使试样的形式及所用溶剂符合分析测定的要求目的中药制剂教研室含量测定样品的处理1.除去杂质、纯化样品，提高11中药制剂教研室含量测定样品的处理1.粉碎2.提取3.分离净化步骤中药制剂教研室含量测定样品的处理1.粉碎步骤12中药制剂教研室含量测定样品的处理一、样品的粉碎目的：1.保证所取样品均匀而有代表性，提高测定结果的精密度和准确度2.加速被测定组分的提取完全中药制剂教研室含量测定样品的处理一、样品的粉碎13中药制剂教研室含量测定样品的处理一、样品的粉碎1.避免过细2.避免样品受污染3.避免粉尘飞散及挥发性成分的损失4.避免丢弃不易通过筛孔的部分颗粒粉碎机、研钵、高速匀浆机、玻璃匀浆器细粉：全部通过5号筛（80目），并含能过6号筛（100目）不少于95％的粉末注意设备中药制剂教研室含量测定样品的处理一、样品的粉碎细粉：全部通过14中药制剂教研室含量测定样品的处理二、样品的提取冷浸法（浸泡提取法）回流提取法连续回流提取法超声提取法超临界流体提取法中药制剂教研室含量测定样品的处理二、样品的提取15中药制剂教研室含量测定样品的处理浸泡提取法中供试品的制备方式1.部分测定法（分量法）：即将浸泡后的溶液，用适宜滤器滤过，精密量取一定体积，进行测定注：此法不适宜挥发性较大的提取溶剂中药制剂教研室含量测定样品的处理浸泡提取法中供试品的制备方式16中药制剂教研室含量测定样品的处理浸泡提取法中供试品的制备方法2.全部测定法（即总量测定法）：将浸泡后的溶液滤过，滤渣充分用溶剂洗涤至提取完全，合并滤液及洗液，浓缩或蒸干，残留物用另一溶剂溶解，定量转入量瓶中，稀释至刻度，摇匀，进行测定注意：转移完全中药制剂教研室含量测定样品的处理浸泡提取法中供试品的制备方法17中药制剂教研室乙肝宁颗粒（黄芪甲苷）中国药典2005年版一部P291供试品溶液的制备取装量差异下的本品，研细，取约5g或1g（无蔗糖），精密称定，加水20ml使溶解，用以水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨试液20ml分2次洗涤，取正丁醇液，用以正丁醇饱和的水20ml分2次洗涤，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。中药制剂教研室乙肝宁颗粒供试品溶液的制备取装量差18中药制剂教研室三、样品的分离净化原则：从提取液中除去对测定有干扰的杂质，而又不损失被测定成分依据：被测定成分和杂质在理化性质上的差异，结合测定方法的要求中药制剂教研室三、样品的分离净化19中药制剂教研室含量测定样品的处理三、样品的分离净化（色谱法）固相萃取（Solid-PhaseExtraction）/液-固萃取（Liquid-SolidExtraction)

当目标分析物与SPE填料极性相似时，样品流过SPE柱后，目标化合物在填料上有较好的保留，而极性与填料相差较远的非目标化合物或杂质直接流出，再用适当洗脱液把目标化合物洗脱、收集，可直接分析或浓缩后分析；或使杂质保留于柱上，直接洗脱被测成分进行测定。原理中药制剂教研室含量测定样品的处理三、样品的分离净化（色谱法）20中药制剂教研室含量测定样品的处理LSE常用的净化剂（填料）硅胶、氧化铝键合相硅胶大孔树脂聚酰胺硅藻土离子交换树脂中药制剂教研室含量测定样品的处理LSE常用的净化剂（填料）21中药制剂教研室含量测定样品的处理硅胶作用机制：溶质在吸附剂表面的极性吸附作用特点：通常适于酸性和中性物质的分离；如分离碱性物质，可在展开剂中加入少量稀碱（如三乙醇胺）常见的商品硅胶柱为SEP-PAKLSE常用的净化剂中药制剂教研室含量测定样品的处理硅胶LSE常用的净化剂22中药制剂教研室含量测定样品的处理键合相硅胶借助于化学反应的方法将固定液的官能团键合在硅胶的表面而构成键合相硅胶。有机硅烷与硅胶表面化学键合反应，形成的-Si-O-Si-C-键是对溶剂、热和化学稳定的结构LSE常用的净化剂中药制剂教研室含量测定样品的处理键合相硅胶LSE常用的净化剂23中药制剂教研室含量测定样品的处理键合相硅胶

