计算机基础word考试试题

Word操作题

1、将全文中的所有”《经济学家》”设为粗体，蓝色。

2、将正文各段的行间距设置为1.5倍行距。

3、在正文的最后一段的“在很多大企业中，现在……”这一句前插入“另外

个人电脑时代行将结束？

最新一期英国《经济学家》周刊裁文预测，随着手持电脑、电视机顶置盒、智能移动电

话、网络电脑等新一代操作简易、可靠性高的计算装置的迅速兴起，在未来五年中，个人电

脑在计算机产'也中的比重将不断下降，计算机发展史上个人电脑占主导地位的时代行将结

束。

该杂志引用国际数据公司最近发表的一份预测报告称，虽然目前新一代计算装置的销量

与个人电脑相比还微不足道，但其销售速度在今后几年内将迅猛增长，在2002年左右其销

量就会与个人电脑基本持平，此后还将进一步上升％以此为转折点，个人电脑的主导时代将

走向衰落。

《经济学家》分析认为，个人电脑统治地位的岌岌可危与个人电脑的发展现状有很大关

系。对一般并不具备多少电脑知识的个人用户来说，现在的个人电脑操作显得过于复杂；而

对很多企业用户来说，个人电脑单•的功能也无法满足迅速发展的网络电子商务对计算功能

专门化、细分化的要求。在很多大企业中，现在常常采用个人电脑叮功能强大的中央电脑相

连的工作模式，在很多时候也造成不便和混乱。

WORD操作题

i.将第二段中，从“然而…”到段尾的文字移到文章末尾，并另起一段。

2.为本文设置页眉，页眉为“知识经济”，居中显示。

3.为第三段设置蓝色的底纹的三维边框。

现在对一个公司来说，仅仅制造产品已经远远不够了。最成功的企业还生产其它东西，比

如说品牌，美学设计,知识产权或电子数据仓库。今天，这种“无重量的经济”已经在我们的生活

中真正开始发挥了作用。

我们已经看到，我们身边的经济正在发生艰难的结构性变化。毫无疑问，经济价值正从制

造业、建筑业和金属工业转移向其它方面。然而，情况也许会更加具有隐伏的危机性。在以

知识为基础的经济中，创造知识的过程同时也是创造价值的过程。它的含义是,在新出现的经

济秩序中，当一个人不富有创造性，不具备创造美妙新奇的知识的能力时，他的地位就会受到

威胁。

大多数成功的企业并不是制造一个产品所需要的全部，也不是像纯粹的工业企业那样制

造有形的物品。相反,它们创造出其它东西，这些东西也许包括计算机软件、品牌和美学设计、

信息技术、知识产权、新的传媒或电子数据仓库等。

它们既不像物品那样可被实际触摸，也没有任何重量。同时,它们也不是传统意义匕的知

识。把这种循环性的发展视为一种无重量的经济会更恰当一些。

有时候，它被称为新经济，但每•年里大多数引人注目的东西都是新的。所以，新经济并不

是很适用的标签。那么为何不把这种无重量的经济称之为以知识为基础的经济呢？

以知识为基础的经济是个精英主义的让人有点惊慌失措的概念，它意味着那些科学狂人

和书呆子们要掌握经济了。不过，这种事是不会发生的。

WORD操作题

i.将文中的圆形项目符号换成实心正方形的项目符号。

2.为本文添加标题“PC机的2000年问题”，字体为绿色小三隶书，居中显示。

3.为第一段设置25%的绿色底纹。

解决PC机2000年问题的麻烦在于，你很难从应用软件的源代码中找到问题所在，它与许

多遗留的应用系统不•样。台式机的2000年问题涉及到台式机的整个软硬件体系。不过,

如果硬件和软件是标准化的，你又备有一些系统和网络管理工具,还能得到内行用户的理解,

那问题就会好办得多，要少走很多弯路。

解决台式机2000年问题要经历4个阶段：

•确定问题所在的范围；

•明确是什么问题；

•对其进行测试；

•实施解决方案，重新集成。

WORD操作题

i.将第一段中的“色彩”两字的字体设置为红色，并加上七彩霓虹的动态效果。

2.将文中第三段的行间距设置为3.4倍行距。

3.将文中第二段的字间距设置为加宽1.2磅

智能网络传信息

一座座大厦建筑风格各不相同，色彩也炯异，而外表的不同,却掩盖不住其共有的现代金

融大厦的特质，即智能化。

80年代初建设的一些大厦，档次高主要表现在装饰设计上,尽管其外表建筑风格在十年

后，也许还不嫌过时,而大厦内部的低智能化已不适应作为信息中心和枢纽的需要。现代化的

金融大厦已经不再是传统意义上的办公场所。电子化、网络化、信息化的发展趋势要求金融

机构在新建办公大楼的同时，必须要建设具有国际先进水平的计算机网络，建立完善的智

能化综合信息系统。

北京金融街新建的大厦，每座都是符和智能大厦5A标准的，即通信自动化(Communi

cationAutomation-CA);办公自动化(OfficeAutomation-OA);建筑管理自动化(Building

ManagementAutomation-BA);消防自动化(FireAutomation-FA);安全保卫自动化(Safety

Automation-SA)o突出的表现是通讯能力大为增强。在旧有的办公楼中,通常一座楼只有几百

门直线电话,而通过综合布线系统的实施，新大厦可容纳直线电话近万门。计算机点位和电话

接线点以网格接线方式布置在每个房间。据悉，建设银行还将在新建总行大楼与南三环的计

算中心之间铺设光缆，实现内部光纤通讯。

北京金融街通讯更大的便利条件是国家电信指挥中心将建于其中,位置在现在的通泰大

厦(交通银行北京分行)与投资广场之间。据了解，指挥中心建成后，将可能把全国通讯枢纽移

将过来，那时金融街可以说占尽了通讯便利的优势。

Word操作题

1、将标题字体设为“黑体”,大小为“四号”。

2、将“北京翰林汇科技有限公司”的字形设为斜体，字体为“黑体”。

3、将第一段的字符间距设置为加宽0.5磅。

翰林汇推出写作之星

北京翰林汇科技有限公司将隆重推出计算机辅助写作系统——写作之星（WDS98）。该

软件在文字处理基础上针对实用写作需求进行了全面、深入、多方位的功能扩展。旨在充分

利用电脑的优势，帮助人们提高写作效率和写作水平，演练各类文体写作方法，全面掌握或

按需选学各类写作知识，强化写作技能与技巧，减轻写作过程中解字查词，改错润色，引经

据典，寻章摘句等方面的脑力劳动强度。

Word操作题

1、给全文加上标题“数码相机新应用”。

2、将全文的字体设为“黑体”，大小为“四号”字，颜色为“绿色”。

3、将页的左边距设为3厘米，右边距设为3.5厘米。

5月14EI,由江苏省公安厅交管局科研所和南京三宝科技实业有限公司联合研制的

JSDJ-981型数码电子警察成功通过评审，赢得了专家的一致好评，从而使数码相机再一次

展示了它独特的魅力。JSDJ-981型数码电子警察系统的核心部件采用KODAKDC120百万

像素数码相机，并根据实际需要，对某些功能进行了改进，使其成为JSDJ-981电子警察拍

摄违章照片的专用相机。

Word操作题

1、将正文第一段中的"10CM2"改为"10平方米"。

2、在标题上加下划线，居中，并将字形设为粗体。

3、给第一段、第二段加5%的底纹。

广州出现“无人银行”

