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文档简介
遗传学实验操作考核及评分标准
实验一:根尖有丝分裂制片和观察
一
步分
考核目标及评分细则值
骤
一实验目的5
二实验原理^5~
实验材料
洋葱或大蒜根尖
用具:眼科镶子,刀片,广口瓶,解剖针,盖玻片,大培养皿,小培养皿,立式染缸,10
染色板,酒精灯,量筒IOO毫升、10毫升。
所需药品及配制:无水乙醇,二甲苯,醋酸洋红。___________________________________
实验内容和步骤
1.材料准备:将洋葱去皮后,放在盛满水的烧杯中25。C左右培养,每天换水一次,待长
出根尖3-5厘米后,在上午10:50和下午5:20,细胞处于分裂高峰期,用刀片取下,放
在广口瓶中,进行预处理。
2.预处理:用0.05-0.2%秋水仙素处理根尖,2-4h°
3.固定:用CarnOy固定液(卡诺固定液,冰醋酸:95%酒精=1:3)固定2-24h,再放在
95%,85%,75%酒精中各0.5h,最后在70%的酒精中保存2个月。一般是新固定的材料为
好。保存在乙醇里的材料,在观察前最好用Carnoy固定液再固定1-2ho
4.水解:将固定材料加一滴离析液(95%乙醇:浓盐酸=1:1)离析IOmin,然后用水反
复冲洗,材料为白色,用针易压碎。(10)
四5.染色:在载片上滴一滴醋酸洋红染色15min左右,待根尖为暗红色时,将染色后的50
根尖放在一清洁的载片上,去除根冠和伸长区,再加少量染液染色。(10)
6.分色:在染好的根尖上加一滴45%的醋酸分色,使细胞质变浅,染色体清晰。(10)
7.压片:以双层吸水纸覆在盖片上,左手按住按住盖片,右手拇指用力压片;或用一个
双面刀片插到载片和盖片之间的一角,然后用解剖针柄轻敲盖片,然后将刀片撤出,再用
针柄种敲盖片,细胞很容易散开(注:用力适当、均匀,防止盖片破坏、滑动)。然后在酒
精灯上过3-4次。加盖片附以吸水纸压片。(10)
8镜.检和烤片:先用低倍镜显微镜下检查有丝分裂四个时期典型特征的细胞,再转到高
倍镜进行观察。(10)
若染色过深,片子不请,可以烤片。方法是让片子在火焰上过几次,以盖片上的水气刚
消失为止,不可沸腾。烤片时应将片子不断在手背上试温,以不烫手为宜,反复镜检。
实验结果
五20
1.通过实验观察绘制植物有丝分裂各个时期的分裂图象。
实验后整理:
六仪器、试剂放回原处、关电、加盖;垃圾入桶;值日生打扫卫生。10
实验2植物细胞减数分裂
一
步分
考核目标及评分细则值
骤
一实验目的5
二实验原理τ~
实验材料
蚕豆(Vicia.faba,2n=12)花药、玉米(Zeamays,2n=20)花药、小麦(Triticumspp.2n=42)
花药、大葱(AlIiUnlfistulosum2n=16)花药、番茄(LyCOPerSiCUnlescuSentum2n=24)花
三药。10
器具显微镜、镶子、解剖针、载玻片、盖玻片、大培养皿、酒精灯、吸水纸。
药品无水乙醇、醋酸洋红染液、石蜡、二甲苯、固定液(甲醇:冰醋酸:3:1)、加拿
大树胶、正丁醇或叔丁醇。_____________________________________________________________
实验内容和步骤
1.取材在一朵花的减数分裂的全过程中能观察染色体的时间是很短的,一般在终变期,
中期I,后期I。因此,选取刚现蕾的花序是观察花粉母细胞减数分裂的关键步骤,要注意
花蕾的形态和大小,适时选材。
(1)玉米北方的玉米5月份取材,时间以上午8:30为好,夏玉米一般在7月份取材,以
上午7:00—8:00为好,在玉米雌穗未抽出前的7—10天手摸植株上部(喇叭口下部)有松软
