扫描标本制备课件

扫描标本制备课件目录contents扫描标本制备概述扫描标本制备流程扫描标本制备技术要点扫描标本制备问题与解决方案扫描标本制备案例分析01扫描标本制备概述定义：扫描标本制备是指通过一定的方法将生物组织或细胞等样本进行固定、脱水、染色等处理，最终获得可用于电子显微镜观察的超薄切片或粉末样品的过程。特点：扫描标本制备具有以下特点适用于各种生物组织，如动物、植物、微生物等；可以观察细胞内部结构，如细胞器、细胞膜、细胞核等；可以观察细胞表面结构，如细胞膜、细胞壁、细胞外基质等；可以用于研究细胞超微结构及功能。定义与特点有助于疾病的诊断与治疗，通过对病变组织的研究，寻找疾病的治疗方法；有助于新药研发，通过对药物作用机制的研究，开发新的药物或治疗方法。有助于研究细胞超微结构及功能，了解生命活动的基本过程；扫描标本制备的重要性扫描标本制备技术自20世纪50年代诞生以来，经历了多个阶段的发展，逐渐形成了较为完善的制备技术体系。历史随着科学技术的发展，扫描标本制备技术也不断进步，如新材料、新方法、新技术等不断涌现，使得制备技术更加高效、准确、可靠。同时，随着电子显微镜技术的不断发展，对扫描标本制备的要求也越来越高，促进了制备技术的不断改进和完善。发展扫描标本制备的历史与发展02扫描标本制备流程选择新鲜、健康的组织或器官，避免使用已经腐败或病变的组织。新鲜组织取材时应根据所需观察的部位和实验要求，选择适当大小的组织块。适当大小将取下的组织块立即放入固定的溶液中，以防止组织腐败和保持组织结构。固定液取材将组织块中的多余水分去除，以避免组织水肿和影响后续处理。去除水分使用渗透性脱水剂，如乙醇、丙酮等，逐渐增加脱水剂的浓度，以避免组织内部和外部的浓度差过大而导致组织皱缩。脱水剂脱水处理使用渗透剂，如二甲苯、石蜡等，将脱水后的组织块进行渗透处理，以使包埋剂更好地渗透到组织中。渗透处理应在适当的温度下进行，以促进渗透剂的渗透效果。渗透处理温度渗透剂选择适当的包埋剂，如石蜡、树脂等，将渗透处理后的组织块包裹起来。包埋剂将包埋剂加热至适当温度，然后缓慢冷却，以使包埋剂凝固。包埋过程包埋处理切片刀使用专业的切片刀将凝固的包埋剂切成薄片。切片厚度根据需要观察的部位和实验要求，控制切片的厚度。切片处理染色剂选择适当的染色剂，如苏木精、伊红等，对切片进行染色处理。染色过程将染色剂与切片接触一定时间，使染色剂充分渗透到切片中，然后用水冲洗掉多余的染色剂。染色处理显微镜将染色后的切片放在显微镜下观察，观察组织的结构和形态。记录记录观察到的结果和数据，以便后续分析和处理。观察与记录03扫描标本制备技术要点使用固定剂如甲醛、乙醇等，迅速杀死细胞并抑制组织自溶。固定脱水透明使用一系列不同浓度的乙醇和丙酮进行脱水，去除组织中的水分。使用苯酚、二甲苯等透明剂，使组织更易于观察。030201脱水处理要点根据组织类型和大小，选择合适的渗透剂如水、乙醇、丙酮等。渗透剂选择根据组织硬度、大小等因素，控制渗透时间以达到充分渗透。渗透时间使用清洗剂清除组织表面附着的渗透剂。清洗渗透处理要点包埋过程将已固定的组织放入模具中，加入包埋剂进行包埋。包埋剂选择根据需要选择合适的包埋剂，如石蜡、树脂等。冷却与修整待包埋剂冷却凝固后，取出组织标本并进行修整。包埋处理要点根据组织类型和观察目的，选择合适的切片厚度。切片厚度保证切片表面平整，无皱褶、裂纹等缺陷。切片平整度根据观察目的选择合适的染色方法，如HE染色、免疫组化染色等。切片染色切片处理要点染色过程按照染色剂说明书进行染色操作，控制染色时间和温度。复染与脱水根据需要可以进行复染和脱水处理，以提高染色效果。染色剂选择根据观察目的和组织类型选择合适的染色剂。染色处理要点观察工具使用显微镜或扫描电子显微镜进行观察。记录方式可以采用拍照、绘图等方式记录观察结果。结果分析对观察到的结果进行分析，解析组织结构特点与病变特征。观察与记录要点04扫描标本制备问题与解决方案VS脱水不彻底会导致组织样品在扫描电镜下显示出过高的水分，影响观察效果。详细描述脱水不彻底的原因可能是脱水剂使用不当或脱水程序不规范。解决这个问题的方法是优化脱水程序，选择适当的脱水剂，并确保组织样品充分脱水。总结词脱水不彻底渗透不均匀会导致组织样品在扫描电镜下显示出局部的细胞膨胀或收缩，影响观察效果。渗透不均匀的原因可能是渗透剂渗透压力不足或渗透时间不够。解决这个问题的方法是增加渗透剂的渗透压力和渗透时间，确保组织样品充分渗透。总结词详细描述渗透不均匀总结词切片厚度不均会导致扫描电镜下观察到的组织结构不连续，影响观察效果。详细描述切片厚度不均的原因可能是切片刀不锋利或切片时力度不均匀。解决这个问题的方法是定期磨刀或更换新的刀片，同时注意控制切片的力度和速度，保证切片的连续性和稳定性。切片厚度不均总结词染色不稳定会导致扫描电镜下观察到的组织颜色不鲜艳，影响观察效果。要点一要点二详细描述染色不稳定的原因可能是染色剂质量不佳或染色程序不当。解决这个问题的方法是选择高质量的染色剂，并严格按照染色程序进行染色操作。染色不稳定总结词观察效果不佳是指扫描电镜下观察到的组织结构模糊不清或无法辨认。详细描述观察效果不佳的原因可能是扫描电镜的分辨率不足或操作不当。解决这个问题的方法是提高扫描电镜的分辨率，同时注意正确的操作方法，避免因操作不当导致观察效果不佳。观察效果不佳05扫描标本制备案例分析染色用苏木精-伊红染色法对切片进行染色，以观察细胞和组织的形态。切片使用轮转式或冰冻切片机制备连续切片。包埋将组织嵌入石蜡或树脂中，以便于切片的制作。固定使用戊二醛对动物组织进行固定，目的是保持组织细胞的原貌和结构。脱水用梯度酒精对组织进行脱水，以去除组织中的水分，为切片制备创造条件。动物组织切片制备案例使用FAA固定液对植物组织进行固定，以保持组织细胞的原貌和结构。固定用苯酚品红染色法对切片进行染色，以观察细胞和组织的形态。染色用梯度酒精对组织进行脱水，去除其中的水分。脱水将组织嵌入石蜡中，以便于切片的制作。包埋使用轮转式或冰冻切片机制备连续切片。切片0201030405植物组织切片制备案例包埋将组织嵌入树脂中，以便于切片的制作。固定使用2.5%戊二醛固定液对微生物组织进行固定，目的是保持细胞形态和结构。脱水用梯度酒精对组织进行脱水，去除其中的水分。切片使用超薄切片机制备连续切片。染色用锇酸染色法对切片进行染色，以观察细胞和组织的形态。微生物组织切片制备案例脱水用梯度酒精对样品进行脱水，以去除其中的水分。