广州市第一家“无人银行”近日在广州市海珠区江南大道出现。这家无人银行由广州市

工商银行开设。10CM2的服务空间里并排放着触模式自动柜员机，客户银行行卡可以快速

办理取款、存款、查询帐户余额、修改密码、自动转帐等业务。若丢失了存折、信用卡还可

办理口头挂失。为保障客户安全，同时避免业务纠纷，电子摄象机时刻监控这里面发生的情

况。

“无人银行”，或称“自助银行”是90年代国外金融界推崇的银行发展趋势。“无人银

行”近期在我国上海、广州等为数不多的儿个大城市面世，今后必将会越开越多。

Word操作题

1、将标题居中,并将其字体大小设置为三号，颜色设为蓝色。

2、将全文的“IP地址”全部加下划线，字形设为“粗体”。

3、将最后一段删除。

域名的基本情况

在Internet上，计算机被称为主机，为了便于接收与传递信息，每台主机需要自己的地

址，这一地址应是唯一的（即IP地址），每一个IP地址有四组数字组成，中间以实点（dot）

等分隔。

IP地址数字很长，只便于主机的理解与运行，不便于人们记忆，特别是非专业人士。于

是，为方便起见，在一般情况下，人们使用''域名"加以代替，即用英文字母、阿拉伯数字、

连接符等，依照一定的命名规则构成主机的全球性的唯一的标识。

因此，象街道的牌号•样，域名只强调主机所在的位置，而不强调识别主机所承载的信

息，就象不必限制某一街道门牌要有什么样的房子一样。这与商标法的对应原则（商标用于

特定的商品）明显不同。

原则上说对域名的构成要件无明确规定，只要是他人未注册的域名都可以申请注册。

Word操作题

1、在第一段的“Internet”后面插入“国际电脑网络”。

2、将第二、第三段合并为一段。

3、将正文各段的字体大小设置为四号。

网站是企业的宣传窗口

儿乎所有的企业都意识到Internet是宣传企业的一个好窗口，在对已经建站的10家企

业的电话采访中，大家都谈到了当前企业建设网站的主要目的是起到企业的形象宣传作用。

既然是宣传，网站的设计应该是十分关键的，它•方面代表了一个企'也的文化，也代表

了企业的形象：另一方面它应该给浏览网页的人带来一种美的享受。

海尔集团的网站设计不能算是完美，但是它的网站流露出来的•种企业文化给人留下了

很深的印象。在海尔集团的网页中，除了有企业的文化、产品和组织机构介绍以外，还有电

子贺卡、指南针等服务性栏目，虽然这两个栏目办得还很简单，但是企业“为您着想”的宗

旨无形之间流露出来，让人们感到商业之外的温馨。

Word操作题

1、将标题中的“Internet”的改为“国际电脑网络”。

2、将正文各段落的段后间距设置为6磅。

3、将最后一段的首行缩进设为0.9厘米。

Internet创造商机

通常，Internet为商家提供了以下三种显著的商业机会。第一、企业通过Internet可直接

与顾客（也可以与重要的供货商、销售商）建立联系，简捷、方便地完成交易或传递信息，

并在商业活动“价值链”中超越一些不必要的中间环节：第二、企业可Internet为新客户提

供新产品及各种服务；第三、企业可利用Internet成为特定行'Ik或部门电子销售渠道的“霸

主”，主导顾客消费理念，指定新的商业规则。

根据以上三点，决策者们可权衡Internet商务投资过程中存在的风险和可能带来的收益,

进而从本企业实际出发，制定一个稳妥的Internet商务战略。

Word操作题

1、将全文中的“WebTV”的字形设为斜体，颜色为“绿色”。

2、将第一段的段前间距设置为18磅。

3、将第一段字体设置为“宋体”，字体大小设置为“四号”。

网络电视

网络电视的承诺十分简单，网络冲浪不再是电脑用户的特权，您现在可以用类似有线电

视盒的电视预置设备访问万维网。这个盒子（或是游戏机，如世嘉土星或苹果Pippin）内部

藏有调制解调器及所有必需的网络浏览软件。将这个盒子连接在电视及电话线上，您就能安

坐在沙发中浏览网页了。这种有如家用电器般的轻松使用与•设置是WebTV的魅力之所在。

用户无需安装软件，也不用担心兼容性或花时间去学习使用程序，所有的工作都将由WebTV

自动完成。如果您会使用电视遥控器或游戏机手柄，您就能操作WebTV。并且，用WebTV

访问网络所需的设备投资只是家用电脑的一小部分。•部WebTV设备的价格通常只是PC

的五分之一至三分之一。

WORD操作题

i.设置页眉，页眉为“缩略时代”。

2.将文中第二段的行间距设置为3.1倍行距。

3.将第二段中的“信息中心主任”的字体设置为红色、力口粗、斜体、加下划线

的宋体，并具有“亦真亦幻”的动态效果。

有一位评论家想为今天的时代寻找•个印象式的命名，终于想到了两个字，叫做“缩略”一

一"缩”者，把原有的长度、时间、空间压缩;"略”者,省略、简化之意，故称我们的时代是"缩略

时代”。

就中国信息技术应用而言，信息技术在企业中的应用尚处于"战术性”阶段，进入到"战略

性”阶段的企业极少，因此中国企业只有"信息中心主任”而没有货真价实的CIO并不奇怪，中

国企业的“一把手"即CEO不能正确认识信息技术投资的价值，不肯赋予CIO以CIO之职之权