感觉,表明雄花序即将抽出。用刀在顶叶近喇叭口处纵向划一刀,切口长10—15cm,剥
出雄花序,顶端花药长3—5mm,花药尚未变黄时取材。
(2)蚕豆:从现蕾开始,上午10:00—11:00可选取2—3mm大小的花莆或一小段花序。蚕
豆开花的次序是由下而上,由外而内。
(3)小麦:在植株开始挑旗,旗叶与下一叶片的叶耳间距约为3—4Cm,花药长度大致在
1.5—2.0mm,黄绿色时取材最好。如花药为绿色时取材则为时过早,花药为黄色,则已过时。
上午7:00-8:00为取材最佳时间。
四(4)大葱:在北方地里越冬的大葱,第二年春季3—4月长出花序,待花序长出,颜色呈绿50
色,花蕾长度在3~4mm,花药长度为1—1.Imm时取材。上午9:00—10:00最佳。
(5)番茄:5—9月均可取材,时间以上午8:30—9:30为好,花蕾以3—4mm为宜(番茄花
期持续时间长,可随时取材)。(10)
2.固定通常制作幼小花药压片时,可不经固定,直接放在醋酸洋红染液中,同时进行固
定和染色,但是先经固定的材料容易着色、分色及便于保存。固定时将采集的材料置于卡
诺氏固定液12—24小时,若不及时制片,可将固定后的材料用7096的乙醇冲洗直至闻不到
醋酸味为止,后放入70%乙醇中存于4℃冰箱内,可随时取用。(10)
3.染色制片用蒸谯水将从固定液或从70%酒精保存液中取出的花蕾冲洗数遍,然后剥
开花雷,放在载玻片上,用解剖针及虹膜刀将花药横切成3—4段(或纵切),加一滴醋酸洋
红染液于材料上,用解剖针轻压花药使花粉母细胞从切口出来,静止染色5—10分钟,除
去花药壁。加上盖玻片使染液刚好布满载玻片与盖玻片之间成一薄层(不可过多,过多花粉
母细胞会逸出盖玻片边缘),加上盖玻片后,在酒精灯上轻微加热,以利于进一步着色和染
色体的分散。在盖玻片上覆以吸水纸用拇指适当加压.把周围的染液吸干(勿使盖片移动),
若细胞质染色过深,可在盖玻片的一边滴加45%的醋酸,在另一边用吸水纸吸,让醋酸从
盖玻片下流过,减轻细胞质的着色程度。(10)
4.镜检在显微镜下查找花粉母细胞,二分体、四分体,花粉粒以及各个时期的细胞。
5.永久片的制作较好的临时压片,可制成永久玻片标本。(20)
(1)将己制好的玻片浸入副盛有95%乙醇和45G醋酸各半的培养皿中,有盖玻片的一面
朝下,载玻片的一端架在玻片棒上使其倾斜,盖玻片脱落后立即把盖玻片和载玻片转入盛
有95%乙醇的培养皿中3—5分钟,转入盛有95%乙醇和叔丁醇各半的培养皿中3—5分钟,
最后纯叔丁醇中3—5分钟进行脱水、透明,脱水后用溶于叔丁醇的加拿大树胶封片。
(2)由于正丁醇价格较便宜,因此也可用正丁醇代替叔丁醇。操作过程是将制好的临时玻
片以同样的方法浸入盛有95%乙醇和45X醋酸各半的培养皿中5-6分钟,并滴加几滴正
丁醇,依次再移入95%乙醇中1一2分钟;95%乙醇和正丁醇各半的培养皿中2—5分钟;
纯正丁醇1一2分钟,最后吸去多余的正丁醇,用溶于正丁醇的加拿大树胶封片。
实验结果
五20
绘制观察到的植物细胞减数分裂不同时期的典型细胞(示染色体动态特征)。
实验后整理:
六仪器、试剂放回原处、关电、加盖;垃圾入桶;值日生打扫卫生。10
实验3人类染色体组型分析
一
分
考核目标及评分细则值
一实验目的5
二实验原理T-
实验材料
三10
男性细胞染色体照片,眼科剪刀,测量工具,胶水等。
实验内容和步骤
L剪贴:用眼科剪刀,沿染色体边缘将每一条染色体剪下来,存放在小培养皿内。(5)
2.配对:首先目测配对,根据染色体长短和形态特征,进行同源染色体配对。(10)
3.排列:按一定顺序将一个细胞内的染色体进行排队、编号。排列方式有多种,一般从
