组织学与胚胎学-绪论

绪论组织学与胚胎学histologyandembryology一、组织学的研究内容和意义二、组织学的研究方法，HE染色三、组织学的学习方法授课提纲组织学的研究内容借助显微镜研究人体器官组织的微细结构及其与功能的关系组织学研究内容：细胞cell细胞外基质Extracellularmatrix组织tissue上皮组织结缔组织肌肉组织神经组织器官和系统Organandsystem人体Humanbody组织：行使相近功能的细胞和细胞外基质组成的结构组织(tissue)形成：是在胚胎发育时期形成的。组成：由形态结构相似、生理功能相近的细胞群和细胞间质（细胞外基质）所组成。分类：四大基本组织：上皮组织、结缔组织、肌组织、神经组织组织学在医学中的地位组织学是一门医学基础骨干课程。尤其与解剖学、病理学、生理学、生物化学、免疫学均有密切的联系。近代生物学和基础医学的迅速发展，各学科的内容互相渗透、互相推动、紧密相关。组织学的常用技术方法

1普通光镜技术

分辨率为0.2μm，放大倍数为1500倍使用光学显微镜观察组织标本(切片和非切片)是最常用的组织学研究方法。切片法包括石蜡切片术和冰冻切片技术非切片法包括涂片、铺片、磨片等技术*固定(Fixation):为保存新鲜组织的微观结构，尽快将组织浸入到酒精，甲醛等固定剂中。1石蜡切片基本包括以下几个步骤：取材、固定、脱水、透明、包埋、切片、染色等。光学显微镜技术*脱水(Dehydration):用浓度逐渐升高的酒精(70~100%)将组织中的水完全置换出来。*透明(Clearing):用二甲苯完全置换出酒精。*浸蜡(Infiltration):在60~62◦C时，用液态石蜡完全置换出二甲苯。室温时石蜡凝固成固态，内含待切组织。*切片:用切片机将组织切成5~10μm厚的蜡片，然后将其放到温水上，待其完全展开后，裱到有粘附剂的载玻片上。*染色(Staining):染料可以将微观结构显示不同的颜色以便观察鉴别。在染色前，需要脱蜡入水，因为染料是水溶性的。

染色后可在显微镜下观察。常用的有普通染色及特殊染色两种。

最常用的染料是苏木精(Hematoxylin,H)和伊红(Eosin,E)苏木精是蓝紫色碱性染料，可以使细胞核等着色。被苏木精着色的结构本身为酸性，具有嗜碱性。

伊红是红色酸性染料。可以将大多数细胞的细胞质和细胞外基质染成红色。被伊红着色的结构本身为碱性，具有嗜酸性。在染色后，重新进入酒精和二甲苯，最后用中性树胶封片，以便长期保存。*切片:固定→梯度酒精→二甲苯→石蜡。*染色:石蜡→二甲苯→梯度酒精→水。*保存:水→梯度酒精→二甲苯→中性树胶。冷冻切片技术

(frozensectionmethod)这种方法制片迅速，细胞内酶活性保存较好，常用于酶组织化学染色和临床快速病理诊断。冷冻切片箱非切片法此外血细胞、分离细胞或脱落细胞可直接涂在玻片上（涂片）；疏松结缔组织可撕成薄片铺在玻片上（铺片）；牙和骨等坚硬组织可磨成薄片（磨片）；以上标本再经固定染色后显微镜下观察。2电子显微镜技术分辨率为0.1-0.2nm，放大几万倍到几十万倍，通常称超微结构、电镜结构或亚细胞结构根据分辨率、放大倍数以及功能等不同可分为两种：

透射电子显微镜（transmissionelectronmicroscope;TEM）

着重观察细胞内部结构尤其是细胞器

扫描电子显微镜（scanningelectronmicroscope;SEM）

着重于观察组织或细胞表面的立体结构透射电子显微镜

(transmissionelectronmicroscope)透射电镜观察的组织须切厚50～80nm的超薄切片，重金属盐染色超微结构被金属所染部位，在荧光屏上显得暗，图象较黑，称为电子密度高；反之则称为电子密度低透射电镜照片扫描电子显微镜技术

（scanningelectronmicroscope）扫描电子显微镜技术要观察的组织不需制成切片。固定后的标本，在其表面喷镀薄层碳和金属膜，发射电子束扫描，使金属膜发射电子，电子信号被探测器收集，在荧光屏上即可显示细胞或组织表面的立体结构，如细胞表面的突起、微绒毛、纤毛等。

原理:组织切片+化学试剂→原位有色沉淀产物

过碘酸-Schiff反应：简称PAS反应，是显示组织或细胞中有无多糖，蛋白多糖存在原理：多糖PA氧化醛Schiff试剂紫红色沉淀糖类3组织化学技术酶组织化学方法显示酶的活性，而不是酶本身一般来说，是将组织切片放入含有一定底物的溶液中孵育，形成初级反应产物，在与某种捕捉剂结合，形成有色反应产物利用抗原（antigen,Ag），抗体（antibody）特异结合的原理，用已知抗体检测未知抗原的一种方法。免疫组织化学细胞或组织培养技术

(cellortissueculture)将人体或动物的活细胞、活组织在体外培养，称细胞或组织培养(cellortissueculture)

。细胞培养形态与功能的结合形态结构总是与一定的机能密切相关。神经细胞有细长突起的结构特点，以传递神经冲动；红细胞含丰富的血红蛋白，则具有结合和携带氧的功能；腺细胞具有丰富的内质网和发达的高尔基复合体，能合成分泌物。总之，结构与功能有着密切的联系。组织学学习方法及注意事项断面和立体的关系在显微镜下观察的组织切片，所观察到的形态都是结构断面的形态。一个细胞由于所切的部位不同，在有的断面可见细胞核，在有的断面没有细胞核。又如身体内许多管状的器官，由于所切方位不同，往往呈完全不同的