之责亦顺理成章。但这不能成为CIO"可以缓行”的理由。"Global化”的大前提下，我们还经得

起多久的落后？

Word操作题

1、将全文中的“Internet”的字形设为斜体，颜色为“绿色”。

2、将全文的行距设为“1.5倍行距”，首行缩进设“0.75厘米”。

3、将最后一段的首行缩进设为0.9厘米。

Internet创造商机

通常，Internet为商家提供了以下三种显著的商业机会。第一、企业通过Internet可直接

与顾客（也可以与重要的供货商、销售商）建立联系，简捷、方便地完成交易或传递信息，

并在商业活动“价值链”中超越一些不必要的中间环节：第二、企业可Internet为新客户提

供新产品及各种服务；第三、企业可利用Internet成为特定行'也或部门电子销售渠道的“霸

主”，主导顾客消费理念，指定新的商业规则。

根据以上三点，决策者们可权衡Internet商务投资过程中存在的风险和可能带来的收益,

进而从本企业实际出发，制定一个稳妥的Internet商务战略。

Word操作题

1、将全文中的“CIH病毒”的字形设为斜体，颜色为“绿色”。

2、将第一段中，把从“据悉，”开始的文字另起一段，并将该段的首行缩进设

“0.75厘米”。

3、将第一段文字加“20%”的底纹。

CIH病毒简介

CIH病毒传播的主要途径是Internet和电子邮件，当然随着时间的推移，它也会通过软

盘或光盘的交流传播。据悉，权威病毒搜集网目前报道的CIH病毒，“原体”加“变种”一

共有五种之多，相互之间主要区别在于“原体”会使受感染文件增长，但不具破坏力；而“变

种”不但使受感染的文件增长，同时还有很强的破坏性，特别是有-一种“变种”，每月26

日都会发作。

CIH病毒只感染Windows95/98操作系统，从目前分析来看，它对DOS操作系统似乎

还没有什么影响，所以，对于仅使用DOS的用户来说，这种病毒似乎并没有什么影响，但

如果是Windov895/98用户就要特别注意了。正是因为CIH病毒独特地使用了VxD技术,

使得这种病毒在Windows环境下传播的实时性和隐蔽性都特别强，使用一般反病毒软件很

难发现这种病毒在系统中的传播。

CIH病毒“变种”在每年4月26日（有一种变种是每月26日）都会发作。发作时硬盘

一直转个不停，所有数据都被破坏，硬盘分区信息也将丢失。CIH病毒发作后，就只有对

硬盘进行重新分区了。

Word操作题

1、将全文中的所有“WebTV”改为“网络电视”。

2、给标题加下划线，并将字体大小设为三号。

3、把括号中的“或是游戏机，如世嘉土星或苹果Pippin”颜色变成蓝色。

网络电视

网络电视的承诺十分简单，网络冲浪不再是电脑用户的特权，您现在可以用类似有线电

视盒的电视预置设备访问万维网。这个盒子（或是游戏机，如世嘉土星或苹果Pippin）内部

藏有调制解调器及所有必需的网络浏览软件。将这个盒子连接在电视及电话线匕您就能安

坐在沙发中浏览网页了。这种有如家用电器般的轻松使用与设置是WebTV的魅力之所在。

用户无需安装软件，也不用担心兼容性或花时间去学习使用程序，所有的工作都将由WebTV

自动完成。如果您会使用电视遥控器或游戏机手柄，您就能操作WebTV。并且，用WebTV

访问网络所需的设备投资只是家用电脑的一小部分。•部WebTV设备的价格通常只是PC

的五分之一至三分之一。

Word操作题

1、将正文第二段的字符间距设置为加宽0.5磅。

2、给正文第二段加10%的底纹。

3、在“Internet"后插入“（国际电脑网络）注：括号为全角符号

域名的基本情况

在Internet上，计算机被称为主机，为了便于接收与传递信息，每台主机需要自己的地

址，这•地址应是唯一的（即IP地址），每一个IP地址有四组数字组成，中间以实点（dot）

等分隔。

IP数字很长，只便于主机的理解与运行，不便于人们记忆，特别是非专业人士。于是，

为方便起见，在一般情况下，人们使用“域名”加以代替，即用英文字母、阿拉伯数字、连

接符等，依照一定的命名规则构成主机的全球性的唯的标识。

因此，象街道的牌号一样，域名只强调主机所在的位置，而不强调识别主机所承载的信

息，就象不必限制某街道门牌要有什么样的房子一样。这与商标法的对应原则（商标用于

特定的商品）明显不同。

原则上说对域名的构成要件无明确规定，只要是他人未注册的域名都可以申请注册。

WORD操作题

i.为本文设置页脚，页脚为“知识管理”，居中显示。

2.将文中第二段第一个“福特汽车公司”六字设置“乌龙绞柱”的动态效果。

3.将文中第三段的行间距设置为3.2磅。

有一家超市连锁店发现啤酒和尿布之间的某钟关联关系，使得两种不同类型的产品的销

售额同时得到了增加;另一家化学制造厂因向其一线销售队伍开放了公司的知识库，从而提高

了它的客户服务水平，并缩短了销售周期。知识管理在今天企业的运营中已经开始发挥出越

来越举足轻重的作用，以上两个案例只不过是知识管理在企、也经营中的小小的应用。

更为效果显著的一个例子是福特汽车公司。一直将知识管理看作为是"智力资本杠杆"

