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1牛副流感病毒3型检测技术规范GB/T6682分析实验室用水规格和NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范3.1属于副黏病毒科，呼吸道病毒属成员，为有囊膜的4.1流行病学4.2临床症状22℃~8℃条件下保存并尽快送往实验室。将鼻拭子样品液冻融两次，然后以6000r/min离心10min，再使用一次性注射器吸取上清经0.22细胞大量脱落、贴壁细胞变长聚集形成网状（见附录A.2），当70%～80%细胞出现病变时收获培养物，经反复冻融，以3000r/min离心10min，取上清进行5.2RT-PCR3引物BPIV3-F/BPIV3-R按照附录A.3进行引物序列合成并用无菌的DEPC处理水配制成10μmol/L。4牛副流感病毒3型重组N蛋白、阴性血清、阳性血清、辣根过氧化物酶标记的兔抗牛IgG、酶标板、5病牛的分泌物、排泄物、以及被患病牛污染的饲料垫料等均可能是传染源。牛感染BPIV3后会引起呼吸PCR引物序列见表A.1.上下游引物用无菌的DEPC处理水配制成10µCTCAAGGCATTAATGGAATTGTATTTGTCAAAAGGGCCACGTGCACCTTTCATATGCATTTTGAGGGATCCTGTACACGGTTGCACCGGGAAATTACCCTGCTCTCTGGAGTTATGCTATGGGTGTAGCAGTTGTACAGAACAAGGCCATGCAACAGTATGTGACGATCTTATCTAGACATTGAAATGTTCCAACTTGGTCAGGCAGTAGCACGGGATGCTGAATCACAGATGAGCTCAATACTAGAGACTAGGGATAACACAGGAAGCCAAACAGAGCTTGAAGAATCACATGAAAAGGATCAGTAGTTCAGATACAGCCTTCCAAAAACCAACAGGAGGAGCAGCCATAGAGATGGCAATAGATGAAGAAGTAGAGCAGCTTGATTCCAAAGGGGATCAAGACCAAAGCAACGGAAATCTCCATGATCCCCTATGCATGGGCAGATGAAACCAACAATAGCAATCAAACTGAACCAACAAC6B.1抗原包被缓冲液（0.05mol/L

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