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文档简介

第五章

尿液检验第二次课

Go…第一节概述

尿液(urine)由肾脏生成,通过输尿管、膀胱及尿道排除体外。尿液是人体日生成与排泄量最多的液体,其生成和排泄依赖于泌尿系统正常的结构与完善的功能,受神经、体液、内分泌系统的有机调节,同时还受全身其它系统功能状态的影响。通过尿液的排泄,可排出体内的代谢废物、异物、毒物等,同时调节水、电解质代谢及酸碱平衡,借以维持内环境的相对恒定。此外,肾脏还分泌一些生物活性物质,具有重要的生理功能。

一、尿液的生成与排泄(一)肾的结构。肾单位是肾脏泌尿活动的最基本的功能单位,包括肾小体和肾小管,与集合管共同完成泌尿功能。肾脏组织基本结构

肾小球(血管球)`

肾小体`

肾小囊(Bowman囊)`

肾单位曲部(近曲小管)`

近端小管`

直部(髓袢降支粗段)`

肾小管细段髓袢`肾脏直部(髓袢升支粗段)`

远端小管`

曲部(远曲小管)

集合管皮质段髓质段乳头管肾脏的大体结构肾脏的大体结构胰腺炎—血淀粉酶↑糖尿病—血糖↑肝胆病—直接胆红素↑早孕、葡萄胎—绒毛膜促性腺激素↑尿(二)尿液生成过程尿液的生成包括三个相互联系的环节,包括肾小球的滤过、肾小管的重吸收和肾小管与集合管的分泌(排泄)。1.肾小球的滤过作用正常肾小球的基底膜对血浆成分的滤过具有选择性。影响肾小球滤过的因素有:(1)有效滤过压:有效滤过压=肾小球毛细血管压一(血浆胶体渗透压+肾小球囊内压)。(2)滤过膜的通透性:肾小球滤过膜有三层结构,即毛细血管壁的内皮层、基膜及覆盖于外的肾小球囊脏层的上皮细胞,都有大小不同的孔,构成机械性屏障。(3)滤过面积:人体两肾约有200万个‘肾单位,肾小球毛细血管总面积达1.6m2以上,接近人体总体表面积。2.肾小管与集合管重吸收A.近曲小管:重吸收葡萄糖、小分子蛋白质、AA、乳酸、肌酸、离子(K、Na、Cl、Ca、P、Mg、HCO3)、大部分水、硫酸盐、磷酸盐、尿素、尿酸。肌酐几乎不被重吸收而排出体外。B.远曲小管、集合管:重吸收水3.肾小管和集合管的分泌与排泄作用肾小管和集合管的泌H+、NH4+作用及Na-K交换作用。(三)尿液的排泄原尿经肾小管和集合管的重吸收、分泌与浓缩稀释后即形成了终尿,流经肾盂、输尿管到达膀胱并储存,通过尿道排出体外。二、尿液检验目的㈠泌尿系统疾病的筛查与鉴别炎症、肿瘤、结石、㈡监测其他系统疾病的辅助诊断与观察糖尿病㈢安全用药的监护㈣中毒与职业病的防护㈤健康体检16三、尿液标本的收集、保存与检测后处理(一)尿标本收集为保证检查结果的准确性,收集标本时注意以下几点:1.容器清洁、干燥,密封性能好、具有较大口径,便于留取尿液的一次性尿样杯;具有安全、易于启盖的密封容器,以利于标本的储运。容器周围应标有病人的姓名、检验联号(条形码),并留有填写标本留取时间的空间。2.标本留取的时间与方法

(1)清晨空腹尿适用于糖尿病的筛查、泌尿系统疾病的诊断、疗效观察等。

(2)餐后2h尿可用于糖耐量检查。

(3)随机尿适用于门诊或急诊化验的病人。

(4)定时尿

3h尿尿细胞排泄率

12h尿Addis计数已经淘汰

24h尿尿化学成分定量测定

(5)导尿或耻骨上膀胱穿刺尿尽量不采用,以免发生医源性感染。(二)尿标本的保存※⑴冷藏(<6h)2~8℃——抑菌/固定有形成分

⑵尿化学成分检查——糖/蛋白

甲苯(toluene)5~20ml/L尿—膜

⑶尿有形成分检查

40%甲醛(formalin)5~10ml/L

⑷结核杆菌等尿菌检查

麝香草酚(thymol)0.1g/100ml_抑菌

⑸尿激素检查—17-羟/酮等

浓盐酸(hydrochiloricacid)1ml/L-尿PH=2⑹卟啉尿

碳酸钠(sodiumcarbonate)10g/24h_碱化尿(三)

