补肾活血方调节氧化应激改善肾虚血瘀型卵巢储备功能下降的临床研究

④胃脘痞闷者加用紫苏梗10g。2.2方药分析熟地：味甘，微温。归肝、肾经。可滋阴补血，益精填髓。熟地黄为补血要药，常与当归、白芍同用，并随证配伍相应的药物。《本经逢原》：“熟地黄，假火力蒸晒，转苦为甘，为阴中之阳，故能补肾中元气。”现代研究，熟地黄所含的地黄多糖可抗脂质氧化，具有提高氧化酶的活性作用。当归：性温，味甘、辛。归肝经、心经、脾经。补血活血、调经止痛、润肠通便。属补虚药下属分类的补血药。现代研究，其成分可降低血小板聚集及抗血栓；抗氧化和清除自由基；对子宫具有兴奋及抑制的双向性作用；抗促性腺激素；可抑制离体动物的子宫而兴奋整体动物的子宫。酒萸肉：味酸、涩，微温。归肝、肾经。主要功效为补益肝肾，收敛固涩。《雷公炮炙论》：“壮元气，秘精。”山茱萸药性平和，微温不燥，阴虚阳虚皆可应用。虽为固涩之品，但敛正气不敛邪气，且能流通血脉。为了增强补肝肾的作用，临床上除敛汗生用外，均以制品为主。实验证实：炮制后的山茱萸能使肾阴虚模型小鼠的负重游泳时间、耐缺氧时间明显增加、血清超氧化歧化酶(SOD)活力增强、丙二醛(MDA)含量降低，说明山茱萸炮制后滋阴补肾作用增强。炒山药：味甘，性平。归脾经、肺经、肾经。其有“平补三焦气阴”之称，且有补涩兼备之特点。早在《神农本草经》中就记载：山药能“补中，益气力，长肌肉。久服耳目聪明，轻身不饥延年。”具有生津益肺，补脾养胃，补肾涩精的功能。麸炒山药以补脾健胃，益肾固精为主。国内外研究证实：山药能促进大脑分泌脱氢表雄酮。服用脱氢表雄酮，可使睡眠改善，心情愉快，充满活力，显得年轻，使人胃口好等，获得健身强体，延缓衰老的效果。山药还具有滋补细胞、强化内分泌、补益强壮、增强机体造血功能等作用。炒白术：性温，味甘、苦。归脾经、胃经。可健脾健胃益气，燥湿利水，止汗，安胎。炒白术能缓和燥性，借麸入中，增强健脾、消肿作用。现代药理学研究显示，白术对人体免疫功能、抗应激以及造血功能具有促进作用，同时还可抑制子宫收缩，抗氧化、延缓机体衰老过程。白术对脂质过氧化具有明显的抑制作用，降低组织组织脂质过氧化物含量，能有效预防组织细胞结构、功能破坏。紫河车：味甘、咸，性温。归心经、肺经、肾经。具有温肾补精、益气养血之效。紫河车，即胎盘，研究证明，胎盘中富含蛋白质、糖、钙、维生素、促性腺激素、促肾上腺皮质激素等十分重要的物质，可发挥对乳腺、子宫、阴道或者睾丸发育的促进作用。胎盘中可产生绒毛膜促性腺激素，对睾丸具有兴奋作用；此外，胎盘中还有雌激素及孕激素。有实验研究证明，哺乳期幼母兔注射胎盘提取物对其胸腺、脾脏、子宫、阴道、乳腺具有明显的促发育作用，对雄性兔的甲状腺、睾丸等具有促进作用。菟丝子性平，味辛、甘。归肝经、肾经、脾经。补肾益精，养肝明日。属补虚药下分类的补阳药。现代药理研究表示：菟丝子对下丘脑-垂体-性腺有兴奋作用；促进造血；增强免疫功能；防治心肌缺血；抑制肿瘤发生；抗肝损害等。丹参性微寒，味苦。归心经、肝经。可祛瘀止痛、活血痛经、清心除烦。属活血化瘀药下分类的活血调经药。现代药理研究，其制剂能使实验动物心冠状动脉扩张，使心功能获得明显改善。注射液有抗凝血作用。降血脂；抗动脉粥样硬化；活血化瘀；增强耐缺氧能力；增强免疫功能；抗炎及抗过敏；护肝；改善肾功能；抗氧化;抗菌；有性激素样作用。续断：味苦、辛，性微温。归肝、肾经。《滇南本草》：“补肝，强筋骨，定经络，止经中（筋骨）酸痛，安胎，治妇人白带，生新血，破瘀血，落死胎，止咳嗽咳血，治赤白便浊。”可补肝肾；强筋骨；调血脉；止崩漏。现代药理研究表示：其有效成分可抗氧化及抗衰老，动物实验表明，服用续断具有延缓衰老的作用。赤芍：性微寒，味苦。归肝经、脾经。为清热凉血药，具有清热凉血、散瘀止痛的作用。