大到小排列,如玉米、草棉核型;相同长度的染色体,按短臂长度排列,短臂长的在前;
有特殊标记的染色体(如随体)可特殊排列,如栽培大麦核型;性染色体单独另排或放在
最后。也可将形态相同的染色体归为一组,分成若干组,按组排列,如山羊草属植物染色
体核型;异源多倍体要根据不同染色体组排列,如普通小麦核型要按A、B、D三个染色体
组排列。(10)
4.测量:利用测量工具,测量染色体的如下数据:(10)
(1)绝对长度=照片长度/放大倍数
(2)每对染色体短臂绝对长度;
(3)每对染色体长臂绝对长度;
(4)染色体短臂总长度;
(5)染色体长臂总长度;
(6)相对长度;
四50
a、每对同源染色体短臂相对长度=染色体短臂绝对长度/染色体短臂总长度
b、每对同源染色体长臂相对长度=染色体长臂绝对长度/染色体长臂总长度
c、每对同源染色体相对长度=每对同源染色体绝对长度/染色体总长度
(7)臂比:臂比=染色体长臂/染色体短臂
(8)臂指数:着丝点指数=短臂长/染色体全长
将上列数字填入下表________________________________________________________
序号相对长度(%)长臂+短臂=全长_________臂比(长/短)类型__________
5.校正:根据测量数据校正目测同源染色体配对和染色体排列顺序是否正确,再进行重
新排列。(5)
6.分类:依据臂比,将染色体分类。(5)
染色体分类标准
染色体类型臂比(长臂/短臂)
(1).正中部着丝点类型(M)1.0
(2).中部着丝点类型(m)1.01-1.7
(3).近中部着丝点类型(Sm)1.71-3.0
(4).近端着丝点类型(St)3.01-7.0
(5).端着丝点类型(t)7.01-
(6).顶端着丝点类型(T)
7.公式:根据染色体类型,可以将一种生物的染色体核型书写成一定公式。如:芍药核
型为:K(2n)=2X=10=6m+2Sm+2St(SAT)0(5)
K代表基本核型,SAT代表具随体染色体,写在括号内,符号前的数字代表该类染色体
数目。
实验结果
五20
做出核型,写出核型公式;绘制模式图
实验后整理:
六仪器、试剂放回原处、关电、加盖;垃圾入桶;值日生打扫卫生。10
实验4人类X染色质(巴氏小体)的制备与观察
一
ɪ分
考核目标及评分细则值
骤
实验目的5
二实验原理^5~
实验材料
I、生物材料:人体口腔颊部上皮细胞,人体发根毛囊细胞。
三10
2、器材:显微镜,解剖针,牙签,眼科镶,载玻片,盖玻片,滤纸条。
3、试剂:1%硫瑾水溶液,Imol/LHCl,蒸储水,45%醋酸。___________________________
实验内容和步骤
£观察人口腔颊部上皮细胞巴氏小体…(30)
i.取材用灭菌的牙签轻刮口腔颊部上皮,涂片,晾干。
ii.加ImOI/L的盐酸水解IO-15分钟。轻轻水洗,晾干。
ii.硫瑾染色10-20分钟,洗净,晾干。
iv.显微镜观察。巴氏小体应靠近核膜边缘,染色较深。
5、观察发根毛囊细胞巴氏小体…(20)
i.拔取带毛囊头发一段,45强冰醋酸解离5分钟。
ii.剥取毛囊,硫瑾染色10分钟,洗净。
ii.压片(压片前可先用解剖针敲片,使细胞分散),镜检。毛囊细胞密度比口腔上皮细
胞标本较低,但较为集中。
二、实验结果
1、结果图不
•艺・•
四%50
AO•■
■*√
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图1人体人口腔上皮颊部上皮细胞(女性细胞,圆圈中示巴氏小体,10X40)
实验结果
五细胞核计数_____个,共发现含X染色质细胞核—一个?X染色质出现频率为—20
较标准数值偏?分析偏差的原因。