检验后标本处理※

1向下水道排放:10g/L过氧乙酸或漂白粉;2设专用容器—收集—消毒—交环卫处;3容器重复使用:浸泡—水冲洗—烘干`70%乙醇浸泡`30-50g/L漂白粉`10g/L次氯酸钠液2小时`5g/L过氧乙酸30-60分4消毒后——烧毁

第二节尿液理学检查[尿液理学检验]一尿量二颜色/透明度三尿比重四尿渗透压/尿渗量掌握临床意义一、尿液感官检查(一)尿量尿量(urnaryvolume)一定时间排除的尿量,主要取决于肾小球的滤过、肾小管的重吸收和浓缩-稀释功能,还受饮食起居习惯、环境等的影响。正常成人尿量1000~2000ml/d

[临床意义]※

1少尿(oliguria)<400ml/d或<17ml/h

无尿(anuria)<100ml/d或0ml/12h⑴肾前性A心功能不全

B休克、高热、

C大面积烧伤、剧烈呕吐、腹泻

⑵肾性

A急性肾小球肾炎

B肾功能衰竭

C肾移植后的排斥反应⑶肾后性结石、损伤、肿瘤、组织增生等

3多尿(polyuria)>2500ml/d

⑴小管浓缩功能↓⑵溶质性利尿糖尿病GS↑

尿毒症BUN↑⑶尿崩症⑷多饮性习惯、精神性、疾病

㈡尿液外观尿液外观指尿液的颜色和透明度。正常尿液为淡黄色或桔黄色,清晰透明。【临床意义】※1、血尿血尿(hematuria)指尿内含一定量RBC

肉眼血尿1ml/L洗肉水镜下血尿尿沉渣RBC>3个/HP

原因A泌尿生殖系统—炎/石/伤/瘤

B血液病血友病、过敏性紫癜

C其他2、血红蛋白尿(hemoglobinuria)

定义血浆游离Hb>1000mg/L—Hb尿

外观新鲜—粉红陈旧—棕/酱油/浓茶特点镜检无RBC、潜血(BLD)+

意义血管内溶血3、肌红蛋白尿(myoglobinuria)

外观新鲜—粉红陈旧—暗褐色特点镜检无RBC、潜血(BLD)+

加80%硫酸铵溶液—溶解意义各种肌损伤:大面积烧伤/缺氧缺血肌病4、脓尿脓尿(pyuria)尿中含大量脓/白细胞(〉200×106/L)肉眼不同程度的黄白色混浊或含脓丝状悬浮物。见于泌尿系统化脓性感染、肾结核等。

5、乳糜尿(chyluria)乳糜/淋巴液尿原理特点①乳糜试验混尿+乙醚—乳糜微粒+苏丹Ⅲ染色

阳性橘红色脂肪球②尿静置后分三层病因①丝虫病②结核③肿瘤④胸腹部创伤6、结晶尿(crystalluria)

定义尿内含大量的盐类结晶种类①尿酸盐—+热清②磷酸/碳酸盐—+乙酸清/+气泡③草酸盐—+盐酸清镜检见大量盐类结晶(三)气味正常尿液略带酸味。受饮食或药物等因素的影响,长时间放置后由于尿素分解带有氨臭味。二尿比重测定㈠定义

尿比重(urinaryspecif£gravity,SG)指在4℃时尿液与同体积的纯水重量之比,又称尿比密,它表示肾小管的浓缩和稀释能力。㈡测定方法及评价1试带法⑴简单,不受GS,造影剂影响⑵精确度差,对过高/低的SG不敏感,不能作为诊断肾功能变化的指标。2尿比重计法(uriometer)

