《细菌形态学检查》课件

细菌形态学检查1精选课件ppt细菌形态学检查1精选课件ppt形态学检查的目的：①从形态上识别细菌，为细菌分类与鉴别的基础；②了解被检标本中有无细菌；③直接从标本中观察到某些细菌，可对少数疾病初步诊断（如结核，脑膜炎等）。2精选课件ppt形态学检查的目的：2精选课件ppt1.普通光学显微镜

原理自然光的波长为0.4μm；显微镜的最大分辨率为0.2μm（前者的一半）；肉眼的分辨率为0.2mm，故放大1000倍，使0.2μm放大到0.2mm。第一节显微镜（microscope）

3精选课件ppt1.普通光学显微镜第一节显微镜（mic

2.暗视野显微镜

常用于活的微生物的动力检测

3.相差显微镜

利用相差板的光栅作用，使光波穿过标本中密度不同的部位时，引起位相差，显出光的强度的明暗对比。应用于活菌的形态及某些内部结构的观察。

4.荧光显微镜

以紫外光或蓝紫光作光源，因其波长比自然光短，故分辨率比普通显微镜要高。4精选课件ppt2.暗视野显微镜3.相差显微镜4.荧光显微镜4精选课件p

5.电子显微镜：

以强大的电子流代替光源，因电子流的波长仅为0.005nm，（仅为可见光源的几万分之一），故其放大倍数可达10万-100万倍，可看清1nm的物体。

电镜种类

透射电镜：因电子的透射作用，可观察细菌，virus内部结构，通过荧屏显示。

扫描电镜：因电子流对物体的表面进行扫描，可清楚的显露出物体的三维空间的立体结构，可用于对细菌，virus的结构观察。5精选课件ppt5.电子显微镜：扫描电镜：因电子流仅用于细菌动力的观察。

1.压滴法

明视野法、暗视野法。

2.悬滴法

3.毛细管法：孔径0.5-1.0mm，长约60-70mm毛细管，以此管轻取细菌培养物，待液体进入后，两端火焰封融。用于厌氧菌的动力观察。注意：区别细菌的运动与布朗运动。第二节不染色细菌标本检查法6精选课件ppt仅用于细菌动力的观察。第二节不染色细菌标本检查一：染料：大多是人工合成的含苯环或苯的有机物。

色基：即连接在苯环上带双键的有色化学基团，它使染料带颜色，其色基越多，颜色越深

如-NO2(硝基）\-N=N-（偶氮基）

助色基：不显色，它决定了染料与被染物之间的亲和性，且有酸、碱之分，决定了染料的酸碱性:-NH2（碱性）-OH（酸性）

第三节细菌染色标本的检查7精选课件ppt一：染料：大多是人工合成的含苯环或苯的有机物。第三节细常用染料种类：

碱性染料：美兰，结晶紫，碱性复红等，色基带正电，易与带负电的被染物结合着色

酸性染料：伊红，酸性复红，刚果红，色基带负电

复合染料：可与cell浆结合

单纯染料：多为偶氮化合物，亲和力低，不溶于水，而溶于脂溶剂。8精选课件ppt常用染料种类：8精选课件ppt二染色程序：基本步骤：

涂片（干燥）

固定染色（初染、煤染、脱色、复染）

1.涂片制备：液体标本（细菌培养液）直接涂于玻片上；固体培养基上的培养物，取生理盐水涂片，涂成蚕豆大小的菌膜。9精选课件ppt二染色程序：1.涂片制备：9精选课件ppt2.固定：目的：①杀死细菌，使蛋白质凝固，易于着色②改变其通透性，利于染料进入③使菌体附着在玻片上④保持细菌原有的形态、结构方法：常用的火焰加热固定法。10精选课件ppt2.固定：10精选课件ppt3.染色：目的：加固初染媒染剂：石炭酸，碘液，明矾，酚等，也可加热。目的：使不该染上颜色的部分脱下颜色脱色剂：酸（为碱的脱色剂）碱（为酸的脱色剂），还有甲醇，乙醇等脱色机制：影响蛋白质的电离程度，改变其电荷的性质或数量，从而影响细菌与染料结合的程度初染媒染脱色11精选课件ppt3.染色：目的：使不该染上颜色的部分脱下颜（对比染色）常用染料：稀释复红、沙黄（与紫色对比）、美兰、苦味液（与红色对比）