实验后整理:
六仪器、试剂放回原处、关电、加盖;垃圾入桶;值日生打扫卫生。10
实验5果蝇的形态和生活史
一
步分
考核目标及评分细则值
骤
实验目的5
二实验原理~5~
实验材料
野生型果蝇(雌、雄)及常见的几种突变型果蝇;雌雄果蝇装片;果蝇卵、蛹装片。
三1.器具:显微镜、双筒解剖镜、放大镜、小镣子、麻醉瓶、麻醉皿、培养瓶、白磁病10
(15CmXI5cm)、毛笔、酒精、石棉网、黑纸、胶水、牛皮纸。
2.药品:乙醛、乙醇、琼脂、玉米粉、白糖、酵母、丙酸、香蕉等。_________
实验内容和步骤
1.果蝇生活史的观察果蝇为完全变态,生活史包括卵、幼虫、蛹、成虫四个时期,
各时期持续时间的长短随温度的高低而不同,在20℃条件下从卵到成虫约为8天,蛹期为
6天左右,整个生活史15天即可完成,若25C条件下,从卵到幼虫约5天,蛹期4.2天左
右,整个生活史约10天。20—25C是果蝇生。活的适宜温度,温度过高(30℃以上),会引
起果蝇不孕或死亡,温度过低(10℃条件下),生活史可长达57天,又会使果蝇生活力降低
果蝇一般培养在恒温箱内.盛夏时要注意降温。雌性成体一般能生活4周,雄性成体寿命
较短,一对亲蝇能产生几百个后代。…(20)
(1)卵:羽化后的雌蝇一般在12小时后开始交配,交配后两天开始产卵,当卵经过子
宫时,精子可由卵前端的锥形突出部的小孔或卵孔进入其中,虽然有很多精子进入卵.但
一般情况下只有一个精子与卵发生受精作用。其它多余的精子被雌体贮藏起来(所以杂交实
验时必须选取处女蝇,受精卵被排出体外发育或胚胎早期就在子宫内进行。
用解剖针将附有卵的培养基取少许涂于载玻片上,或用解剖针轻压雌果蝇腹部后部把
卵挤在载玻片上,用低倍镜观察。果蝇的卵约0∙5mm长,椭圆形,腹面稍扁平,在背面的
四前端伸出一对触丝,它的作用是使卵附在培养基表面而利于发育。60
(2)幼虫:卵孵化成幼虫后要经过两次蜕皮才能从一龄幼虫发育成为三龄幼虫。三龄幼
虫体长约5mm,头部稍尖,位于头部的口器为肉眼可见一小黑点,口器后面有一对透明的唾
液腺,通过体壁可见到一对生殖腺位于身体后半部的上方两侧,精巢较大,为一明显的黑
色斑点,卵巢较小。
(3)蛹:幼虫生活7—8天准备化蛹,化蛹之前从培养基中爬出,附着在干燥的瓶壁或
插在培养基的滤纸上逐渐形成一个梭形的蛹,在蛹前部有两个呼吸孔,后部有尾芽,起初
蛹壳颜色淡黄柔软,经3—4天后变成深褐色,以示要羽化了。
(4)成虫:幼虫在蛹壳内完成成虫体型和器官的分化,最后从蛹壳前端爬出。刚从蛹壳
里羽化出的果蝇,虫体较长大,翅还没有展开,体表也未完全几丁质化,呈半透明乳白色,
不久蝇体变为粗短椭圆形,双翅伸展,体色加深,如野生型果蝇由开始的浅灰色转为灰褐
色。果蝇成虫分头、胸、腹兰部分。头部有一对大的复眼、三个单眼和一对触角;胸部有
三对足、一对翅和一对平衡棒;腹部背面有黑色环纹,腹面有腹片,外生殖器在腹部末端,
全身有许多体毛和刚毛。
2.果蝇雌雄性鉴别利用果蝇做杂交实验时,必须准确地识别性别,雌雄成蝇的区别
有计多方面,可用放大镜,显微镜(低倍)、双筒解剖镜或直接从外形上加以辨认。…(20)
二餐幼虫
图5.1果蝇生活史
图5.2果蝇的性梳
表5.1雌雄果蝇的主要区别_______________________________________________________
雌蝇雄蝇
体型较大体型较小
腹部末端稍尖腹部末端稍圆
腹部背面有五条黑色环纹腹部背面有三条黑色环纹
无性梳有性梳
腹部腹面有6个腹片腹部腹面有4个腹片
外生殖器外观简单外生殖器外观复杂,在低倍镜下可看到生殖孤、肛上
板、阴基。
3.果蝇几种突变类型的观察果蝇的突变性状一般情况下用肉眼观察或用放大镜在