现代研究表示：赤芍可抗血栓；抗血小板聚集；降血脂、抗动脉硬化；小剂量轻度抑制心脏，大剂量明显抑制心脏，并有传导阻滞作用，使冠脉流量增加及减少外周阻力；治疗和预防心脏功能降低。抗肿瘤；具有保肝、清除氧自由基、解除肠痉挛、抑菌等作用。有排钠作用。提取物在体外对肾上腺素、ADP、烙铁头蛇毒和花生烯酸诱导的血小板聚集均有明显抑制作用。白芍：性凉，味苦酸，微寒，具有补血养血、平抑肝阳、柔肝止痛、敛阴止汗等功效。HPLC研究证实，芍药根在去皮以及水煮之后的苷类成分呈现下降趋势，同时芍药根中有害成分苯甲酸也会发生显著降低。白芍应用较广泛，临床运用可发挥解痉镇痛、镇静催眠、抗炎、抗心肌缺血以及增强细胞免疫和体液免疫、扩血管、降血压等作用。还可抑制中枢神经，对中枢有抑制作用，可解热降温。甘草：性平，味甘。归心经、胃经、脾经、肺经四经。甘草是中药药方之中最常用的使药之一，可谓是“十方九草”，因甘草作用广泛，可发挥益气补中、缓急止痛、润肺止咳、泻火解毒以及调和诸药的功效。而且对中药苦辛味具有良好的掩盖作用。药理研究表明：甘草有肾上腺皮质激素作用，抗炎、抗溃疡、抗过敏反应，抗癌，抗菌，抗病毒，促进胰液分泌，对离体肠有抑制，调节免疫功能，镇咳祛痰，抗突变，解毒，抗氧化，保护耳前庭功能、利尿，保肝、防止动脉硬化，抗脑缺血，预防糖尿病并发症等作用。3.研究结果分析3.1对临床症状的改善的分析与评价补肾活血方治疗组临床症状疗效96.67%，中医症状积分明显改善，治疗前、后对比具有显著差异（P<0.01）。补肾活血方益肾填精，活血调冲，可有效缓解DOR患者肾虚血瘀的临床症状。3.2对血生殖激素水平影响的分析DOR患者治疗后血清FSH、FSH/LH水平较前下降（P<0.05），E2水平较前提升(P<0.01)，其差异均有统计学意义。说明补肾活血方可有效作用于HPO轴，发挥类雌激素样作用，提高患者对垂体反应性，促进卵泡发育，改善卵巢储备功能。3.3对超声指标影响的分析DOR患者治疗后AFC数量明显增多，（P<0.01）；OVD亦明显增大，（P<0.01）。分析补肾活血方可能通过增加卵巢血供，促卵泡生长发育，提高卵巢储备功能。3.4对氧化应激水平调节的分析 空白对照组（健康女性）与治疗组（DOR）患者治疗前血清氧化应激水平对比有显著差异（P<0.01）。与空白对照组相比，治疗组患者的血清SOD、CAT水平明显下降，MDA水平升高明显，提示DOR患者机体处于氧化应激状态。DOR患者治疗前、后血清氧化应激水平对比有显著差异（P<0.01）。患者治疗后血清SOD、CAT水平较前上升，MDA水平亦较前下降。分析补肾活血方对机体抗氧化能力具备提升作用，从而达到改善卵巢颗粒细胞损伤以及改善卵巢储备功能的目的。3.5总体疗效分析治疗组（补肾活血方）治疗总有效率为90%。补肾活血方可以通过提高机体抗氧化应激能力及对垂体的反应，增加卵巢血供，促进卵泡发育，改善卵巢损伤，从而提高患者卵巢储备功能。4.不足与展望4.1不足本课题系本人独立完成，经验欠缺，本研究尚有诸多不足之处有待改进。（1）本课题研究例数仅60例，样本量不足，且样本均来源自苏州市中医医院妇二科门诊，实验结果受到一定影响。若能增加样本数量，扩大研究地区范围，则可提高其临床价值。（2）由于本病的诊断标准尚未统一，观察指标较多，由于各方限制，本课题仅采用基本指标FSH、E2、FSH/LH、AFC、OVD作为观察指标，评价缺乏全面性，应丰富观察内容，提高研究结果的说服力。（3）由于时间限制，未能对患者进行长期随访，未来应继续观察患者的妊娠情况等。（4）本课题旨在从氧化应激方面探讨补肾活血方改善卵巢储备功能可能的作用机制，由于条件限制，仅进行了临床研究，未来应增加动物实验研究，从更微观的角度论证该机制的正确性。