的福特汽车公司，于1996年到1997年间实现了超过3亿美元的费用缩减，而其中的2.41亿美

元可直接归功于其所采用的一套知识管理技术——最优经验答复系统。更令人吃惊的是，这

样巨大数H的费用节省来自于由内部网络/Web开发者和两位经营专家在10天内开发出的一

套系统，而其回报率却高达百分之几千！

那么,能够发挥如此功效的"知识管理"究竟是什么哪？简单地说，知识管理就是对个

企业集体的知识与技能的捕获——而不论这些知识和技能是存在于数据库中、被印刷于纸上

亦或是存在于人们的脑海里——然后将这些知识与技能分布到能够帮助企业实现最大产出

的任何地方的过程。知识管理的目标就是力图能够将最恰当的知识在最恰当的时间传递给最

恰当的人以便使他们能够作出最好的决策。

WORD操作题

i.为第二段添加“阴影”的蓝色边框，边框的宽度为1磅。

2.将页边距设置为：左边距为3厘米，右边距为3.5厘米。

3.将文中的第一段中的字体设置为红色，并将段落进行悬挂缩进，缩进量为1

磅。

中国公众多媒体通信网（169网）的建设，将信息高速公路修到了广大用户身边，也为社会

服务系统的建设、个人生活的改善、企业管理效率的提高提供了完整、快捷、简便易用的解

决方案，切切实实地把新的生活送到了用户面前。

中国公众多媒体通信网是改善社会现有公众服务体系、提高政府职能部门服务效率的•

种新的有效手段。随着多媒体通信的推广，现有社会各部门的运行机制将会改变。中国公众

多媒体通信网将社会各种服务行业的信息和服务搬到网上，把面对面的服务改为面向网络，把

服务送到用户身边。用户在自己的计算机上，随时都能得到过去在各种营业厅才能得到的服

务,而且更周到、更快捷。

中国公众多媒体通信网提供远程医疗、电子银行、远程教学、电视会议、网上展览会、

展销会、招商洽谈会、实时交通信息、网上订票、预订饭店、网上图书馆、网上博物馆、网

上书店、电子黄页、各种费用查询及支付、人才中介、电子报税、工商信息、旅客住宿报备

等各种服务。我们可以预期，当社会的多数公众服务系统都实现了网络化的时候，社会的运行

效率和运作水平将大大提高，公民的素质也会随着对社会的适应而提高,整个社会就在中国公

众多媒体通信网的推动下不断进步。

实时荧光定量PCR(real-timeQ-PCR)的研究进展及其应用

作者：未知来源：本站原创时间：2006-9-2

实验仪器大全实验试剂大全

多聚集链反应(polymerasechainreaction,PCR)技术发明至今已近20年了，在这期间技术得到了不断的发展，近年来出现的实时荧光

定量PCR(real-timequantitativePCR)技术实现了PCR从定性到定量的飞跃，它以其特异性强、灵敏度高、币：复性好、定量准确、速

度快、全封闭反应等优点成为了分子生物学研究中的重要工具，本文就此技术及其应用做一综述。

1实时荧光定用PCR技术的方法学

1.1原理所谓real-timeQ-PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程，最后通过标

准曲线对未知模板进行定量分析的方法。在real-time技术的发展过程中，两个重要的发现起着关键的作用：(1)在90年代早期,TaqDNA

多聚幅的5'核酸外切肉活性的发现，它能降解特异性荧光记探针，因此使得间接的检测PCR产物成为可能。(2)此后荧光双标记探针

的运用使在•密闭的反应管中能实时地监测反应全过程。这两个发现的结合以及相应的仪器和试剂的商品化发展导致real-timeQ-PCR

方法在研究工作中的运用。

PCR反应过程中产生的DNA拷贝数是呈指数方式增加的,随着反应循环数的增加，最终PCR反应不再以指数方式生成模板，从而进

入平台期.在传统的PCR中，常用凝胶电泳分离并用荧光染色来检测PCR反应的最终扩增产物，因此用此终点法对PCR产物定量存

在不可靠之处。在real-timeQ-PCR中，对整个PCR反应扩增过程进行了实时的监测和连续地分析扩增相关的荧光信号,随着反应时间

的进行，监测到的荧光信号的变化可以绘制成一条曲线。在PCR反应早期，产生荧光的水平不能与背景明显地区别，而后荧光的产生

进入指数期、线性期和最终的平台期，因此可以在PCR反应处于指数期的某一点上来检测PCR产物的量，并且由此来推断模板最初的

含量。为了便于对所检测样本进行比较，在real-timeQ-PCR反应的指数期，首先需设定•定荧光信号的域值，一般这个域值(threshold)

是以PCR反应的前15个循环的荧光信号作为荧光本底信号(baseline),荧光域值的缺省设置是3〜15个循环的荧光信号的标准偏差

的10倍。如果检测到荧光信号超过域位被认为是真正的信号，它可用于定义样本的域值循环数(Ct).Ct值的含义是：每个反应管内

的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数.研究表明，每个模板的Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系，起始拷贝数越

多，Ct值越小。利用已知起始拷贝数的标潴品可作出标准曲线，因此只要获得未知样品的Ct值，即可从标准曲线上计算出该样品的起

始拷贝数.

1.2荧光化学目前real-timeQ-PCR所使用的荧光化学方法生要有五种，分别是：DNA结合染色，水解探针，分子信标，荧光标记引物，

杂交探针.它们又可分为扩增序列特异和非特异的检测两大类。

扩增序列非特异性检测方法的基础是DNA结合的荧光分r,如SYBRgreen1等荧光染料。Real-timeQ-PCR发展早期就是运用这种

最简单的方法，在PCR反应体系中，加入过量SYBRgreen1荧光染料•，SYBRgreen1荧光染料特异性地掺入DNA双链后，发射荧光

信号。荧光染料的优势在于它能监测任何dsDNA序列的扩增，不需要探针的设计，使检测方法变得简便，同时也降低了检测的成本。

然而正是由于荧光染料能和任何dsDNA结合，因此它也能与非特异的dsDNA(如引物二聚体)结合，使实验容易产生假阳性信号。引物

二聚体的问题目前可以用带有熔解曲线(meltingcurve)分析的软件加以解决。

扩增序列特异性检测方法是在PCR反应中利用标记荧光染料的基因特异真核背酸探针来检测产物，它又可分为直接法和间接法。间接

的方法就是利用水解探针的策略。目前在real-timeQ-PCR中最广泛使用的TaqMan系统就是运用了这个原理.PCR扩增时在加入一对

弓I物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核甘酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团，此时5'端荧光基