培养瓶外观察或在解剖镜下观察。主要有以下稳定而明显的特征:
表5.2果蝇常见突变性状特征________________________________________________
突变性状名称基因符性状特征_________________所在染色体
白眼W复眼白色X____________
棒眼B_________复眼横条形X____________
檀黑体E_________体呈乌木色,黑亮IIIR
黑体B_________体呈深色一IIL
黄身一Y_________体吴浅橙黄色X____________
残翅Vg________翅退休,部分残留不能飞IIR
焦刚毛Sn刚毛卷曲如烧羸「X____________
小翅m翅较短一X____________
4.果蝇的麻醉对于成蝇和果蝇突变性状的观察以及果蝇的杂交实验分析,都必须
先将果蝇麻醉使其处于静止状态后方可进行。在一软木塞上钉一图钉,在图钉上缠上脱脂
棉,将此软木塞盖在一20Oml的广口瓶上,即做成了麻醉瓶。再用一培养皿,在皿的底部
粘上一条滤纸即做成麻醉用的麻醉皿。麻醉时,首先将培养瓶倒置,让果蝇向瓶底部运动,
然后打开麻醉瓶和培养瓶塞,迅速将培养瓶和麻醉瓶口相接(麻醉瓶在下,培养瓶在上),
左手紧握两。瓶接口稍倾斜,然后轻拍培养瓶瓶壁使果蝇落入麻醉瓶内,迅速盖好两个瓶
塞,或者在培养瓶与麻醉瓶对口相接后翻转位置,使培养瓶在下,麻醉瓶在上,用黑纸遮
住培养瓶,果蝇因趋光向麻醉瓶运动,达到一定数量后分别盖好两个瓶塞。把乙酸滴在麻
醉瓶软木塞上的脱脂棉上,盖上塞子,倒置麻醉瓶。一分钟后果蝇即处于昏迷状态,将其
倾倒在用酒精擦过的白磁砖上,用毛笔轻轻拨动进行观察。当在白磁砖上的果蝇即将苏醒
时,可在麻醉皿的滤纸上滴加乙醛,扣在白磁砖上进行第二次麻醉,麻醉的程度随实验需要
而定。麻醉后果蝇翅外展与身体呈45C角时,表示已麻醉过度,不能复苏。把不需要的果
蝇倒入盛有酒精的瓶中。…(20)
ɪ实验结果:绘果蝇的生活史图。10
实验后整理:
六10
仪器、试剂放回原处、关电、加盖;垃圾入桶;值日生打扫卫生。________________________
实验6果蝇唾腺染色体标本的制备与观察
步
分
骤
考核目标及评分细则值
一实验目的5
二实验原理ɪ
实验材料
三10
果蝇三龄幼虫;0∙8%生理盐水;0.2mol∕LHC1;蒸储水;苯酚品红__________________________
实验内容和步骤
1、三龄幼虫的饲养:剥取唾液腺在载玻片上滴一滴生理盐水,取三龄幼虫放在其中。左手
用解剖针或小镣子压住幼虫后端1/3处,右手的解剖针按住头部黑色口器向外拉,将头部从身
体拉开,唾腺随之而出,丢弃杂质。…(20分)
2、解离和染色:取解剖好的唾腺于载片上,加1-2滴蒸储水,使之成为低渗溶液,处理8T0
分钟,再经ImOI/LHCl解离l-2min后,只需要用解剖针轻轻拨动,脂肪等杂质便会和唾液腺
自动分离。轻轻吸去酸液,用碱性品红染色10分钟(或醋酸洋红染色15分钟或龙胆紫染色1
分钟)左右。…(20分)
3、抹片及观察:…(20分)
幼虫培养的注意事项:培养基要较稀且富含营养;追加酵母;幼虫密度要小;低温培养
位置:在幼虫体前约1/3处。
形状:形如一对香蕉,上小下大。一边常附着带状的不透明的脂肪。
颜色:半透明如玻璃,略带白色,比周围的组织都透明。
注意事项:一定要加生理盐水,否则唾腺易干;水不可过多,否则幼虫易漂起来并且活跃,
影响剥离;剥离时要去干净脂肪;染色时间不可过长,否则背景着色;压片前先轻敲,使之分
散,压片时朝一个方向揉片。
实验结果
五1、绘制你所观察到的果蝇唾腺染色体。10
2、剥离果蝇唾液腺时应该注意的问题?