复染12精选课件ppt（对比染色）复染12精选课件ppt三：常用的染色法

（一）单染法：用一种染料染，细菌及周围部分都染成同一种颜色主要用于观察细菌的形态、大小、排列及简单的结构，如美兰染色，复红染色。（二）复染法：用两种以上的染料，将不同的细菌或同一细菌的不同结构染成不同的颜色。13精选课件ppt三：常用的染色法

（一）单染法：13精选课件ppt由丹麦细菌学家ChristainGram首创，已有100多年的历史。

染料：结晶紫、卢戈氏碘液、95%酒精、稀释石炭酸复红

1.革兰染色法（Gramstain):14精选课件ppt由丹麦细菌学家ChristainGram首创，已有1原理：

（1）等电点学说：革兰阳性菌ph2-3,低于革兰阴性菌ph4-5。

（2）化学学说：革兰阳性菌含大量核糖核酸镁盐。

（3）通透性学说：革兰阳性菌cellwall因肽聚糖厚，脂类少，通透性低，酒精不易进入脱色，相反革兰阴性菌肽聚糖少，含脂多，易被酒精溶解，使cellwall通透性升高。15精选课件ppt原理：15精选课件ppt结晶紫（初染）卢戈氏碘液（媒染）95%酒精（脱色）稀释石炭酸复红（复染）1min水洗1min水洗1min水洗结果：意义：方法：16精选课件ppt结晶紫（初染）卢戈氏碘液（媒染）95%酒精（脱色）稀释石炭2.抗酸染色（acid-faststain）

原理：分枝杆菌一般不易着色，若用5%石炭酸复红加温并延长染色时间，可染上红色，又因其菌体中含有分枝菌酸，可抵抗3%盐酸酒精的脱色，仍保持红色，故称为抗酸菌。17精选课件ppt2.抗酸染色原理：分枝杆菌一般不易着色，若用5%石炭

方法：石炭酸复红（初染）盐酸酒精脱色碱性美兰（复染）1min加热至冒蒸汽5min涂片、干燥、固定18精选课件ppt方法：石炭酸复红（初染）盐酸酒精脱色碱性美兰（复染）1m结果：意义：19精选课件ppt结果：19精选课件ppt细胞壁染色：

染液：10％鞣酸溶液、0.5％结晶紫溶液方法：涂片自然干燥→鞣酸染15min，水洗→结晶紫染3~5min，水洗→待干，镜检。结果：细胞壁（细菌的周边）染成紫色，内部无色；无细胞壁的细菌（L型菌）整个菌体染成紫色。3.特殊染色法鞭毛染色法芽孢染色法荚膜染色法异染颗粒染色法20精选课件ppt3.特殊染色法鞭毛染色法芽孢染色法2021精选课件ppt21精选课件ppt22精选课件ppt22精选课件ppt23精选课件ppt23精选课件ppt24精选课件ppt24精选课件ppt25精选课件ppt25精选课件ppt26精选课件ppt26精选课件ppt27精选课件ppt27精选课件ppt透射电镜28精选课件ppt透射28精选课件ppt扫描电镜29精选课件ppt扫描电镜29精选课件ppt30精选课件ppt30精选课件ppt革兰阴性菌（红色）革兰阳性菌（紫色）31精选课件ppt革兰阴性菌（红色）革兰阳性菌（紫色）31精选课件ppt12332精选课件ppt12332精选课件ppt图一图二33精选课件ppt图一图二33精选课件ppt鞭毛染色法34精选课件ppt鞭毛染色法3