4.2展望本课题从临床研究出发，结合导师临床经验及前期研究，经实践证明了补肾活血方可通过提高机体抗氧化应激的能力改善卵巢储备功能，为本方的临床应用提供了客观指标依据，为今后本课题的动物实验研究提供了临床数据。随着社会不断发展，中医药的应用也愈加广泛，我们期待更多地利用临床资源进行研究，为本方的临床治疗推广提供科学的、有价值的数据，使更多患者受益。结语DOR发病率的提高以及发病年龄的年轻化趋势，对育龄女性造成了较大的困扰，降低了女性的生活质量。能够尽早干预治疗，发现并采用安全、有效的治疗方法尤为重要。DOR的发病机制尚未明确，治疗研究尚待完善，西医的治疗手段主要以激素替代疗法、ART为主，但其仍存在副作用大、疗效不明确等弊端。近年来，中医治疗DOR的研究取得了较大的进展。其所具有的整体调控、多环节、多靶点等特点为治疗DOR提供了显著优势，为本病临床治疗提供了新的路径。有研究表明，卵巢储备功能的下降与氧化应激密切相关，而中药具有提高机体抗氧化应激能力的作用，为中药治疗DOR的机制研究提供了丰富的临床数据。本课题对比30例健康女性与30例肾虚血瘀型DOR患者治疗前血清氧化应激指标，分析DOR患者机体处氧化应激状态。同时予30例肾虚血瘀型DOR患者补肾活血方治疗3个周期，观察其治疗前、后血生殖激素水平、超声指标、临床症状及氧化应激指标的变化，结果显示：补肾活血方可以提高患者机体氧化应激能力，并有效改善卵巢储备功能。为补肾活血方的临床治疗和推广提供了更丰富的指标依据。参考文献参考文献[1]胡道敏，吴克明.37例卵巢功能低下月经不调患者的中医证型及相关因素分析[J].西部中医药,2012,25(2):87-89.[2]焦东亮，许华山，商艳,等.中西医情绪致病理论的比较和思考[J].北京中医药大学学报，2010,33(10):657-658.[3]杨珺,罗爱月,王世宣.女性卵巢功能与心血管疾病[J].中国妇幼保健,2015,30(04):644-647.[4]赵俊娟，屈爱春.67例女性更年期综合征血液流变学指标的检测及其分析[J].中国微循环，2002,6(3).[5]张岩，谈勇，夏桂成.夏桂成调心补肾治疗卵巢早衰经验[J].广州中医药大学学报,2015,32(05):934-936.[6]髙静，李估，陈应超,等.补肾活血方治疗卵巢储备功能下降的临床观察[J].上海中医药杂志，2014（7）：62-64．[7]许小凤,谈勇,陈秀玲,张吟.补肾活血中药对卵巢储备功能的影响[J].江苏中医药,2007(02):18-21.[8]徐京晓，冯导.中药补肾序贯疗法治疗卵巢功能减退疗效观察[J]．中华中医药学刊，2013（5）：1210-1212.[9]史云，杨胜华，陶莉莉，等.滋肾育胎丸治疗脾肾虚弱型卵巢储备功能减退临床观察［J］．山东中医药大学学报，2013（4）:292-294.[10]杨冬梅，陆东权，景致英.温阳疏肝法治疗卵巢储备功能下降不孕症56例临床观察[J].四川中医，2013（5）：103-105.[11]李健美，夏桂成.夏桂成教授治疗卵巢储备功能低下病案举隅[J]．江宁中医药大学学报，2016（5）：16-19.[12]方晓红.自拟滋肾宁心汤联合人工周期治疗卵巢早衰效果观察[J].中国乡村医药,2015,22(06):38-39.[13]常丽华,庞雁.西药联合滋阴疏肝汤治疗卵巢储备功能减退致不孕不育57例临床观察[J].中国民族民间医药,2020,29(01):91-93.[14]杨光秀.中西医结合调周法治疗肾虚型卵巢储备功能下降所致不孕症的临床研究[D].山西中医药大学,2018.[15]万凌屹，丁彩飞，俞佳.补肾活血方治疗肾虚血瘀型卵巢储备功能下降临床观察［J］．中华中医药学刊，2018，36(2):432-434．[16]陈贵平,陈秀莲,武倩楠.