程序性细胞死亡检测 PCD Assays-MCE荧光染料

www.MedChemEInhibitors • ScreeningLibraries • ProteinsPROGRAMMED程序性细胞死亡检测CELLDEATH程序性细胞死亡(ProgrammedCellDeath,PCD)是多细胞生物中由基因调控的细胞自杀过程，对多细胞生物的发育、体内稳态和完整性至关重要。PCD的研究涉及多个领域，如免疫、神经系统发育、癌症、感染等。常见的PCD有细胞凋亡(Apoptosis)、自噬(Autophagy)和焦亡(Pyroptosis)、铁死亡(Ferroptosis)以及近年发现的铜死亡(Cuproptosis)[3]。VacuoleMitochondriaMitoptosisIronParthanstosImmuneNon-apoptoticPyroptosisNon-programmedcelldeathNon-programmedNETosisNecrosiscelldeathNecroptosisprogrammedapoptoticApoptosiscelldeathAnoikisFigure2.细胞死亡方式汇总[4]01细胞凋亡细胞凋亡(Apoptosis)是一种重要的细胞死亡方式，指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主有序的死亡，它在多细胞生物中起着关键的调控作用。细胞凋亡的过程主要包括:染色质固缩、细胞膜起泡、细胞皱缩、凋亡小体的形成和裂解等[5]。正常细胞细胞收缩和膜起泡细胞核塌陷凋亡体形成凋亡小体裂解染色质凝结Figure3.细胞凋亡进程[6]03MCEMasterofBioactiveMolecules凋亡检测方法DetectionCat.No.ProductNameEx(nm)Em(nm)DescriptionHY-15534JC-1515/580527/590线粒体在细胞凋亡中起着枢纽作线粒体膜HY-D0985ATMRE550576用，凋亡发生早期，线粒体膜电位电位检测下降，对线粒体膜电位检测可以判HY-D0084DiOC6(3)486515断凋亡的早期发生HY-D0816Rhodamine123507529HY-P1986Z-DEVD-AFC380500Caspase家族在介导细胞凋亡的CaspasesCaspase过程中起着非常重要的作用，其中HY-P3363Z-DEVD-AMC360450-3为关键的执行分子，它检测在凋亡信号传导的许多途径中发HY-P1169Ac-IETD-AFC380500挥功能，对Caspase-3检测可以HY-P1003Ac-DEVD-AMC360445对凋亡早期/晚期进行判断HY-K1073AnnexinV-FITC/PI488/525535/617ApoptosisDetectionKit

AnnexinV-FITC和PI共染时，正常细胞基本无荧光，早期凋亡细胞呈绿色荧光，晚期凋亡及坏死细胞呈绿色和红色荧光HY-K1075AnnexinV-PEApoptosis565578DetectionKit凋亡检测试剂盒AnnexinV-mCherry587610HY-K1076ApoptosisDetectionKitAnnexinV-mCherry/HY-K1077 SYTOXGreenApoptosis 504/587 523/610DetectionKitOneStepTUNELHY-K1078ApoptosisDetectionKit488525(FITC)

