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Ⅱ卷必考题型专练7生物技术实践(限时:25分钟)1.(2016·石家庄模拟)生活饮用水已经过沉淀、过滤、加氯消毒等处理,含微生物很少,但当其水源不洁或处理达不到要求时,仍然会含相当量的微生物甚至含有致病性微生物。供水管道破损及二次供水等环节也可能导致生活饮用水的污染。因此生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的。我国生活饮用水水质标准(GB5749—85)中规定生活饮用水中细菌总数不得大于100个/mL,总大肠菌群不得大于3个/L。(1)检验大肠杆菌的含量时,通常将水样进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养,记录菌落数量,这种方法称为________。(2)用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组?________,为什么?___________________________________________________________。(3)如分别取0.1mL已稀释102倍的水样分别涂布到四个琼脂固体培养基的表面进行培养,培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为161、155、158、170,则每升原水样中大肠杆菌数为________。(4)纯化大肠杆菌时使用的培养基一般用____________法灭菌,________(填“可”或“不可”)用加入抗生素的方法防止杂菌感染。(5)如果要测定水中的病毒种类,可以用________技术使其遗传物质扩增,然后用______________技术进行鉴定。【解析】(1)检验大肠杆菌的含量时,通常将水样进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养,记录菌落数量,这种方法称为稀释涂布平板法。(2)用稀释涂布平板法统计样本菌落数时需要设置对照组,通过设置对照组来判断培养基是否被污染。(3)如分别取0.1mL已稀释102倍的水样分别涂布到四个琼脂固体培养基的表面进行培养,培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为161、155、158、170,由题意可知,每升原水样中大肠杆菌数为(161+155+158+170)×102/(4×0.1×10-3)=1.61×108个/L。(4)培养基一般用高压蒸汽灭菌法灭菌,不可用加入抗生素的方法防止杂菌感染,因为大肠杆菌对抗生素也敏感。(5)遗传物质扩增常用PCR技术,可用DNA分子杂交技术测定水中的病毒种类。【答案】(1)稀释涂布平板法(2)需要因为需要判断培养基是否被污染(3)1.61×108(4)高压蒸汽灭菌不可(5)PCRDNA分子杂交2.(2016·湖北八校模拟)植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列相关问题:(1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由3种组分形成的复合酶,其中的葡萄糖苷酶可将__________分解成__________。(2)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)染料时,CR可与纤维素形成__________色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的__________。(3)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落并加以鉴定,某同学设计了甲、乙两种培养基:酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR溶液水培养基甲++++-++培养基乙+++-+++(注:“+”表示“有”,“-”表示“无”)据表判断,培养基甲__________(填“能”或“不能”)用于分离纤维素分解菌,原因是______________________;培养基乙____________________(填“能”或“不能”)用于鉴定纤维素分解菌,原因是______________________。【解析】(1)葡萄糖苷酶可将纤维二糖分解成葡萄糖,(2)刚果红与纤维素形成红色复合物,当纤维素被纤维素酶分解后,红色复合物无法形成,出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。(3)维素分解菌分离和鉴别培养基属于固体培养基,而培养基甲中没有琼脂,是液体培养基,要分离和鉴别纤维素分解菌,需要以纤维素为主要碳源的培养基,培养基乙不具有选择的作用。【答案】(1)纤维二糖葡萄糖(2)红透明圈(3)不能液体培养基不能分离单菌落不能培养基中没有纤维素(不能形成CR-纤维素红色复合物)3.(2016·高考押题卷)请回答有关物质提取、微生物培养与应用的问题:【导学号:15482102】(1)实验室分离叶绿体中的色素常用的方法是__________;从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是__________法。(2)微生物培养过程中,获得纯净培养物的关键是__________。常用的对培养皿进行灭菌的方法是__________。(3)从土壤中分离尿素分解菌的过程中,应向以____________为唯一氮源的培养基中加入____________指示剂。(4)纯化菌种和统计某活菌的数目时,宜采用的接种方法是____________,用这种方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低,其原因是____________。【解析】(1)常用纸层析法分离叶绿体中的色素;胡萝卜中的胡萝卜素易溶于有机溶剂,常用萃取法提取。(2)微生物培养过程中,获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵,常用的对培养皿进行灭菌的方法是干热灭菌法。(3)尿素分解菌能将尿素分解成氨,氨会使培养基的碱性增强,pH升高,酚红指示剂在碱性条件下呈红色。(4)纯化菌种和统计某活菌的数目时,宜采用的接种方法是稀释涂布平板法。当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落,故用稀释涂布平板法统计出的菌落数往往比活菌的实际数目低。【答案】(1)纸层析法萃取(2)防止外来杂菌的入侵干热灭菌法(3)尿素酚红(4)稀释涂布平板法当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落4.微生物在人类生活、生产与科研中发挥着重要作用,请回答下列问题:(1)土壤中富含各种微生物,将土壤浸出液接种到特定培养基上,可获得能分解尿素的细菌,从功能上讲,该特定培养基属于________培养基。实验室中获得纯净菌种的接种方法有稀释涂布平板法和____________。其中用稀释涂布平板法接种前,要对样品进行稀释,测定土壤中细菌的数量,一般选用________的稀释液进行平板培养,以保证获得菌落数在________之间、适于计数的平板。(2)幽门螺杆菌含有脲酶,能够分解尿素。现采集样本并制成菌液后,进行分离培养,实验步骤如图:eq\x(配制培养基)→eq\x(灭菌、倒平板)→eq\x(接种)→eq\x(培养)→eq\x(观察)在配制培养基时,加入的尿素能够为幽门螺杆菌提供________;对该培养基灭菌常用的方法是______________________。倒平板和接种操作都需要在__________________附近进行。为了鉴定幽门螺杆菌能够分解尿素,可在培养基中加入________指示剂。【解析】(1)允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称为选择培养基。实验室中获得纯净菌种的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。测定土壤中细菌的数量,一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养,以保证获得菌落数在30~300之间、适于计数的平板。(2)尿素能够为幽门螺杆菌提供氮源。一般用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。倒平板和接种操作都需要在酒精灯火焰附近进行。为了鉴定幽门螺杆菌能够分解尿素,可在培养基中加入酚红指示剂。【答案】(1)选择平板划线法104、105和106倍30~300(2)氮源高压蒸汽灭菌法酒精灯火焰酚红[备选试题](2016·银川一中检测)农村中泡菜的制作方法是:新鲜的蔬菜经过整理、清洁后,放入彻底清洗并用白酒擦拭过的泡菜坛中,然后向坛中加入盐水、香辛料及一些“陈泡菜水”。密封后置于阴凉处,适宜环境温度为28~30℃。有时制作的泡菜会“咸而不酸”或“酸而不咸”,据此分析,回答下列问题。(1)用白酒擦拭泡菜坛的目的是________。(2)若制作的泡菜“咸而不酸”,最可能的原因是__________________。(3)制作过程中,需要加入盐水,其中清水与盐的比例应为________,加入“陈泡菜水”的作用是______________。(4)若要获得优良乳酸菌菌种,应选用培养基培养。培养基中应含有_____、______、水和无机盐,同时需要在培养基中添加________。纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有____________________。培养时还需提供________条件。【解析】(1)作泡菜时,用白酒擦拭泡菜坛的目的是消毒。(2)“咸而不酸”是由于加入的食盐过多,抑制了乳酸菌的无氧呼吸,产生乳酸。(3)在制作泡菜过程中,加入清水和食盐的比例

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