探讨对卵巢储备功能低下患者给予补肾调经中药干预后的子宫卵巢血流指数的影响[J].世界最新医学信息文摘,2017,17(99):138-140.[17]许小凤，谈勇，陈宣伊，等．补肾活血中药对雷公藤致卵巢储备下降大鼠颗粒细胞凋亡的影响［J］．医学研究杂志，2009，38(12):123-125．[18]黄姗姗.补肾活血方对免疫性卵巢早衰小鼠PI3K、AKT1及MTOR蛋白表达的影响[D].湖南中医药大学,2019.[19]谢幸，苟文丽．妇产科学［M］．北京：人民卫生出版社，2014：16．[20]赖爱鸾，孙艳格，张李松,等．性激素、年龄、月经模式变化对卵巢储备功能的预测价值［J］．中国实用妇科与产科杂志，2010,9:717-719.[21]韩靖佩,夏天.卵巢储备功能下降的中西医发病机制研究进展[J].湖南中医杂志,2019,35(03):157-160.[22]蓝洁珍,马桂英,邵茸.异位妊娠输卵管切除术对卵巢储备功能的影响[J].临床合理用药杂志,2016,9(8A):52-54.[23]MohamedML,NouhAA,El-BeheryMM,etal.Effectonovarianreserveoflaparoscopicbipolarelectrocoagulationversuslaparotomichemostaticsuturesduringunilateralovariancystectomy[J].InternationalJournalofGynaecology&ObstetricstheOfficialOrganoftheInternationalFederationofGynaecology&Obstetrics,2011,114(1):69.[24]韩莹，张云山．卵巢储备功能下降相关因素的logistic回归分析［J］．现代妇产科进展，2015,24(2):109-111．[25]PGuerin,SElMouatassim,YMenezo.Oxidativestressandprotectionagainstreactiveoxygenspeciesinthepreimplantationembryoanditssurroundings[J].HumReprodUpdate.2001,7(2):175-189.[26]ReiterRJ,Rosales-CorralSA,ManchesterLC,etal.Peripheralreproductiveorganhealthandmelatonin:readyforprimetime[J].IntJMolSci,2013,14(4):7231-7272.[27]PasqualottoEB,AgarwalA,SharmaRK,etal.Effectofoxidativestressinfollicularfluidontheoutcomeofassistedreproductiveprocedures[J].Fertilityandsterility,2004,81(4):973-976.[28]MoradoSA,CeticaPD,BeconiMT,etal.Reactiveoxygenspeciesinbovineoocytematurationinvitro[J].Reproduction,FertilityandDevelopment,2009,21(4):608-614.[29]李红真,乔杰.氧化应激与卵巢老化[J].中国实用妇科与产科杂志,2015,31(08):774-778.[30]BehrmanHR,KodamanPH,PrestonSL,etal.Oxidativestressandtheovary[J].JournaloftheSocietyforGynecologicInvestigation,2001,8(1suppl):S40-S42.