团吸收能量后将能成转移给临近的&端荧光淬灭基团(发生荧光共振能量转移，FRET),因此探针完整时，检测不到该探针5端荧光

基团发出的荧光。但在PCR扩增中，溶液中的模板变性后低温退火时，引物与探针同时与模板结合。在引物的介导下，沿模板向前延

伸至探针结合处，发生链的置换，Taq陶的53外切梅活性(此活性是双链特异性的，游离的单链探针不受影响)将探针5'端连接的荧

光基团从探针上切割下来，游离于反应体系中，从而脱离3'端荧光淬灭基团的屏蔽，接受光刺激发出荧光信号，即每扩增一条DNA链，

就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累枳与PCR产物形成完全同步。

直接的方法指的是标记荧光的探针与扩增产物结合后即直接产生荧光，分子信标(molecularbeacon)就属于这类，它本质上是一种

标记荧光的发夹探针，当探针分子呈发夹结构时，结合在其两端的荧光基团距离上接近，使得产生能量转移效应，而不发生荧光。当互

补序列出现时，探针与DNA杂交，探针转变成一个开放的结构，呈线性，报告荧光基团与淬灭荧光基团彼此在空间上产生足够的分离，

荧光基团脱离了淬灭基团的影响，从而产生可被检测到的荧光。荧光标记引物是从分子信标的概念变化而产生的一种联合分子探针系统，

它把荧光基团标记的发夹结构的序列直接与PCR引物相结合，从而使荧光标记基团直接掺入PCR扩增产物中。目前主要有两种：口出

弓I物(sunriseprimes)和蝎子引物(scorpionprimes)。杂交探针(hybridizationprobe)使用两个特异的探针，其中上游的探针的3'

