微生物安全培训

微生物基础知识

及人员卫生—孙蓉1上海信谊百路达药业有限公司主要内容一、微生物基础知识二、GMP车间对微生物的要求三、人员卫生2上海信谊百路达药业有限公司微生物基本概念一切肉眼看不见的微小生物微生物包括：细菌、酵母菌和霉菌，以及其他单细胞生物（真核生物）。病毒并非真正的生物,但通常也将它们归为微生物大型真菌也属于微生物3上海信谊百路达药业有限公司微生物基本概念微生物大小比较4上海信谊百路达药业有限公司微生物基本概念微生物形态——细菌有多种不同的形态和形状：球菌、杆菌、弧菌等杆菌球菌弧菌5上海信谊百路达药业有限公司微生物形态丝光杆菌霉菌杆菌6上海信谊百路达药业有限公司微生物形态酵母链珠菌杆菌病毒7上海信谊百路达药业有限公司微生物划线接种干净培养基划线接种8上海信谊百路达药业有限公司微生物接种后培养接种后培养9上海信谊百路达药业有限公司微生物特性单个微生物细胞是无法用肉眼看到的，除非大量的微生物细胞聚集在一起（菌落）。在充足的生长条件下（营养、水、温度、pH值、有氧或无氧），微生物生长并繁殖。在固体培养基上形成菌落，或在液体培养基中出现浑浊。10上海信谊百路达药业有限公司菌落平板11上海信谊百路达药业有限公司细菌平板12上海信谊百路达药业有限公司微生物特性当每毫升液体中存在一百万个细菌时，肉眼才能看到出现浑浊！当一杯水中存在2亿个细菌时，才能被发现。面前这瓶矿泉水看到细菌时，已经有3.5个亿的细菌了13上海信谊百路达药业有限公司微生物生长环境微生物几乎无处不在：空气中，物体表面，水中以及动物的皮肤上......即使在恶劣的环境下微生物也能繁殖。细菌具有“极强生命力”，如：幽门螺杆菌（存活在胃酸中=pH0.9-1.5）延胡索酸火叶菌（存活在深海中，最高温度=113°C)肉毒梭菌（在厌氧条件下生存，可形成孢子）芽孢杆菌（可形成孢子，可在干燥、热、紫外线和消毒剂存在的条件下存活很长时间）14上海信谊百路达药业有限公司细菌的生长细菌是通过细胞分裂进行繁殖的（无性繁殖）在理想的生长条件下，大肠杆菌每20分钟就繁殖一倍，6小时40分钟后，一个细菌细胞翻了20倍，变成100万个细菌细胞。每个细菌都是潜在的危险！15上海信谊百路达药业有限公司酵母菌和霉菌的特性多数酵母菌是以单细胞形式存在的，霉菌是丝状真菌，以菌丝体形式存在。酵母菌霉菌16上海信谊百路达药业有限公司酵母菌和霉菌的特性真菌孢子能够在不利其生长的条件下（干燥、热、紫外线和消毒剂）存活很长时间，但它们不及细菌的内生孢子顽强。17上海信谊百路达药业有限公司酵母菌和霉菌的生殖裂殖酵母芽殖酵母带孢子霉菌酵母菌有性生殖18上海信谊百路达药业有限公司日常生活中的微生物19上海信谊百路达药业有限公司微生物引起的疾病20上海信谊百路达药业有限公司GMP车间的环境要求GMP—优良生产规范环境要求——对空气洁净度的要求，如：温度、湿度、静压差、空气流速、换气次数、尘埃粒子、沉降菌、浮游菌级别——30万级的、10万级的、万级的、百级的。21上海信谊百路达药业有限公司空气洁净度影响因素人员：80%的洁净室空气污染时来自人的皮肤碎屑、体液和油脂微生物：病毒和细菌颗粒：服装、皮肤和头发22上海信谊百路达药业有限公司GMP车间微生物环境要求监测项目技术标准100级1万级10万级30万级浮游菌数，个/m3≤5100500——沉降菌数，个/皿≤1≤3≤10≤1523上海信谊百路达药业有限公司传播污染的四大媒介空气：尘埃微粒水：滋生微生物表面：含水薄膜、吸附微粒人：最常见的、最不清洁、永不休止的污染源没有人的洁净室才能达到真正的洁净！24上海信谊百路达药业有限公司人体中典型微生物口腔：链球菌、乳酸菌、杆菌鼻腔和咽喉：大肠埃希菌、克雷伯氏菌、肠杆菌、类杆菌肠内：肠杆菌、类杆菌皮肤：葡萄球菌、微球菌、杆菌头皮：大量的致病菌：金黄色葡萄球菌（达到30％）、大肠埃希菌（达到20％）及葡萄球菌（10％）25上海信谊百路达药业有限公司人体微生物分布微生物数量：1.头皮1.5Mill./cm22.嘴1-100Mill./ml3.鼻-咽区（败液）1Mill.-10Mill./ml4.非裸露皮肤（后背）500-1000/cm²5.分泌区（腋窝）2.4Mill./cm²6.手100-6000/cm²7.指尖20-100/cm²8.脚100-1000/cm²9.胃1000-10000/g内含物10.小肠1000-1Mill./g内含物11.大肠100Mill.-10Bill./g内含物12.直肠100Bill./g内含物（=10-20%排泄物）26上海信谊百路达药业有限公司人体携带的微生物头发27上海信谊百路达药业有限公司人员发菌量

洁净室内当工作人员穿无菌服时:

静止时的发菌量为10～300个/(min·人)，躯体一般活动时的发菌量为150～1000个(min·人)，快步行走时的发菌量为900～2500个(min·人)；咳嗽一次的发菌量为70～700个(min·人)，喷嚏一次的发菌量为4000～60000个(min·人)；有口罩发菌量：无口罩发菌量为(1:7)～(1:14)