常用的有十八烷基（octadecylsilane；C18/ODS)、氨基、氰基键合相键合相硅胶。分别将氨丙硅烷基（-Si-CH2-CH2-CH2-NH2）及氰乙硅烷基（-Si-CH2-CH2-CN）键合在硅胶上而制成。LSE常用的净化剂中药制剂教研室含量测定样品的处理键合相硅胶LSE常用的24中药制剂教研室中药制剂教研室25中药制剂教研室含量测定样品的处理氧化铝类型：碱性氧化铝、中性氧化铝和酸性氧化铝分离机制：溶质在吸附剂表面的极性吸附作用碱性氧化铝适于碱性和中性物质的分离酸性和中性氧化铝适于分析酸性和中性物质LSE常用的净化剂中药制剂教研室含量测定样品的处理氧化铝LSE常用的净化剂26中药制剂教研室八宝坤顺丸中国药典2005年版一部P311对照品溶液的制备取芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含30ug的溶液，摇匀，即得。供试品溶液的制备取重量差异项下的本品，剪碎，取约2g，精密称定，精密加入70%甲醇50ml，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，滤过，精密量取续滤液25ml，通过中性氧化铝柱（100~200目，2g，内径1cm，用50%甲醇湿法装柱），收集至50ml量瓶中，再用50%甲醇洗脱，收集洗脱液至近刻度，加50%甲醇至刻度，摇匀，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液10ul与供试品溶液10~15ul，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每丸含白芍以芍药苷计，不得少于2.6mg。中药制剂教研室八宝坤顺丸对照品溶液的制备27中药制剂教研室中药制剂教研室28中药制剂教研室含量测定样品的处理大孔树脂类型：极性和非极性特点：表面积大，传质速率较高，具有不同的极性及适于吸附较大分子极性大孔树脂：为丙稀酰胺聚合物，对极性化合物有相对强的吸附力非极性大孔树脂：为苯乙烯和二乙烯苯的共聚物，对非极性水溶性成分有吸附力LSE常用的净化剂中药制剂教研室含量测定样品的处理大孔树脂LSE常用的净化剂29中药制剂教研室含量测定样品的处理大孔树脂使用处理：使用前用甲醇、乙醇、丙酮等有机溶剂除去杂质LSE常用的净化剂中药制剂教研室含量测定样品的处理大孔树脂LSE常用的净化剂30中药制剂教研室含量测定样品的处理聚酰胺机制：主要通过与溶质形成氢键而产生吸附作用用于含酚、酸、醌类药物样品液的净化分离LSE常用的净化剂中药制剂教研室含量测定样品的处理聚酰胺LSE常用的净化剂31中药制剂教研室含量测定样品的处理硅藻土、纤维素亲水性填料机制：分配作用应用：多以水基质液为固定相，与水不混溶的有机溶剂为流动相，较亲脂的成分从固定相转移到流动相，而被洗脱。LSE常用的净化剂中药制剂教研室含量测定样品的处理硅藻土、纤维素LSE常用的净32中药制剂教研室含量测定样品的处理离子交换树脂特点：可除去样品中的离子，防止组分分解，用于萃取样品液中可解离化合物弱酸性药物：中性和碱性条件下用阴离子交换树脂柱，水及有机溶剂洗脱后，酸性溶液洗目标成分LSE常用的净化剂中药制剂教研室含量测定样品的处理离子交换树脂LSE常用的净化33中药制剂教研室含量测定样品的处理活化以与样品溶剂性质相似的溶剂对SPE柱进行活化，用量约1-2ml/100mg。上样液态或溶解后的样品倒入活化后的SPE柱，使样品匀速通过SPE柱。淋洗用洗脱能力较弱的溶剂淋洗，以去除杂质。洗脱用洗脱能力较强的溶剂把仍保留在填料上的目标化合物洗脱、收集。LSE使用方法中药制剂教研室含量测定样品的处理活化以与样品溶剂性质相似34中药制剂教研室中药制剂教研室35中药制剂教研室LLE与LSE法的区别成本低：减少溶剂的使用量回收率高精确度高：无乳化现象蒸发少安全易自动化含量测定样品的处理中药制剂教研室LLE与LSE法的区别成本低：减少溶剂的使用36中药制剂教研室常用定量分析方法一、化学分析法(5)二、可见－紫外分光光度法(4)三、薄层扫描法(3)四、气相色谱法(2)五、高效液相色谱法(1)六、荧光分析法(6)七、原子吸收分光光度法(7)八、高效毛细管电泳法中药制剂教研室常用定量分析方法一、化学分析法(5)37中药制剂教研室系统适应性内容一、理论踏板数二、分离度三、重复性四、拖尾因子中药制剂教研室系统适应性内容一、理论踏板数38中药制剂教研室理论塔板数(有效塔板数)是衡量色谱柱分离能力高低的重要指标，买来一个色谱柱，一定先看它给出的柱效指标(N)，就是指N的大小，只有N比较大，对难分离的物质才能够给出满意的结果。理论踏板数系统适应性内容中药制剂教研室理论塔板数(有效塔板数)是衡量色谱柱分离39中药制剂教研室定义

