DB15-T 3358-2024 绵羊腹腔镜活体采卵技术规程

65.020.30CCS

B

4415 DB15/T

3358—2024绵羊腹腔镜活体采卵技术规程Technical

code

on

ovum

pick-up

2024-02-23

发布2024-03-23

实施内蒙古自治区市场监督管理局 发

布DB15/T

3358—2024 本文件按照GB/T

1.1—2020《标准化工作导则

第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会（SAM/TC

19）归口。本文件起草单位：内蒙古赛诺种羊科技有限公司、内蒙古农业大学。怡静。DB15/T

3358—20241范围本文件规定了绵羊腹腔镜采卵中术语和定义、供体绵羊选择、抽卵液配制及采卵操作等内容。本文件适用于绵羊腹腔镜活体采卵。2规范性引用文件文件。NY/T

1571 羊胚胎移植技术规程3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。活体采卵ovum

pick-up借助腹腔镜及其他装置在绵羊活体状态下采集卵母细胞的一系列过程。供体 donor提供卵母细胞的绵羊个体。4 供体绵羊的选择及预处理供体绵羊的选择选择优良品种，谱系清楚的一级以上母羊，发育正常，以

1.5～6

周岁为宜；产后空怀

d

以上，至少有两次以上正常发情周期，繁殖机能正常；无遗传疾病、生殖系统疾病和传染性疫病。供体羊预处理供体埋置孕酮海绵栓13

d，撤除海绵栓前3

d24

h分别注射重组

3

mL诱导卵泡发育,撤除海绵栓前1

d进行采卵。5采卵操作DB15/T

3358—采卵前准备5.1.1 供体羊空腹供体羊空腹，冬季控水控料36

h、夏季控水24

h36

h、羔羊手术前12

h空腹。5.1.2 手术室术前一天清扫手术室并用紫外线消毒

60

min；术前

30

5.1.3 器械与消毒5.1.3.1 器械准备两把长臂钳、三个套管、三个穿刺针、腹腔镜镜头和负压机。5.1.3.2 器械消毒提前

用

75%酒精喷洒长臂钳、套管、穿刺针和腹腔镜镜头，5

后放入器械杯；术前用新洁尔灭水将创布浸泡

min

并甩干水分。穿刺操作5.2.1 麻醉与保定按照

NY/T

1571

的相关规定进行术前麻醉。穿刺手术前将动物固定在保定架上，将腹侧手术区域剃毛。保定架呈一定倾斜度，头部处于低位，用

洗必泰和

碘液进行消毒，用干净的创布遮盖在手术部位靠下方的位置，且用创巾钳固定。5.2.2 腹部穿孔选择三个穿刺位置，第一个腹腔镜套管穿刺针在母羊左侧乳房基部下方

2

～5

处的位置刺入最佳(靠近腹中线）；第二个穿刺孔位于腹中线两侧，离乳房

cm～15

cm；第三个穿刺孔位于右侧乳房基部

3

cm～6

处。穿孔时将腹部外皮向上提起，穿刺针抵住手术位置刺入，刺入时注意皮和腹膜的穿刺点位置不要错开，注意避开血管。5.2.3 设备放置将腹腔内窥镜放入第一孔，将长臂钳放入第三孔，观察穿刺套管是否进入腹腔内，如果腹部脂肪过厚，导致视野内未看见套管，可用长臂钳或穿刺针拨开脂肪使套管暴露在视野内。第二孔中也放入一支长臂钳用于辅助右侧的长臂钳将卵巢固定好。如卵巢固定好，第二孔长臂钳拔出，将采卵针放进套管，准备采卵。采卵5.3.1 准备工作5.3.1.1 采卵液配制采卵液配方见附录

A。5.3.1.2 准备采卵前将采卵针和吸管用采卵液冲洗一遍，试管内采卵液不少于

2

mL。DB15/T

3358—20245.3.2 卵泡穿刺观察卵巢后，用卵巢固定钳夹住卵巢的系带部分，在内窥镜的观察下使用采卵针依次抽吸

2

mm

以上的有腔卵泡，从下往上抽取，同时记录抽取卵泡的数量。抽取大卵泡或抽取的卵泡液多时，要轻轻的晃动采卵液，以防止采卵试管内的液体粘连；采卵试管内抽到血时要及时进行清洗；采卵完成后迅速将采卵试管送回实验室内进行检卵与体外培养。5.3.3 术后流程链霉素或皮下注射预防剂量的抗生素，注射

mL盐酸赛拉嗪。伤口喷洒碘酊。DB15/T

3358—2024

附 录 A（