[31]刘建,聂广宁,杨洪艳.过氧化氢诱导人卵巢颗粒细胞氧化应激模型的建立[J].广东医学,2017,38(7):986-989.[32]范丽洁.补肾法改善氧化应激提高重复COS卵母细胞线粒体功能与调控Nrf2信号通路的关系[D].石家庄:河北医科大学,2017:99-101.[33]梁莹,田茜华,穆玉霞,等.苍附苁仙汤对多囊卵巢综合征氧化应激的影响[J].中国中西医结合杂志,2016,36(6):685-689.[34]宋诗艳.补肾中药通过JAK2/STAT3信号转导通路对高龄IVF女性卵巢颗粒细胞抗氧化应激促进增殖机制研究[D].山东中医药大学,2016.[35]BurtonGJ,JauniauxE.Oxidativestress[J].BestPracResClinObstetGynaecol,2011,25(3):287-299.[36]刘子霞,范晓明,徐玲,等.FSH水平及年龄预测卵巢功能降低患者ART助孕价值研究[J].人民军医,2014,57(7):781-783.[37]严东琴.育龄期妇女月经紊乱与卵巢储备功能的关系探讨[D].广东:南方医科大学,2012.[38]何仲,林守清,陈蓉,等.卵巢衰老过程中的月经改变[J].协和医学杂志,2016,7(2):81-87.[39]黄金台,雷志英,罗小琼,等.月经周期改变、克罗米芬刺激试验在卵巢储备能力下降预测中的意义[J].中国妇幼保健,2014,29(17):2684.[40]刘继龙,陈枚燕,林春莲,等.年龄联合基础卵泡刺激素水平预测卵巢储备功能的初步研究[J].现代中西医结合杂志,2013(20):2173.[41]SunN,LinSQ,LinHJ,etal.Comparisonoffollicle-stimulatinghormone,estradiol,ovarianvolume,andantralfolliclecount,basedontheStagesofReproductiveAgingWorkshopsystem,amongcommunity-basedwomeninChina[J].Menopause,2013,20(7):736-741.[42]孟昱时,周红林,杨洁,等.年龄,基础FSH、E2,窦卵泡数预测卵巢反应性的回顾性研究[J].中国计划生育学杂志,2012,20(12):836.[43]SeckinB,TurkcaparF,OzaksitG.Elevatedday3FSH/LHratio:amarkertopredictIVFoutcomeinyoungandolder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inhibinB抑制素BBcl-2BB-celllymphoma-2 淋巴细胞瘤-2基因MTORmammaliantargetofrapamycin,mTOR雷帕霉素靶蛋白PCO Spolycysticovarysyndrome 多囊卵巢综合征IVFinvitrofertilization体外受精FMR1 fragileXmentalretardation1脆性X综合征基因BMP-15BoncMorphogcneticProtein骨形态发生蛋白-15FSHRFollicle-stimulatinghormonereceptor卵泡刺激素受体FOXL2wingedhelixforkheadtranscriptionfactorgene2睑裂狭小基因AOAbAnti-OvaryAntibody抗卵巢抗体ROS reactiveoxygenspecies活性氧簇8-OHdG8-hydroxy-2deoxyguan