端标记有供体荧光素(donor),而下游的探针的5'端标记有受体荧光素(acceptor)。在PCR中模板退火阶段，两探针同时与扩增产物

杂交，并形成头尾结合的形式，使供体和受体荧光素距离『常接近，两者产生荧光共振能量转移(FRET,此作用与上述水解探针的方

式相反)，使得受体荧光基团发出荧光；当两探针处于游离状态时，无荧光产生。由于反应中运用了两个探针，因此增加了方法的特异性，

另外也nJ•利用荧光寡核苜酸熔解曲线(meltingcurve)对与寡核件酸探针结合的序列进行分析，从中获取有用的信息。

1.3定量方法在real-timeQ-PCR中，模板定量有两种策略：相对定量和绝对定量。相对定量指的是在一定样本中靶序列相对于另一参

照样本的量的变化。绝对定量指的是用已知的标准曲线来推算未知的样本的量。

1.3.1标准曲线的法的相对定量山于在此方法中量的表达是相对于某个参照物的量而言的，因此相对定量的标潴曲线就比较容易制备，

对于所用的标准品只要知道其相对稀释度即可。在整个实险中样本的靶序列的量来白于标准曲线，最终必须除以参照物的炭，即参照物

是1*的样本，其它的样本为参照物量的n侪。在实验中为了标准化加入反应体系的RNA或DNA的量，往往在反应中同时扩增一内源捽

制物，如在基因表达研究中，内源控制物常为一些管家基因(如beta-actin,3-瞬酸甘油醛脱氧酶GAPDH等)。

1.3.2比较CT法的相对定量比较CT法与标准曲线法的相对定量的不同之处于在于其运用了数学公式来计兜相对•量，前提是假设每个

循环增加一倍的产物数量，在PCR反应的指数期得到CT值来反应起始模板的量，一个循环(CT=1)的不同相当于起始模板数2倍的

差异。但是此方法是以靶基因和内源控制物的扩增效率基本一致为前提的，效率的偏移将影响实际拷贝数的估计。

1.3.3标准曲线法的绝对定地此方法与标准曲线法的相对定量的不同之处在于我标准品的量是预先可知的。质粒DNA和体外转入的

RNA常作为绝对定量标准品的制备之用。标准品的量可根据260nm的吸光度值并用DNA或RNA的分子量来转换成其拷贝数来确定。

2实时荧光定鼠PCR技术的应用

Real-timeQ-PCR的应用范刖很广泛，包括mRNA表达的研究、DNA拷贝数的检测、单核背酸多态性（SNPs）的测定等。以下就目

前real-timeQ-PCR在易位基因的检测，细胞因子的表达分析，肿瘤耐药基因表达的研究以及病毒感染的定量监测中的应用作概述。

2.1微小残留病变的检测肿瘤疾病尤其是血液的恶性肿瘤常伴有特异性基因的易位，这种易位往往可以作为监测临床治疗效果的一种

肿瘤标志.虽然在过去的几十年里治疗方案的改进已大大地延长了病人的生存期，但是缓解期的病人仍存在复发的危险性。因此微小残

留病变（MRD）的检测对于进一步调整治疗方案是至关重要的。Real-timeQ-PCR的应用正成为检测肿瘤微小残曲分子标志的一种必备

的研究工具。通过对肿瘤融合基因的定量测定能指导临床对病人实行个体化的治疗。急性粒细胞性白血病（AML）最常见的染色体异常

是交互易位t（8：21）（q22：q22）,在这易位中，AML-1转录因子基因和8号染色体的MTG8基因发生融合,致使正常的AML-1转录调

控受到影响，这可能是白血病的病因。目前的研究证明用real-timeQ-PCR来检测融合基因有助于对这些病人的MRD进行定量，其作

为预后的指标或对治疗方案的评估是有价值的。同样的方法也被用于定量其它的易位融合基因水平，如慢性粒细胞性白血病（CML）的

BCR-ABL融合基因：急性淋巴细胞性白血病（ALL）的白血病特异的TEL-AML1融合基因：滤泡状淋巴瘤（FL）的染色体易位

t（14;18）（q32;q21）和bcl-2重排等。许多研究都在很大程度上受益于real-timeQ-PCR方一法的应用，随着技术的发展，Real-timeQ-PCR