发菌量：发尘量为(1:500)～(1:1000)；

可知洁净室内穿无菌衣人员的静态发菌量一般不超过300个(min·人)，动态发菌量一般不超过1000个(min·人)28上海信谊百路达药业有限公司

咳嗽和打喷嚏会产生大量颗粒，其中含有大量的微生物。

…高速相机拍摄的打喷嚏的照片....29上海信谊百路达药业有限公司这是不允许的！30上海信谊百路达药业有限公司洁净室内人员对微生物的传播人员散播的微生物数量指尖20-100手数千个打喷嚏/咳嗽一万—十万吐痰一百万—一个亿流鼻涕一百万—一千万31上海信谊百路达药业有限公司药品生产中微生物风险致病菌会导致传染病在使用注射剂后，即使微生物是非致病的，也会导致败血病内毒素和热源会引起发烧药品中存在微生物会导致药品质量降低，如：缩短有效期药效不均一颜色变化/出现浑浊味道变化

气味变化32上海信谊百路达药业有限公司常见药物污染菌1、金黄色葡萄球菌：可引起局部感染，如疖、脓疡、创口感染，也可引起化脓、肺炎、败血症和骨髓炎等，食物或药物被葡萄菌污染后，可使食用者引起肠炎。

2、大肠杆菌：如胆道炎和尿道感染常与大肠杆菌有关。大肠杆菌是常见的药物制剂污染菌，由于常在粪便中存在，因而它的污染往往标志着粪便等污染（或卫生很差），污染后可使制剂变质。

33上海信谊百路达药业有限公司常见药物污染菌3、绿脓杆菌：绿脓杆菌为致病菌，在肠道中可引起肠炎，在创口上引起化脓性感染，侵入内部器官可引起中耳炎、泌尿道感染、肺炎以及败血症、脑膜炎等。绿脓杆菌侵犯眼部可致失明，绿脓杆菌是一种重要的制剂污染菌4、枯草杆菌：常污染制剂，侵入眼部可引起结膜炎5、酵母菌：可使糖分药液产生有机酸霉菌：可使食物以及中草药等霉坏，受这些菌污染的制剂均易酸败变质。34上海信谊百路达药业有限公司药品生产过程中如何防止微生物污染我们的产品选择30万级标准的净化车间生产用纯化水、注射用水等均应符合工艺要求，定期监测所有生产用原辅料、内包装材料均需进行卫生学检查，按内控标准检验合格后才可使用，从源头上防止微生物对药品的污染；仓库应定期清理，避免原辅料、内包装材料在存放和使用中受到污染35上海信谊百路达药业有限公司药品生产过程中如何防止微生物污染进入洁净厂房的人员和物料进行净化处理，分为人流通道和物流通道；生产车间的人员进出严格按规定执行，洁净服由专人定期清洗消毒，防止由于人员流动传播微生物，避免交叉污染生产过程中注意卫生清洁，生产结束后对生产区域按规定及时清场；严格按工艺要求对使用的设备、容器具进行清洁消毒36上海信谊百路达药业有限公司人员职责从事生产的人员，应根据操作内容穿适当的洁净服人员应具有良好的卫生习惯和健康习惯只有经授权的人员才能进入受控的区域和房间任何人一旦患有影响到药品质量的体表疾病或开放的外伤时，都应避免直接接触药物成分及药品应培训所有人员，一旦患有对药品质量有影响的疾病时，应及时向上级汇报37上海信谊百路达药业有限公司人员卫生生产区和质量控制区人员，应遵循《人员卫生规程》，包括健康、卫生及着装人员健康状况与药品质量相关，定期安排体检尽可能不让传染病患者从事药品生产38上海信谊百路达药业有限公司防止污染的措施对人员的日常培训严格按照相关规程着装和进入洁净室穿好工作服，收好领口和袖口，不脱落颗粒；戴好帽子，完全遮盖着头发；穿好工作鞋直接接触药品时，应戴手套39上海信谊百路达药业有限公司车间洁净服标准穿戴40上海信谊百路达药业有限公司在车间穿戴洁净服工作41上海信谊百路达药业有限公司接触药品应戴手套42上海信谊百路达药业有限公司防止污染的个人卫生戴口罩以盖着嘴和胡须定期清洗和灭菌防护服不留长指甲，不涂指甲油不化妆以防脱落颗粒不带首饰定期洗手和消毒洗完手注意干燥43上海信谊百路达药业有限公司防止污染的措施在生产区不吃东西、喝水、吸烟和嚼口香糖对于直接接触药品的人员，应定期体检动作应小心缓慢定期清洁和消毒设备44上海信谊百路达药业有限公司手的卫生在手消毒之前应先洗手，以去除会使消毒剂失活的有机物和蛋白质只能用醇类物质作为手消毒剂，75%的乙醇45上海信谊百路达药业有限公司洗手效果图46上海信谊百路达药业有限公司常用车间空气灭菌方法灭菌指杀死或除去所有微生物的繁殖体和芽胞，使之完全无菌1、臭氧：空气消毒2、甲醛：40%，结合高锰酸钾处理3、诺福：新一代的生态型灭菌、消毒、杀菌剂47上海信谊百路达药业有限公司常用化学消毒剂消毒剂名称消毒原理使用范围75%乙醇蛋白变性皮肤、环境表面新洁尔灭蛋白变性，细胞膜损伤皮肤、粘膜、拖布碘酒氧化，蛋白沉淀皮肤消毒双氧水氧化，蛋白沉淀物体表面、容器二氧化氯氧化，蛋白沉淀塑料、