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elisa双抗体夹心法实验报告摘要:本实验旨在探究Elisa双抗体夹心法的原理及应用,在酶标仪上测定目标物的浓度。通过反应曲线及标准曲线的绘制,可得出实验结果,并进行数据处理。实验结果表明,本实验操作方法准确可靠,能够测定目标物的浓度。一、实验目的:通过Elisa双抗体夹心法,测定目标物的浓度。二、实验原理:Elisa双抗体夹心法是一种分析化学方法,通过特异性抗体-抗原的相互作用,利用酶作为信号发生器来检测特定物质。其基本原理是,在抗体与抗原的特异性结合后,再加入另一种抗体嵌合的酶标记,形成二次反应,使其测定量呈现出较高的灵敏度,测定出被检物质的浓度。三、实验步骤:1.预处理:将试管装满稀释液,用超声波浴清洗10分钟后再用去离子水清洗干净。2.打标准品:标准品与样品吸附于多孔板内壁,加入双抗体(McAb和PcAb)的混合物使其与标样可以特异性结合,洗液清洗干净试管,最后加入底物染色。3.试题评估:在样品加入双抗体(McAb和PcAb)的混合物中,加入研磨细胞,等待1小时后,离心去沉淀后取上清液。4.打样品:将标记物加入到样品中,并加入双抗(McAb和PcAb)混合物,等待1-2小时后,洗涤清洗干净,加入底物染色再测定。四、实验结果及分析:采用反应曲线的方法,得到的目标物浓度与OD值图示:(图片)根据标准曲线对目标物浓度进行计算,数据如下表所示:(表格)五、实验结论:本实验采用Elisa双抗体夹心法测定目标物浓度,通过反应曲线及标准曲线的绘制,得到实验结果。本实验操作准确可靠,能够测定目标物的浓度。六、参考文献:1.张清山等.临床检验技术与质量控制.北京:人民卫生出版社,2008.2.陈小平等.医学检验技术.北京:人民卫生出版社,2005.
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