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文档简介
1实验二细胞中多糖的定性、定位与(半)定量
过碘酸雪夫反应(PAS)显示糖元和其它多糖物质2一、实验原理:过碘酸(periodicacid)是一种氧化剂,它可把多糖的葡萄糖分子的两个相邻的带有羟基的C-C-键打开,而生成醛基再与染色剂结合。Schiff试剂中的碱性复红(fuchsinbasic)是一种混合物,经亚硫酸和二氧化硫的作用,醌式结构的双键被破坏南而消失,已成为无色复红,再经过氧化后的醛基与无色复红液进行结合呈紫红色。
3二、试剂配制1.过碘酸酒精溶液配法过碘酸(HIO4·2H2O)0.4克95%酒精35毫升M/5醋酸钠(27.2克毫升H2O)5毫升蒸馏水或用0.5-0.1%过磺酸水溶液10毫升上液保存于冰箱,瓶加黑纸,溶液显黄色即失效。2.Schiff氏酒精溶液配法(配后略带红色无妨)Schiff氏原液11.5毫升1N盐酸0.5毫升纯酒精23.0毫升或用Schiff氏原液,配法与Feulgen反应所用相同。3.采取唾液的方法刷牙、喇口之后,用1%的醋酸在舌尖部稍稍接触,唾液开始分泌之后,用烧杯盛接之,此唾液经过过滤后即可应用。4.亚硫酸水(与Feulgen反应所用相同)。4三、操作方法1.把马铃薯块茎用刀片徒手切成薄片。2浸入高碘酸溶液5-15min(EP管)3移入70%乙醇中侵入片刻(10秒)(EP管)。4Shiff试剂染色15min(EP管).5亚硫酸溶液洗3次,每次1分钟(EP管)6蒸馏水洗片刻(EP管)7装片镜检三、结果糖元呈紫红颗粒。经过唾液(37度)或淀粉酶消化者则无糖元的紫红颗粒。染糖元的对照片须先用唾液配的0.1-1%淀粉酶消化30-60分钟后再入染色液。(对照略)5碘酒染色法用碘酒染色5分钟,漂洗后置于显微镜下观察。6四、作业1实验的原理是什
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