由于比重计本身刻度标示误差较大而容易引起系统误差,因而NCCLS建议不再使用比重计法。3、折射计法有手提式或座式两种仪器。标本用量小,可重复测定,尤其适用于少尿患者。结果精确可靠,还可测算总固体量。应用较为普遍。被NCCLS推荐为参考方法。㈢意义※1正常1.013~1.035晨尿≥1.0182SG↑缺水、溶质↑、急性肾炎3SG↓肾炎、大量饮水、尿崩症三、尿液渗透浓度测定㈠定义在一定大气压和温度下尿内溶质分子和离子的个数。㈡检测方法及评价1冰点法2评价:尿渗透压比SG更能客观的反映肾脏的浓缩稀释功能.㈢临床意义※

⑴正常600∽1000mOsm/KgH2O⑵了解肾小管浓缩稀释功能

四、尿液浓缩稀释试验

1.Fishberg(费氏)浓缩稀释试验(concentration—dilutiontest)2.昼夜尿比重试验,又称莫氏(mosenthaltest)浓缩稀释试验3·3h尿比重试验又称改良莫氏试验第三节尿液常规的化学检查一尿液酸碱度测定※

1测定方法及评价黄-酸⑴指示剂法尿+溴麝香草酚篮绿-中`

`(bromothymolblue,BTB)蓝-碱特点①简单`②黄疸/血尿易干扰`③指示剂变色范围(6-7.6)⑵试纸法试纸/试带浸入尿中目/仪器测特点①简单,广泛用应;`②试带易变潮—试带垫片(BTB+甲基红)⑶滴定法0.1mol/LNaOH+尿PH滴定至7.4

`

求尿液可滴定酸特点①可进行pH值动态监测

②操作复杂⑷PH计法用电极直接测定特点①精确度高,适用于科研`②需要特殊仪器—经常效准PH计浓度标准/新鲜2、质量控制⑴.试纸要避光、干燥保存,防止被其它化学物质污染。⑵.标本应及时测定,长期放置会因细菌生长分解尿素产生氨,使pH偏高。⑶.尿液pH本身还可作为其它检查项目的质控指标,若pH<3或>9均会影响其它检测结果,如蛋白、比重等。应按规定进行调整。3、临床意义⑴正常①尿PH=4.5~8.0晨尿=5.5~6.5`②尿可滴定酸=20~40mmol/24h⑵尿PH减低①进酸性物—高蛋白食/酸性药物;②体内产酸增多:A饥饿/运动/应激;B酸中毒/痛风/白血病/糖尿病等③肾小管排酸增多:低血钾性碱中毒④CO2潴留—呼吸性酸中毒⑶

尿PH增高①进碱性物—过多蔬菜水果/碱性药物②体内丢酸增多③肾小管排酸减少肾小管性酸中毒④CO2排出增多呼吸性碱中毒⑤产碱增多—尿路感染细菌分解尿素产氨⑷指导临床用药二、尿液蛋白质定性检查※定义:尿蛋白>150mg/24hor>100mg/L,常规化学定性检查呈阳性,称为蛋白尿(proteinuria)。

1测定方法及评价⑴试带法

原理:蛋白

+指示剂

-PH颜色变化—蛋白量成正比评价:A快速,简便-适于普查`B清蛋白—敏感/球蛋白—不敏感`

`

本周蛋白漏检`C尿PH增高—假阳性⑵加热乙酸法原理:蛋白+热—变性/凝固+酸—易沉淀

消除磷酸盐干扰量要适当标准/合格评价:A特异性强,干扰因素少`B检出清/球蛋白—敏感度低(0.15g/L)`C用作蛋白质定性的确证试验。⑶磺基水杨酸(磺柳酸)法原理:带正电蛋白+磺柳酸沉淀1.某些药物-青霉素/SMZ-CO及造影剂2.尿内含高浓度尿/草酸或粘蛋白评价:A简便/灵敏/迅速/敏感度高(0.05g/L)`B与所有的蛋白都能反应29假阳性