在规定的色谱条件下，注入供试品溶液或内标物质溶液，记录色谱图，量出供试品主成分峰或内标物质峰的保留时间（tR)和半高峰宽(Wh/2)，按下式计算色谱柱的理论塔板数。N=5.54(tR/Wh/2)2保留时间tR：从进样开始到组分出现浓度极大点时所需时间，即组分通过色谱柱所需要的时间理论踏板数系统适应性内容中药制剂教研室定义N=5.54(tR/Wh/2)2保留时40中药制剂教研室系统适应性内容色谱图：样品被流动相冲洗，通过色谱柱，流经检测器，所得到的信号－洗脱时间曲线称为色谱流出曲线（简称流出曲线），即色谱图中药制剂教研室系统适应性内容色谱图：样品被流动相冲洗，通过色41中药制剂教研室半峰宽W1/2：峰高一半处所对应的峰宽峰宽W：正态分布色谱曲线两拐点切线与基线相交的截距系统适应性内容中药制剂教研室半峰宽W1/2：峰高一半处所对应峰宽W：正态分42中药制剂教研室

指待测峰与其他峰、内标峰或特定的杂质对照峰之间的分离情况。分离度衡量色谱分离条件优劣的参数系统适应性内容TLC中药制剂教研室指待测峰与其他峰、内标峰或特定的杂质对43中药制剂教研室中药制剂教研室44中药制剂教研室取对照品溶液，连续进样5次，求峰面积的相对标准偏差（RSD),一般应不大于2.0％重复性系统适应性内容HPLC/GC同一供试品溶液在同一薄层板上平行点样的待测成分的峰面积测量值的相对标准偏差应不大于3.0％，需显色后测定的相对标准偏差不大于5.0％TLC中药制剂教研室取对照品溶液，连续进样5次，求峰面积的相45中药制剂教研室

拖尾因子T=W0.05h/2d1W0.05h:为0.05峰高处的峰宽d1：为峰顶点至峰前沿之间的距离T应在0.95～1.05之间(峰高法定量时）系统适应性内容中药制剂教研室拖尾因子T=W0.05h/2d1W0.046中药制剂教研室方法学验证（效能指标）一、专属性二、线性与范围三、精密度试验四、准确度试验五、稳定性试验六、检测灵敏度及检测限的测定七、耐用性中药制剂教研室方法学验证（效能指标）一、专属性47中药制剂教研室专属性（specificity）

指在其他成分（杂质、降解物、辅料等）可能存在情况下，采用的方法能准确测定出被测物的特性，能反映该方法在有共存物时对供试物准确而专属的测定能力，是指该法用于复杂样品分析时是否受到相互干扰程度的度量。方法学验证（效能指标）中药制剂教研室专属性（specificity）指48中药制剂教研室A:阴性对照溶液色谱图；B:欧前胡素对照品溶液色谱图；C:供试品溶液色谱图方法学验证（效能指标）中药制剂教研室A:阴性对照溶液色谱图；方法学验证（效能指标）49中药制剂教研室线性（Linearity）与范围设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度。方法学验证（效能指标）线性的含义线性考察的方法浓度点n应为5～7，用浓度c对峰高h或被测物的响应值之比进行回归处理，建立回归方程，r≥0.999（TLC≥0.995)中药制剂教研室线性（Linearity）与范围设计的范50中药制剂教研室线性（Linearity）与范围

确定样品浓度与峰面积/峰高是否呈线性关系

确定线性范围

直线是否通过原点方法学验证（效能指标）目的范围的含义指达到一定精密度、准确度和线性，测试方法适用的高、低限浓度或量的区间中药制剂教研室线性（Linearity）与范围方法学验证（效51中药制剂教研室qqμg)峰面积均值0.08106201.02885201.0119200.994900.24318605.17249609.8347614.496890.32424805.34619804.7837804.221250.486361211.549191211.23081210.912350.648481617.023321614.73281612.442380.810602006.691772006.55982006.42786中药制剂教研室qqμg)峰面积均值0.08106201.0252中药制剂教研室中药制剂教研室53中药制剂教研室精密度试验（precision）定义指在规定条件下，同一个均匀样品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。用偏差（d）、标准偏差(SD)、相对标准偏差(RSD)（变异系数，CV）表示。方法学验证（效能指标）中药制剂教研室精密度试验（precision）定义方法学验证54中药制剂教研室重复性