藻红蛋白(Phycoerythrin,PE)标记的重组人AnnexinV来检测细胞凋亡；正常细胞基本无荧光，凋亡细胞呈红色荧光红色荧光蛋白mCherry标记的重组人AnnexinV来检测细胞凋亡。正常细胞基本无荧光，凋亡细胞红色荧光AnnexinV-mCherry和SYTOXGreen联合染色后，正常细胞基本无荧光，凋亡细胞呈红色荧光，坏死细胞呈红色和绿色荧光正常细胞基本无荧光，凋亡细胞呈绿色荧光04www.MedChemEInhibitors • ScreeningLibraries • Proteins02铁死亡铁死亡(Ferroptosis)是一种铁依赖性的、区别于细胞凋亡和细胞自噬的细胞程序性死亡(ProgrammedCellDeath，PCD)方式，依赖于铁介导的氧化损伤、铁积累的增加、自由基的产生，脂肪酸供应与脂质过氧化物增加都是诱导铁死亡的关键。通过检测细胞内铁离子浓度与ROS变化可以很好地判断铁死亡是否发生[7]。GlutamateCystineSystemxPL-OO·2xCysteineViaminENAD(P)HPL-OOHCoQ10FSP1GSHSynthesisGPX4NAD(P)NADPHGSRPL-OH2xGSHSqualeneCoQ10GPX4GSSGFarnesyl-PPPUFAPUFA-CoAPLO2PL-OOHPL-OHACSL4LPCAT3FeHMG-CoAAcetoacetyl-CoA2xAcetyl-CoAFigure4.铁死亡信号通路[8]DetectionCat.No.ProductNameDescriptionHY-K1077AnnexinV-mCherry/SYTOXGreenKit细胞活力检测通过对细胞活力检测判断铁死亡结果HY-U00451ATP-Red1CellViabilityAssayHY-D10207-AADHY-137805Ferrozine诱导铁死亡后会引起二价铁离子聚集，通过铁离子检测HY-D1533RhoNox-1IronIonAssay检测铁离子情况判断铁死亡结果HY-D1913FerroOrange脂质过氧化HY-D1301C11BODIPY581/591诱导铁死亡会导致细胞内脂质ROS升高，通检测HY-D1412LiperfluoLipidPeroxidation过ROS检测判断是否发生铁死亡AssayHY-D0079Dihydroethidium05MCEMasterofBioactiveMolecules03铜死亡铜死亡(Cuproptosis)是铜离子的过度积累导致硫辛酰化蛋白异常聚集，干扰线粒体呼吸相关的铁硫簇蛋白，引起蛋白质毒性应激反应，最终导致细胞死亡。铜与肿瘤细胞中的多个信号通路相关，通过检测细胞内铜离子浓度与细胞活性可以很好地判断铜死亡是否发生[9]。Glucose Elesclomol-CuPyeuvateFe-SClusterLossofFe-SClusterFer-1Nec-1NACTCAXXXCycleCu2+CuCuproptosisSuccinateα-KGFDX1LIASSSTTMMitochondriaDLATLipoylationSSSProteinAggregationFigure5.铜死亡分子机制[10]Cat.No.ProductNameEx(nm)Em(nm)DescriptionHY-141511Coppersensor1543576铜离子检测探针能与铜离子发生配位反应，HY-126823PhenGreenSKDiacetate507532并导致荧光强度的变化。通过观察荧光信号的强度或波长的变化，间接地推断出铜离子HY-123645RhodamineBHydrazide565585的存在和数量HY-D0309Rhodamine6G565585HY-101894Dihydrorhodamine123488525过量铜离子促进线粒体内部的氧自由基产HY-118540Resazurin530590生，导致氧化应激的加剧，通过ROS检测判HY-W0401432',7'-Dichlorofluorescein496525断铜死亡结果HY-D1055MitoSOXRed39661006www.MedChemEInhibitors • ScreeningLibraries • Proteins04氧化应激检测活性氧(ReactiveOxygenSpecies,ROS)是生物有氧代谢过程中的副产物，是一类含氧并且性质活泼的物质的总称，细胞内ROS在氧化应激、细胞分裂分化、免疫激活和衰老等过程中发挥着重要作用，MCE全新ROS探针全球首发，精准靶向特定ROS，可以真正实现对特定ROS的特异性定性定量，高选择性、高灵敏度地检测O2·-、H2O2、HOCl、·OH及ONOO-[11]。[Fe-S]Cluster(Oxidation)[Fe-S]Cluster(FeRelease)-0.16VORadical(NO,Semiquinones)e4eOFlavin,QuinoneRespirationH2ONADPHOxidaseeFlavin,Quinone+0.94VSOD+2.33V[Fe-S]ClustereROSOriginsH2O2FentonReactionHO(Fe,Cu)[Fe-S]Cluster(FeRelease)eLipid(Peroxidation)Metallo-enzyme(Oxidation)Myeloperoxidase+0.46VDNA(Oxidation)Cys,Met(Oxidation)ClAminoAcid(Oxidation)HOCIFigure6.活性氧来源及其生化特性[12]Cat.No.ProductNameEx(nm)Em(nm)FunctionColorHY-130013HKYellow-AM543567ONOO-Probe黄HY-130015HKSOX-1509534O2•-Probe绿HY-130017HKSOX-1r509534O2•-Probe绿HY-130022HKPerox-1520543H2O2Probe绿HY-130025HKOCl-3490527HOClProbe绿HY-D1148HKGreen-4I520543ONOO-Probe绿HY-D1151HKOH-1500520•OHProbe绿HY-D1156AHKSOX-1m509534O2•-Probe绿HY-D0034ABMDMA3804071O2Probe蓝07MCEMasterofBioactiveMolecules05细胞离子检测细胞离子是指在细胞内以离子形式存在的化学元素，它们在细胞的生理过程中起着重要作用，并通过离子通道和转运蛋白进行调节和平衡，适用于肿瘤、炎症、细胞死亡等多种生物学研究[13]。37°C1μM,1hFigure7.Fluo-4AM的染色示例[14]Fluo-4AMCat.No.ProductNameEx(nm)Em(nm)FunctionColorHY-137805Ferrozine562572Fe2+红HY-D1533RhoNox-1540575Fe2+红HY-141511Coppersensor1543576Cu+红HY-D1601N-Aminofluorescein495516Cu2+绿HY-D1435OxonolVI620750K+红HY-D1436PBFI340/380500K+绿HY-101897Fura-2AM336505Ca2+绿HY-D0716Fluo-3AM488526Ca2+绿HY-D0982Zinquin368490Zn2+绿HY-D0159ZnAF-1F489514Zn2+绿HY-128536KMG-104AM495514Mg2+绿HY-D1498Mag-Fluo-4AM475515Mg2+绿HY-126831SBFI-AM380500Na+绿HY-D1760SBFI380500Na+绿HY-D0090MQAE355460Cl-蓝HY-D0936SPQ344443Cl-蓝08MCEMasterofBioactiveMoleculesMCE简介ABOUTUSMedChemExpress(MCE)是全球领先的生命科学品牌，我们的产品涵盖高纯度小分子，高活性大分子及各类常用生物试剂及试剂盒，MCE还可为全球科学家提供一站式的药物筛选及化合物定制等专业的技术服务。我们拥有技术实力强劲的研发团队，严格的质量控制体系，为我们的客户提供7/24专业贴心的服务，MCE始终秉持用稳定优质的产品和前沿的解决方案服务科学研究，致力于促进人类科学研究与医药发展的进步，是您身边的生物活性分子大师！高纯度小分子HighPuritySmallMolecules特异性抑制剂&激动剂：覆盖1,000+靶点，涉及20+信号通路，适用于众多疾病的研究PROTAC&ADC：特色蛋白靶向降解剂，助力打破“不可成药”高荧光量子染料/探针：适用于细胞标记、多种检测分析及体内成像同位素标记物：用于代谢示踪、生物标志物的定量分析，定制服务助力您改善药物特性

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