二实验后整理:
六仪器、试剂放回原处、关电、加盖;垃圾入桶;值日生打扫卫生。10
实验7果蝇单因子杂交实验
一
ɪ分
考核目标及评分细则值
骤
实验目的5
二实验原理^5~
实验材料
三10
新鲜大蒜叶
实验内容和步骤
1、采集新鲜的山茶花叶,置于-70C冰箱冷冻几个小时。
2、吸水纸吸干叶子表面的水分,去主脉,撕成小片,加少量液氮,在研钵中研磨成粉末。
3、将研磨好的材料转入1.5ml离心管中,加入65℃预热的2%CTΛB1000U1和B-疏基乙醇
20Ul,轻轻颠倒混匀,65℃水浴30min,期间摇匀2-3次。
4、室温下静置IOmin,1000Or温离心5min。
5,取上清液于另一1.5ml离心管中,加入等体积的氯仿/异戊醇(24:1),轻轻颠倒混匀,
四50
12000r∕m离心IOmin0重复此步操作1次。
6、取上清液于另一1.5ml离心管中,加入上清液体积2/3的-20℃预冷异丙醇,轻轻混匀,
直至出现絮状物。-20°C静置IOmin后,10000r∕m离心5min°
7、弃去上清液,加入500UI的75%乙醇,清洗DNA,小心弃去上清液。再加入500UI的
75%乙醇,重复操作1次。
8、再加入500IH无水乙醇,清洗DNA,弃去上清液,倒置干燥DNA。
9、加入50UITE液和2ulRNase,37C水浴30min04℃保存备用
实验结果
五观察电泳的结果,分析DNA提取的纯度的完整性。25
电泳图照相。
实验后整理:
/、.
仪器、试剂放回原处、关电、加盖;垃圾入桶;值日生打扫卫生。5
实验8植物多倍体的诱发与鉴定
步分
考核目标及评分细则
骤值
实验目的5
实验原理丁
实验材料
1、材料:洋葱(AlliUmcepa2n=16)>小麦(2n=42)>大麦(HordeUmspp.2n=14)、大蒜
(Alliumsativum2n=16)、西瓜(CitnJlIUSvulgaris2n=22)、玉米(Zeamays2n=20)>
蚕豆(ViCiafaba2n=12)等的种子、鳞茎。
2、器具显微镜、剪刀、镜子,小培养皿,培养皿、载玻片、盖玻片、吸水纸、培养箱、
镶子、小指管,纱布、脱脂棉、酒精灯、测微尺。
3,药品秋水仙索(0.1%和0.025%)、HCl(1mol/Ds硝酸银(0.1%—0.2%)、碘化
钾(1%)、固定液、醋酸洋红或卡宝品红染色液。
实验内容和步骤
1.洋葱根尖和蚕豆根尖的制备:
把洋葱的鳞茎洗净,用刀片将鳞茎上的老根剪去,置于盛满水的广口瓶上,待新长出的
不定根长约L5~2mm左右时,移到盛有0∙25、0.4%秋水仙素溶液中,培养几日后,在处理
液中培养的根尖明显比对照根尖肥大,此时便可用解剖剪将根尖取下,用甲醛:冰醋酸(3:
1)固定液固定24h。
图8T洋葱根尖的制备图8-2制备好的根尖
植物根尖的制备:选取蚕豆种子放在烧杯中,清水浸泡过夜,使种子吸水胀大后倒出,
再用清水洗几次,用多层纱布包好种子,放进20~25C培养箱内培养。待蚕豆的主根长到
3cm左右,侧根长到l~1.5cm时,将蚕豆取出。用清水洗净,放在0.25~0.蝴秋水仙素溶
液中,于25C处理约3~4天,可见根尖膨大,将根尖剪下固定。…(20分)
2解.离:弃去固定液,用清水漂洗2-3次。用1摩尔盐酸在60C分别处理8min和IOmin。