(repeatability)中间精密度（mid-precision)重现性(reproducibility)精密度试验（precision）方法学验证（效能指标）中药制剂教研室重复性(repeatability)精密度试55中药制剂教研室在相同条件下，由同一个分析人员测定所得结果的精密度。重复性(repeatability)方法学验证（效能指标）在规定的范围内，取同一浓度的供试品，至少测6次进行评价或设计3个不同浓度，每个浓度各分别制备3份供试品溶液进行测定，用9次测定结果评价定义要求中药制剂教研室在相同条件下，由同一个分析人员测定所得结56编号取样量（ml）峰面积平均峰面积测得量（µg）含量（µg/ml）平均值（µg/ml）RSD（%）14.00894.21088898.50323896.357055182.09345.5244.701.0924.00867.93341867.21960867.576505176.24644.0634.00876.81049878.23889877.52469178.26744.5744.00885.51129883.42120884.466245179.67844.9254.00879.37677877.07513878.22595178.41044.664.00875.81073877.34985876.58029178.07644.52取同一批号（20100701）的本品4ml，精密量取，平行取6份，依法制成供试品溶液，分别量取20μl各供试品溶液及对照品溶液注入液相色谱仪测定，计算欧前胡素含量及相对标准偏差，结果见表，表明方法重复性好。编号取样量（ml）峰面积平均峰面积测得量（µg）含量（µg/57中药制剂教研室

2.中间精密度同一实验室，不同时间由不同分析人员用不同设备所得结果的精密度。

3.重现性(reproducibility)不同实验室，不同分析人员测定结果的精密度。

方法学验证（效能指标）已有重现性验证，不需验证中间精密度重现性只有在该分析方法将被法定标准采用时做中药制剂教研室2.中间精密度同一实验室，不同时间由58中药制剂教研室偏差（d）：测量值与平均值之差方法学验证（效能指标）中药制剂教研室偏差（d）：测量值与平均值之差方法学验证（效能59中药制剂教研室标准（偏）差（SD或S）方法学验证（效能指标）中药制剂教研室标准（偏）差（SD或S）方法学验证（效能指标）60中药制剂教研室相对标准（偏）差（RSD）也称变异系数（CV）方法学验证（效能指标）中药制剂教研室相对标准（偏）差（RSD）方法学验证（效能指标61中药制剂教研室指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，用百分回收率表示。准确度（accuracy）方法学验证（效能指标）定义回收试验法加样回收试验法

方法中药制剂教研室指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近62中药制剂教研室空白+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为M。1、回收试验（化学药品）准确度（accuracy）方法学验证（效能指标）中药制剂教研室空白+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值63中药制剂教研室已准确测定药物含量P的真实样品+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为M2、加样回收试验（中药）准确度（accuracy）方法学验证（效能指标）中药制剂教研室已准确测定药物含量P的真实样品+已知量64中药制剂教研室规定的范围内，取同一浓度的供试品，用6个测定结果进行评价或设计3个不同浓度，每个浓度各分别制备3份供试品溶液进行测定，用9次测定结果评价中间浓度加入量与供试品含量控制在1：1一般要求在95～105%范围内RSD一般在3%以内数据要求准确度（accuracy）方法学验证（效能指标）中药制剂教研室规定的范围内，取同一浓度的供试品，用6个65编号取样量（ml）原有量（µg）加入量（µg）测得量（µg）回收率（%）平均回收率（%）RSD（%）高13134.1137.808277.422104.0199.022.97高23134.1137.808266.54196.11高33134.1137.808273.726101.32中1289.491.868180.06698.69中2289.491.868182.147100.96中3289.491.868177.55495.96低1144.745.93489.61297.78低2144.745.93488.56695.50低3144.745.93491.039100.88编号取样量（ml）原有量（µg）加入量（µg）测得量（µg）66中药制剂教研室目的选定最佳的测定时间范围方法

取对照品和样品液各一份，分别在制备后4、8、12、16、24、48h测定求RSD≦2.0%稳定性试验中药制剂教研室目的稳定性试验67时间0h4h8h12h32h40h48hRSD(%)供试品885.8881879.8532878.0195880.7465883.9976894.3388898.10.8608对照品530.5790528.9254531.8159535.3059535.3739541.4097542.50.9771时间0h4h8h12h32h40h48hRSD(%)供试品868中药制剂教研室检测限（limitofdetection，LOD）定义指试样在确定的实验条件下，被测物能被检测出的最低浓度或含量。要求是限度检验效能指标，无需定量测定，只要指出高于或低于该规定浓度即可。方法学验证（效能指标）中药制剂教研室检测限（limitofdetection，69中药制剂教研室检测限（limitofdetection，LOD）确定LOD方法1.直观法：用一系列已知浓度的供试品进行分析，试验出能被可靠地检测出的最低浓度或量2.信噪比法：把已知低浓度供试品测出的信号与空白样品测出的信号进行比较，算出能被可靠地检测出的最低浓度或量。