2意义⑴正常定性(-)⑵蛋白尿定性(+)①生理性机理肾血管痉挛→毛细血管通透性↑原因运动,受寒,紧张,妊娠,发热,体位性等。特点定性(+)27总蛋白定量②病理性A肾小球性蛋白尿机理肾小球滤过膜孔径↑或静电屏障改变特点定性+~++++原因原发或继发肾小球肾炎,(+~++)肾病综合症(++++)28B肾小管性蛋白尿机理肾小管损害特点±~++

原因肾小管间质性肾炎C混合性蛋白尿机理与特点小球+小管原因小球和小管性疾病后期D溢出性蛋白尿病机多发性骨髓瘤(Bence—Jones蛋白) 溶血性疾病(Hb) 29

大面积肌损伤(肌红蛋白)特点定性(+)—(++)

E组织蛋白尿机理a肾单位分泌

b其它器脏产生的原因提示组织损伤,心肌坏死,肿瘤

F假性蛋白尿原因血液/白带/月经/前列腺液等污染30总蛋白定量三、尿液糖定性检查※1测定方法及评价⑴班氏法原理※:GS+班氏试剂——变色质控※——假阳性评价:①非特异性定性试验`②简单/但易受其他还原物的影响⑵干化学试带法原理:特异性GS+过氧化物酶——蓝/红还原VitC/尿酸/或其他糖类等煮沸1尿混有强氧化物—漂白粉—假(+)2标本久放-细菌分解GS—假(-)30质控※评价:特异性强/灵敏度高/简便迅速⑶薄层层析法复杂/费时/昂贵意义※⑴正常定性(-)⑵糖尿定性(+)①生理性A饮食性

B精神性

C妊娠(15~20%)

定量②病理性:

A垂体前叶机能↑—生长激素↑1)内分B甲亢泌疾病C胰岛素分泌↓→利用葡萄糖↓

D肾上腺皮功↑→促糖原异生E嗜酪细胞瘤去甲…,肾上腺素↑

—肝糖原降解2)肾性糖尿小管损害(肾糖阈↓)③其他糖尿如乳糖等

定量四、尿中酮体定性检查※

1概念尿酮体(urineketoneodies,KET)是脂肪代谢中间产物,由乙酰乙酸、β羟丁酸和丙酮组成。2测定方法及评价⑴Lange法※

乙酰乙酸+亚硝酸基铁氰化钠`

丙酮+…..⑵Rothera

原理同Lange法⑶干化学试带法原理同上质控※尿要新鲜碱紫红色化合物41评价不同试带对酮体的敏感性不同方法灵敏度(mg/L)

乙酰乙酸β羟丁酸丙酮

Lange50-200Rothera80

-100干化学试带法

50~100

-400~700意义※⑴正常定性(-)⑵糖尿病酮症酸中毒假(-)①肾酮阈值增高—肾严重受损`②酮血症期——β羟丁酸⑶其它应激-剧烈运动/饥饿/感染/严重腹泻,呕吐/全麻等中毒五、尿液胆红素定性检查※1体内胆红素代谢肝门静脉O2肠管衰老RBC无效RBC生成其它:如Mb等血红素↓胆绿素↓胆红素单核-吞噬C胆红素-清蛋白复合物(非结合胆红素)非结合胆红素↓↓↓葡萄糖醛酸胆红素(结合胆红素)血管肝C胆管

葡萄糖醛酸胆红素↓胆素原←一一胆红素胆素→

胆素原肾尿尿三胆包括:尿胆红素/尿胆原/尿胆素2测定方法及评价尿胆红素(bilirubin)测定※①重氮法结合胆红素+二氯苯胺重氮盐※

红色复合物评价:简单—尿自动化/灵敏度7-14umol/L②Harrison法原理※胆红素+氯化钡——胆氯素(绿色)评价:Harrison法-稍繁但灵敏度高3意义(见尿胆原)45酸

意义酸六、尿胆原(urobilinogen,URO)定性检查1、测定方法及评价⑴改良Ehrlich法原理※

URO+对二甲氨基苯甲醛——樱红色⑵干化学法①原理同上②URO+重氮化合物→红色复合物评价:A干化学法可半定量,不受胆红素的影响B改良Ehrlich法操作简便但易受干扰46酸2意义※