弃去盐酸,漂洗根尖2-3次,彻底洗净盐酸。…(10分)
3.染色压片:解剖针压散根尖组织,用卡宝品红染色20min后盖上盖玻片,用橡皮擦
在盖玻片上轻轻压一下,使细胞均匀散开成一单细胞薄层,用吸水纸吸去溢出的染液,即
可放在显微镜下观察,也可加热加速染色。…(10分)
4.镜检,观察并鉴别4n细胞:蚕豆染色体2n=12;洋葱染色体2n=16,照相。…(10
分)
实验结果
五20
绘制所观察的4n细胞。
实验后整理:
六仪器、试剂放回原处、关电、加盖;垃圾入桶;值日生打扫卫生。10
实验9人类常见几种生理特征的遗传调查
一
步分
考核目标及评分细则值
骤
一实验目的5
二实验原理τ~
实验材料
器材:试管、试管架、滴管;显微镜、双凹玻片或普通载玻片、采血针、青霉素小瓶、
胶布、记号笔、牙签或小玻棒、棉球、小镜子
试剂:PTC溶液的配制:取PTC粉末O.65g,加蒸储水50OmI摇匀,在室温下放置1~2
天即完全溶解成原液。原液的PTC浓度约为l∕750PTC尝味使用液配制:将PTC原液编
三o5
为1号液,将1号液用蒸偏水稀释1倍编为2号液,将2号液再稀释一倍为3号液以此类
推,直至配成14号PTC溶液,14号液浓度为1/6000000,将配好的14种不同浓度PTC
溶液分别置于消毒好的瓶内。
0.1%的苯甲酸钠
A型(抗B)和B型(抗A)标准血清、70册酉精、0.9%生理盐水。____________________
实验内容和步骤
(一)几种生理特征的遗传…(20分)
1、卷舌性状的调查
在人群中,有的人能卷舌(tonguerolling),即舌的两侧能在口腔中向上卷成筒状,
称为卷舌者(tongueroller),对照镜子或者请同学观察自己是否有卷舌能力。
有的人舌尖部分不用上颌牙齿的帮助能向后翻转,即为翻舌。这种性状在人群中出现频
率不高,根据国外的统计只有1/1000弱。舌的活动在人群中可见3种类型:①舌能卷而不
能翻。②舌能卷又能翻。③舌不能卷又不能翻。舌不能卷而能翻则从未见过。
2.眼脸性状的调查
人群中的眼睑(eyelid)可分为单重睑(俗称单眼皮,又叫上睑赘皮)和双重睑(俗称
双眼皮)两种性状。一些人认为双眼皮受常染色体显性基因控制,
单眼皮为隐性性状。但目前仍存在争议,有待进一步研究。
3.耳垂性状的调查
耳朵可明显区分为有耳垂(freeearlobe,即耳垂下悬,与头连接处向上凹陷)和无
四耳垂(attachedearlobe,即耳轮一直向下延续到头部,),观察并区分两种性状。50
4.前额发际调查
有的人前额发际(hairlineoftheforehead)基本属于平线,而有的人前额正中发
际向下延伸呈峰形,即明显向前突出,形成“V”字形,称美人尖。
5.发式和发旋的调查
人类的发式有卷发和直发之分。东方人多为直发。
每个人头顶稍后方的中线处有一螺纹,称发旋。发旋的螺纹方向受遗传控制,有的人呈
顺时针方向,有的呈逆时针方向。记录自己的发式、发旋个数和螺旋方向。
6.拇指关节外展的调查
人群中有的人拇指的最后一节能弯向挠侧,这一性状的纯合隐性个体的拇指关节可向后
卷曲60度,不能弯曲为显性。观察自己是否有此性状。
7.食指与无名指长短比较
食指与无名指之间的长短关系表现为伴性遗传,控制基因位于X染色体上。
表型有两种:食指短于无名指,食指长于无名指。检查的方法是在白纸上画一横线,手