的运用将不断地扩大。

2.2细胞因子的表达分析细胞因子是调节蛋白，它通过调节免疫反应（包括淋巴细胞活化、增殖、分化、生存和凋亡）在免疫系统中起

着核心作用。许多不同类型的细胞都能分泌这种低分广量的蛋白质，其中包括淋巴细胞、抗原递呈细胞、单核细胞、内皮细胞和成纤维

细胞.细胞因子可被分为不同的组：白介素（IL-1〜IL-23）,干扰素（IFNy,IFN,等）,集落刺激因子（CSF）,肿瘤坏死因子（TNF）,

肿瘤生长因子（TGF・B等）和化学因子（MCP・1,MIP-1等）。为了阐明在许多炎症反应,自身免疫性疾病和舞官移植排异中的免疫致病

途径，细胞因子mRNA表达谱的可靠定量是很重要的。尽管被检样本中细胞因子含量往往极低，然而real-time反转灵PCR（RT-PCR）

以其高敏感性和准确性在细胞因广的定量中越来越受到青睐。

2.3肿瘤耐药基因表达的研究对化疗药物的耐药是治疗肿瘤病人的主要障碍，由于耐药限制了许多肿痛的成功治疗，因此研究肿瘤细胞

对耐药机制就变得卜分重要。目前研究中发现主要的耐药机制有：ATP结合盒基因超家族（ATP-bindingcassettesuperfamily）的膜转

运蛋白介导的耐药，这些蛋白包括：MDR-1基因编码的P■糖蛋白（P・gp）,多药耐药相关蛋白（MRP）,肺耐药相关蛋白（LRP）,乳腺

癌耐药蛋白（BCRP）等：酶介导的耐药，包括拓扑导构酶（Topo）,谷胱甘肽（GSH）及谷胱甘肽6-转移酶（GST）,蛋白激酪C（PKC）,

脱氧胞瑶嚏核甘激的（deoxycytidinekinase）等，凋亡基因介导的耐药，如bcl・2家族，p53基因,c-myc等。多药耐药（MDR）是多

因素，多种机制共同作用的结果。real-time反转录PCR（RT-PCR）是了解肿瘤耐药，指导临床治疗策略的有用手段，它能观测用药前

后及发发时肿瘤细胞的耐药基因mRNA表达变化，从而及时调整治疗方案和评价疾病的预后。

2.4病毒感染的定量监测扩增技术的发展使得对病毒的定性或定量检测的能力随之提高，也使研究病毒的负荷和疾病进展的关系成为可

能.Real-timeQ-PCR是主要被运用于科研和诊断领域的扩增技术，它不仅能对病毒定性，而且由于其实验的批问和批内差异小，重复

性好，因此能方便、快速、汉敏、准确地定量病毒DNA或RNA的序列，更重要的是从中可以动态地研究在整个病程中潜在病毒的更活

或持续，从而使临床医生和病毒学家能检测临床的变化，如抗病毒治疗的效果，耐药变异的出现等。目前运用较多的是在器官移值中对

使用免疫抑制剂的病人用Real-timeQ-PCR来定量测定CMV感染。研究表明在骨髓移植的病人中用Real-timeQ-PCR检测CMV感染

比传统的pp65抗原试验更敏感，抗CMV药物治疗能使血中的病毒含量卜-降，Real-timeQ-PCR对于快速定量骨移植病人的CMV感染

和监测CMV复活是•个有用的工具。

3存在的问题及应用前景

在real-timeQ-PCR技术中，无论是相对定量还是标准曲线定量方法仍存在些PCR定量方法均有的问题力待解决。在标准曲线定量

•I'.标格品的制备是一个必不可少的过程。目前由于无一统一标准，各个实验室所用的生成标准曲线的样品各不相同，致使实验结果缺

乏可比性。此外，用real-timeQ-PCR来研究mRNA时，受到不同RNA样本存在不同的逆转录（RT）效率的限制。在相对定量中，其

前提是假设内源控制物不受实验条件的影响的，合理地选择合适的不受实验条件影响的内源控制物也是实验结果可靠与否的关键。另外，

与传统的PCR技术相比，Real-timeQ-PCR的不足之处是：（1〉由F运用了封闭的检测，减少了扩增后电泳的检测步骤，因此也就不能

监测扩增产物的大小：（2）因为荧光素种类以及检测光源的局限性，从而相对■地限制了real-timeQ-PCR的复合式（multiplex）检测的

应用能力：（3）目前real-timeQ-PCR实验成本比较高，从而也限制了其广泛的应用。

随着技术不断改进和发展。目前real-timeQ-PCR已成为科研的主要工具，该技术未来的应用前班是令人鼓舞的，一方面

real-timeQ-PCR技术与其它分子生物学技术相结合使定量极微量的基因表达或DNA拷贝数成为可能。另一方面荧光标记核酸化学技术