正常人及三种黄疸的胆红素检查结果`

47黄疸类型血清胆红素(mol/L)

尿检查

结合型非结合型结合/非结合型尿胆原尿胆素尿胆红素正常人0~6.81.7~10.220%-~±--溶血轻度↑明显↑<20%+++-肝细胞中度↑中度↑>35%+++阻塞明显↑

轻度↑

>60%

--+

尿胆红素七、尿血红蛋白定性检查※1测定方法及评价⑴化学法原理※Hb-亚铁血红素+——变色质控※评价:简单/特异性低/稳定性差⑵试带法原理/质控※同上评价:①稳定性比⑴好`②灵敏度150~300μg/L邻联甲苯胺氨基比林氧化防假(+)—尿含有铁/锌/碘化物/细菌产生过氧化物酶42返回首页⑶金单克隆抗体法原理※胶体金标记抗人Hb的单克隆抗体质控尿中Hb过高稀释免假(-)评价:灵敏度高/特异性强/操作快2意义※⑴正常(-)⑵各种原因血管内溶血性疾病⑶因泌尿系统疾病引起的出血43八、尿液亚硝酸盐定性检查1、测定方法及评价⑴干化学法尿中具有硝酸盐还原酶的细菌增加时可将硝酸盐还原为亚硝酸盐,并将氨基苯砷酸重氮化而成重氮盐,以此重氮盐再与α-萘胺偶联呈现颜色变化,颜色的深浅与亚硝酸盐含量成正比。评价

灵敏度为0.3~0.6mg/L,可用于仪器检测。⑵湿化学法原理同上评价方便/快速NIT阳性的三个条件:①感染的病原微生物的种类,②尿液滞留时间,③硝酸盐的存在。2、质量控制:使用新鲜的晨尿.3、临床意义:该指标可作为泌尿系统感染的的过筛试验,但NIT阴性不能排除感染。第四节尿液其他蛋白质的检查一、尿中本-周蛋白定性检查1、概念本-周蛋白是一种免疫球蛋白的轻链单体或二聚体,属于不完全抗体球蛋白,分为κ型和λ型。又称凝-溶蛋白。2测定方法及评价⑴热沉淀-溶解法原理※

尿+热(40-60℃凝固90-100℃溶解)评价:灵敏度不高BJP>300mg/L才检出,必需严格控制PH值(PH4.5-5.5)。⑵对-甲苯磺酸法(TSA)原理※

尿BJP+对-甲苯磺酸—沉淀`评价:简单/灵敏度高(BJP=3mg/L),但特异性差(受清蛋白影响)。38⑶蛋白(乙酸纤维素膜/SDS)电泳法原理※尿蛋白+5~10%SDS—复合物(负电)`

PA—蛋白区带

评价:①检出率达97%`②乙酸纤维素膜法—可见“M”带⑷免疫电泳(IFP)原理※

琼脂电泳+特异抗原抗体反应—沉淀弧评价:①简单/特异性强`②不同抗原含量大时,不能全部显示1)尿BJP较低时,—浓缩10-50倍2)尿Mb/溶菌酶/脂蛋白等—免疫电泳43可在β至γ⑸免疫固定电泳(IFE)原理※电泳+抗原抗体反应(抗血清加于电泳后`

区带上)—沉淀于固相物中评价:比⑶/⑷更敏感⑹免疫速率散射浊度(IRN)原理※BJP+抗κ和抗λ抗血清——光散射(强``

度与复合物量成正比)评价:①速度快/灵敏/精确度高②能定量测定κ和λ轻链,结果可靠光40意义※

⑴正常(-)⑵辅助诊断①多发性骨髓瘤κ/λ=2:1②巨球蛋白血症80%-轻链③原发性肾淀粉样变70-89%—单克隆蛋白⑶预后观察:

尿中大量BJP(伴清蛋白)—易发肾功能不全

41二、尿液肌红蛋白定性检查1、概念肌红蛋白(myoglobinMb)是存在于横纹肌中的一种色素蛋白质,每个肌红蛋白分子由一条蛋白肽链和一个亚铁血红素组成,分子量1.745万,约为Hb分子量的1/4,有种属特异性,与氧可逆性结合为肌肉组织供能。2、Mb的特性(1)Mb可自由透过肾小球形成Mb尿;(2)具有类似过氧化物酶的活性;(3)可被100%硫酸铵沉淀而不被80%硫酸铵沉淀,这是Mb区别于Hb的另一个特性。3、测定方法及评价(1)化学法此法检查方便,敏感性较高。80%硫酸铵沉淀Hb尿液上清液隐血试验(2)分光光度法Hb同Mb的一氧化碳结合物各自吸收光谱完全不同,Hb为568nm;而Mb为78nm,借此可将二者区别开,但不够敏感(30mg/L)。此外超滤法、硫酸铵沉淀法、层析法和电泳法等,均不敏感而且影响因素较多,未能在临床推广。

(3)单克隆抗体免疫法是最为敏感、特异的方法,既可作为确证试验又可进行尿中Mb定量分析。尤其对急性心肌梗死的Mb尿检查具有重要临床价值。4、参考值阴性5、质量控制(1)标本要新鲜,否则肌红蛋白将因变性而被硫酸铵沉淀,影响实验结果。(2)宜将硫酸铵缓慢加入尿中,轻微振荡,防止同时沉淀肌红蛋白引起假阴性。6、临床意义肌红蛋白尿见于:

(1)大面积外伤如挤压伤或其它外伤造成的肌肉组织损伤,尤其是发生挤压伤综合征时,可引起急性肾衰竭。

(2)缺氧、缺血局部组织缺血可使肌肉组织破坏如心肌缺血所致心肌梗死。此外,各种中毒、全身感染、恶性高热和低钾血症导致全身性缺氧与微循环障碍时,也会出现不同程度的肌红蛋白尿。

(3)其它原发性肌红蛋白尿症和家族性肌病、肌炎综合征(多发性肌炎、皮肌炎、系统性红斑狼疮等)、进行性肌营养不良等也可出现肌红蛋白尿。三、尿液清蛋白定量测定

概述清蛋白(albumin,Alb)是血浆蛋白的主要成分,不容易滤过肾小球,主要由近曲肾小管重吸收。早期的肾小球病变,清蛋白排泄率即有所增加,该指标的早期变化能敏感地反映肾小球功能的损害。1、测定方法及评价常用的检测方法有免疫分析法和化学定量法

(1)化学定量法主要是溴甲酚绿法,该法操作简单,试剂易得,但敏感度及特异性均较差,线性范围窄,不利于检出微量清蛋白。

(2)放免法和酶免疫法有成品试剂盒。受实验室条件限制,尤其是放免法,有被酶免疫法及免疫比浊法取代的趋势。可根据实验室条件选择应用。

(3)免疫比浊法该法操作简便,敏感度及特异性也较高。有商品试剂盒,可在全自动生化仪上完成实验。此法应注意非特异性浊度及抗原抗体比例的控制。2、参考值晨尿6.5±5.1mg/L

随机尿1.27±0.78mg/mmolCr24h尿5.7±2.6mg/24h3、临床意义肾小球发生病变可使清蛋白滤过增加,肾小管受损影响蛋白质重吸收也会出现清蛋白排泄率升高。

(1)早期肾损害的筛检如用于糖尿病、高血压、重金属及药物中毒性肾病的早期肾损害的筛检。

(2)过敏性紫癜的肾功能监测有助于防止并发肾损害。

(3)肾小球肾炎的病情观察

(4)其它如尿路感染、某些特发性水肿等可轻度升高。四、尿总蛋白定量测定1、测定方法及评价

(1)双缩脲法是测定尿蛋白质总量的常规参考方法,本法显色稳定、重复性好,对清蛋白、球蛋白具有相同的敏感性。缺点是灵敏度低。

(2)染料结合法这类方法灵敏度高、操作简便快速呈色稳定。考马斯亮蓝法邻苯三酚红钼酸络合法丽春红S法(干扰因素少)

(3)比浊法主要有磺基水杨酸-硫酸钠法(SSA)、三氯乙酸法(TCA)和钨酸法。(4)免疫比浊法或放射免疫法是最精密准确的方法,不但可以进行蛋白总量的测定,还能进行成分分析。(线性范围窄,受水杨酸类药物和麝香草酚的干扰)(受表面活性剂的干扰)