方法学验证（效能指标）一般以信噪比为3：1或2：1时相应浓度或注入仪器的量确定检测限中药制剂教研室检测限（limitofdetection，70中药制剂教研室指样品中被测物能被定量测定的最低量，结果应具有一定准确度和精密度要求。常用信噪比法确定定量限，一般以信噪比（S/N）为10∶1时相应的浓度或注入仪器的量进行确定。定量限（limitofquantitaion，LOQ）方法学验证（效能指标）中药制剂教研室指样品中被测物能被定量测定的最低量，结果71中药制剂教研室1.指测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度，为常规检验提供依据。2.开始研究分析方法时，就应考虑其耐受性3.如果条件要求苛刻，应在方法中写明4.变动因素：测试液的稳定性、样品提取次数、时间5.液相色谱法：流动相的组成和pH值，不同厂牌或不同批号的同类色谱柱、柱温，流速等。6.GC法：不同厂牌或批号的色谱柱、固定相，不同类型的担体及柱温、进样口和检测器温度等7.TLC法：吸附剂或薄层板的型号和厂牌，展开时的温度、湿度等耐受性方法学验证（效能指标）中药制剂教研室1.指测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的72柱温变动的影响样品不同柱温条件下峰面积相对标准偏差%35℃25℃对照品535.3740(32h)541.07400.6892537.1292(32h)541.9327供试品883.9976(32h)889.91310.2190887.3354(32h)886.9148柱温变动的影响样品不同柱温条件下峰面积相对标准偏差%35℃73中药制剂教研室流动相组成比例变化的影响样品不同流动相组成条件下峰面积相对标准偏差%63:3755:45供试品885.8881（0h）863.01731.7307%886.3683（0h）866.3838中药制剂教研室流动相组成比例变化的影响样品不同流动相组成条74中药制剂教研室色谱柱的影响样品不同色谱柱条件下峰面积相对标准偏差%色谱柱1色谱柱2对照品541.4097(40h)543.59810.3096542.4932(48h)545.0605供试品894.3388(40h)904.46230.4719898.0939(48h)899.9722中药制剂教研室色谱柱的影响样品不同色谱柱条件下峰面积相对标75中药制剂教研室流动相流速的影响样品不同流速条件下峰面积相对标准偏差%1.0ml/min*0.8ml/min对照品541.0740675.9177915.54541.9327674.57849供试品889.91311106.6318415.83886.91481118.04224供试品（µg/ml）44.3344.510.287中药制剂教研室流动相流速的影响样品不同流速条件下峰面积相对标76中药制剂的含量测定77中药制剂教研室常用定量计算方法外标法内标法中药制剂教研室常用定量计算方法外标法78中药制剂教研室外标法

用与待测组分相同的对照品作对照，以对照品的量对比求算试样中含量的方法叫外标法。

常用定量方法中药制剂教研室外标法用与待测组分相同的对照品作对照，79中药制剂教研室

类型1、外标一点法2、外标两点法3、外标工作曲线法外标法常用定量方法中药制剂教研室外标法常用定量方法80中药制剂教研室=Cs×VsAsCr×VrArCrVrArCsVsAs外标法一点法常用定量方法中药制剂教研室Cs×VsAsCr×VrArCrVr81中药制剂教研室对照品溶液的制备取芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含30μg的溶液，摇匀，即得。（30.2μg/ml）供试品溶液的制备取重量差异项下的本品，剪碎，取约2g，精密称定，精密加入70%甲醇50ml，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，滤过，精密量取续滤液25ml，通过中性氧化铝柱（100～200目，2g，内径1cm，用50%甲醇湿法装柱），收集至50ml量瓶中，再用50%甲醇洗脱，收集洗脱液至近刻度，加50%甲醇至刻度，摇匀，即得。（2.0035g）测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。Ar=50.3As=48.41、当对照品与供试品溶液进样量均为均为10μl时，供试品中芍药苷含量？2、对照品溶液进样量为10μl，供试品溶液进样量15μl时，供试品中芍药苷含量？中药制剂教研室对照品溶液的制备取芍药苷对照品适量，82中药制剂教研室(C1,A1)(C2,A2