掌向下放于纸上,使中指指尖方向与横线垂直,无名指指尖与横线相齐,看此时食指指尖
是在横线的上方还是下方。
(二)几种生理特征的遗传…(20分)
1、苯硫胭尝味试验
苯硫麻(phenylthiocarbamide,PTC)是一种白色结晶状药物,由于其含有N-C=S基
团而有苦涩味,但对人无毒副作用。不同种族、民族和个体之间,对该物质的尝味能力不
同,人体对苯硫胭的尝味能力是由一对等位基因(Tt)所控制的性状,T对t为不完全显
性。正常尝味者能尝出浓度小于1/750000PTC溶液的苦味,为纯合尝味者,基因型为TT;
而Tt基因型的个体(杂合子)尝味能力稍低,只能尝出浓度为1/40000-l∕500OOO的
PTC溶液的苦涩味,这种个体为PTC杂合尝味者。当PTC浓度大于1/24000才能尝出其苦
味的人,称为PTC味盲,基因型为tt;有的味盲个体甚至对PTe结晶也尝不出苦味来。因
此,人类对PTe尝味能力属于不完全显性遗传(半显性遗传)。而且已知纯合体味盲(tt)
者容易患结节性甲状腺肿,因此可以把PTC的尝味能力,作为一种辅助性诊断指标。我国
汉族人群中,PTC味盲约占10%。
操作程序
φ.让受试者坐在椅子上,仰头张嘴。首先用滴管滴5~10滴14号液于舌根部,让受
试者徐徐下咽品味,并用蒸储水作对照试验。
②.询问受试者能否鉴别此两种溶液的味道,若不能鉴别或不能断定,则依次用13号、
12号……溶液重复试验(应注意与蒸储水交替测试),直到明确鉴别出PTC的苦味为止。
③.tt基因型的阈值范围为1~6号液,Tt基因型的阈值范围为7~10号液,TT基因型
的阈值范围为11~14号液。为简化操作程序,也可只用6、7、10、11和13号5种溶液进
行测试,尝不出6号苦味者为tt基因型,尝出7号和10号液的苦味者为Tt基因型,尝出
11号者为TT基因型。
④.统计所测人员的测试结果,按HardyTeinberg定律计算出所测人群中的PTC尝味
基因的基因型频率和基因频率。
(3)注意事项
PTC尝味试验所用滴管在滴液体时,注意不要接触受试者的口腔。
2、对苯甲酸钠的味觉感受能力
苯甲酸钠是另一种人群味觉感受不同的物质。有人感觉有味,有人感觉其无味。以0∙l%
的苯甲酸钠,用PTC检测的同样方法的测知全班同学的味觉感受结果(酸、甜、苦、咸、无
味)。
(三)、人类ABo血型检测方法…(10分)
血型是人体的遗传性状,人类ABo血型是红细胞血型系统中的一种。它受一组复等位基
因(IA、IB、i)控制。人类的红细胞表面有A和B两种抗原,血清中有抗B(B)和抗A
(α)两种天然抗体,依抗原和抗体存在的情况,可将人类的血型分为A、B、AB和0四种
血型。
由于A抗原只能和抗A结合,B抗原只能和抗B结合,因此可以利用已知的A型标准血
清(即A型人的血清,又叫抗B血清)和B型标准血清(即B型人的血清,又叫抗A血清)
来鉴定未知血型,两种标准血清内所含每一种抗体将凝集含有相应抗原的红细胞。因此一
种血液其红细胞在A型标准血清中发生凝集者为B型,在B型标准血清中凝集者为A型,
在两种标准血清中都凝集者为AB型,在两种标准血清中都不凝集者为0
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