2、参考值双缩脲法:40~150mg/24h尿丽春红S法:46.5~18.1mg/L

考马斯亮蓝法:58.6~134mg/24h尿

3、质量控制(1)方法选择尿蛋白成分很复杂,应根据蛋白成分特点,结合实验方法的灵敏度和线性范围选择测定方法,最好采用对清蛋白球蛋白同样敏感的方法。

(2)标本要求应首先离心除去杂质,取上清液进行蛋白定性,根据估算量和方法的敏感及线性决定样本加入量(稀释或加大标本用量,见P149)(3)尿液浓缩标本经酸沉淀处理后应除净上清液,谨防丢失蛋白沉淀物。(4)消除尿液颜色的干扰颜色较深的尿液应作样本空白对照。4、临床意义同尿蛋白定性试验,优点是大大提高了肾脏疾病的阳性检出率。蛋白定性五、尿β2微球蛋白(β2-MG)定量测定

概述

β2微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG)是机体有核细胞产生的单链球蛋白,分子量小(11800),它是人类淋巴细胞表面抗原(HLA)的β链部分,由100个氨基酸和一对二硫键组成,不含糖。因电泳时位于β2区带而命名,生物半衰期约107min。β2-MG广泛分布于血液、尿液和唾液及乳汁中,可自由通过肾小球,但几乎完全被肾小管重吸收并分化,故尿中排除极少。

1、测定方法及评价主要用放免法和酶免疫法测定。这两种方法敏感度和特异性均较高,但受到实验室条件限制。免疫比浊法具有同样的敏感度及特异性,操作简便、能直接定量而得以快速普及,在普通分光光度计、紫外分光光度计及自动生化分析仪上均适用,还可以用特种蛋白仪进行检测。为了便于临床分析,应同时测定尿肌酐,以二者的比值代表β2-MG排泄率。并进行血β2-MG测定。2、参考值尿β2-MG<0.3mg/24h,β2-MG排泄率为<o.2mg/(g.Cr)

血β2-MG<0.3mg/L3、质量控制(1)标本处理尿中β2-MG较不稳定,酸性尿尤其在pH5.2以下极易分解,因此标本采集后应立即测定,或将pH调至6.5~7.0后再冷藏保存。(2)试剂要妥善保管,每批测定应带一份合格的质控样品。4、临床意义

(1)肾小球滤过功能受损的敏感指标肾小球病变时,血β2-MG升高,较肌酐等其它指标敏感。

(2)肾小管疾病的早期诊断指标肾小管炎症、中毒、坏死及肾间质病变,上皮细胞胞饮功能受损,尿β2-MG排出率增加;使用庆大霉素、多粘菌素等肾毒性药物后尿β2-MG增加,提示应减量或停药。

(3)鉴别上、下尿路感染肾盂肾炎时,肾小管受损β2-MG增加;下尿路感染则正常。

(4)观察肾移植排斥反应肾移植发生排斥反应时尿β2-MG增加。

第五节

尿液酶的检查一、尿淀粉酶测定淀粉酶(AMY)的主要来源:主要来源于胰腺(为同工酶P)和唾液腺(为同工酶S),血清中AMY易从肾脏排出。1、测定方法及评价

(1)碘-淀粉比色法(Somoggi法)

其缺点是底物难以标准化,反应不呈零级反应。本法应尽量使用同一批号的淀粉底物;当A测定<1/2A空白时,应将标本加大稀释倍数后再测定。

(2)2-氯-4硝基苯酚-α-麦芽糖三糖法(CNP-G3法)

线性:血清<1300U/L;尿液<2500U/L。氟化物、草酸盐、柠檬酸盐及EDTA盐等干扰本法的水解反应,应避免使用,最好使用血清。

(3)对硝基麦芽七糖法(4NP-7G法)

线性(25℃时,2000U/L)及稳定性均较好。△A/min>0.15时,应将标本稀释后再测定。

(4)免疫抑制法和电泳法

用于同工酶测定2、参考值方法参考值(U/L)血清尿液Somoggi法(37℃)800~1800100~12004NP-7G法(37℃)100~220120~1200CNP-G3法(37℃)<600<3003、临床意义

(1)急性胰腺炎发病3~6h,血清AMY活性开始增高,20~30h达峰值,持续3~5天恢复正常;发病12~24h,尿AMY开始升高,3~10天后恢复正常。血清AMY同工酶P型升高。血清AMY主要用于急性胰腺炎的早期诊断,尿AMY主要用于病情观察。(2)慢性胰腺炎稳定期,各项酶指标正常,急性发作时AMY及其P型同工酶均升高。(3)其它胰腺癌、胰腺囊肿AMY活性重度升高。卵巢癌、肺癌、流行性腮腺炎时AMY也升高,但以S型为主。AMY在肝合成,严重肝病时降低。概念:存在各种组织的溶酶体—水解酶`

分子量为14万——肾小球基膜意义:①正常<18.5U/L②是肾小管损害最敏感的指标之一③可作为上下尿路感染的鉴别`

上—NAG↑

下—NAG正常

59二、尿N-乙酰-β-D氨基葡糖苷酶(NAG)

三、其它尿酶

如尿γ-GT

尿丙氨酸氨基肽酶(AAP)尿胰蛋白酶II(TR)等。第六节

尿液其它化学成分检查一、尿葡萄糖定量测定

尿中排出的糖主要是葡萄糖,也有微量的乳糖、半乳糖、果糖等。当血浆葡萄糖浓度升高,进入尿中的葡萄糖超过肾小管重吸收阈值(8.88mmol/L)或肾小管重吸收葡萄糖值下降时,较多葡萄糖从尿中排出。1、测定方法及评价(1)己糖激酶法葡萄糖+ATP葡萄糖-6-磷酸+ADP葡萄糖-6-磷酸+NADP6-磷酸葡萄糖酸+NADPHNADPH生成的速度与葡萄糖浓度成正比,用分光光度计340nm波长测定吸光度,计算出葡萄糖的浓度。此法特异性比葡萄糖氧化酶法高,可应用全自动生化分析仪检测,但成本较高。G-6-PD己糖激酶HK

(2)邻甲苯胺法葡萄糖+邻甲苯胺葡萄糖基胺生成席夫(schiff)碱有色化合物生成的有色化合物,吸收峰630nm。本法是卫生部《全国临床检验操作规程》推荐的方法,是一种传统测定尿液中葡萄糖的较满意的方法,灵敏度较低,不适宜仪器检测,适用于一些较小的医院。强酸△脱水结构重排

(3)葡萄糖氧化酶法

葡萄糖+O2+H2O葡萄糖酸+H2O2H2O2+苯酚+4-氨基安替比林醌亚胺+H2O

生成的有色化合物(红色醌亚胺)在480~550nm处有最大吸收峰。本法不适合尿液葡萄糖测定,因尿液中各种还原性物质,如VitC,尿酸含量较高,会影响葡萄糖氧化酶反应中产生的过氧化氢,降低呈色反应,而导致负偏差。

GOD

POD

2、质量控制(1)留尿后立即测定,因尿易引起污染而使尿糖降低。(2)如果尿中葡萄糖含量过高可适当稀释后测定,结果应乘以稀释倍数。

3、参考值:<2.8mmol/d(<0.5g/d)

0.1~0.8mmol/L4、临床意义同定性试验()。但定量测定有助于胰岛素依赖性糖尿病患者治疗过程的监测。意义二、乳糜尿定性检查

乳糜尿(chyluria)是肠道吸收脂肪皂化后的乳糜液体,不能沿正常淋巴道引流至血液,而逆流至泌尿系统淋巴管中,使该处淋巴管产生高压、曲张、破裂(因肾淋巴管最脆弱),导致乳糜液进入尿液中,使其外观呈不同程度的乳白牛奶状。乳糜尿内含脂肪微滴、卵磷脂、胆固醇及少量纤维蛋白原和清蛋白等。如含有较多血液时,称为乳糜血尿。乳糜尿的程度与病人摄入脂肪量、淋巴管破裂程度和运

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