和寡核仔酸探针杂交技术的发展以及real-timeQ-PCR技术的应用，使定量PCR技术有,个足够的基础为广大临床诊断实验室所接受，

将仃助于临床医生对疾病的诊断和治疗。

4结语

Real-timeQ-PCR的发展使得研究人员又多了•种比较简单且自动化的手段去研究许多市:要的基础课题。虽然此技术仍存在一些不足

需要改进,但是它为real-timeQ-PCR在常规诊断检测中的运用打下了良好的基础。Real-timeQ-PCR将成为未来分子生物学实验室必

备的研究工具。

WORD操作题

i.将本文的标题居中，并将字体大小设置为小三、力u粗。

2.将文中所有的“Internet”，替换为“因特网(Internet)”，并加黑显示。

3.将页的上边距置为3.85厘米，下边距置为2.55厘米

电子商务

根据Jnpiter的研究，美国联网的家庭中有12.5%以上每年通过Internet进行7次采购。我

们可以看到，随着Internet的发展和跨国企业的增加以及技术的发展，电子商务呈现出强劲的

发展势头，我认为没有人能够抗拒这个趋势，整个产业将经历深刻的变革。

那么,什么是电子商务呢?简单地说，它是指在从售前服务到售后支持的各个环浇谱实现

电子化、自动化。这些正是所有的商务公司所向往的，而在目前,只有少数有实力的大公司可

以支付电子数据交换(EDI)的高额费用。所以，在Internet上进行商务活动，具有诱人的前景。

是什么原因使如此众多的企业热衷于电子商务呢?在同用户的接触中，我们发现:战略优

势、收入的增长和开销的降低是各公司追求的主要目标，在Internet上建立站点提供商业服务,

有利于企业树立形象，增强竞争力，从而在未来的战略中占据优势;在全球互联网上做生意可

以获得更多新的用户，加深与用户之间的联系、扩展市场，从而实现收入的增长;与传统商业相

比，在Internet上从事商业活动的费用之低是不言而喻的。

WORD操作题

1.将第二段进行首字下沉，下沉2行。

2.将正文中所有的“MRP”设置为红色，并加粗。

3.将第二段与第三段合并，并将该段的行间距设为2倍行距。

实施MRP有许多难点：

首先是企业文化的包容性。国内企业受传统管理模式的影响较深，往往习惯于要求软件

如何适应企业的管理特点，而很少考虑软件本身体现出的管理思想是否合理。MRP1I的实施

必将对企业原有管理模式造成冲击，不是西风压倒东风，就是东风压倒西风，双方磨合的结果

就得取决于本企业的企业文化的包容性。

而企业文化及管理的基本思想,主要是受生产力发展水平与生产管理科学发展水平的制

约,比如系统优化的思想，追求效率的思想，适时生产的思想等等。一般说来，管理水平的提高,

涉及管理思想、管理方法、管理组织、管理人员和管理手段等诸方面的共同提高。这五个方

面有着紧密的内在联系，其中管理思想的进步最为电要。只有在正确的管理思想指导下，我们

才能明确发展的目标，从而有效地运用适当的管理方法，建立合理的管理组织,提高管理人员

的素质，从而有效地应用现代化管理手段。

其次是基础数据的准备与采集。MRPH的实施是一个系统工程，有许多数据必须准备与

采集，这是成功的关键。从客观上来说，这有一定的困难，它主要来自两个方面:从大环境上讲,

金融市场与物资资料市场不是很稳定，其不可测因素很多，而且这种不可测因素并不完全遵循

市场经济规律;另一方面,从企业内部看，有些数据以前并不存在，需要补齐，有的只是一个粗略

的数据，需要进•步的整理与细分;此外，新系统与旧系统之间的转换是一个动态过程,特别是

在金额、数量等存在时间性差异时，完成系统的动态切换也是比较困难的。

最后是人员的素质问题。无论如何先进的工具，只有被人掌握与使用，才能发挥其效率。

人是企业中能动性最大的资源，是实施管理业务的主体。对MRPII来说,需要企业各类人员的

努力。决策者要为MRPH的实施提供组织、人员、资金等方面的保证;操作人员要及时进行

数据的录入与处理;系统管理人员除保证系统安全、可靠地运行外，还要学会利用里面的资源,

为领导的科学判断与决策提供可靠的依据。但是,目前国内人员素质普遍不高，精通MRPII各

个方面的专家则更是缺乏。

WORD操作题

1.将“DianaHwang”设置为蓝色，并设置“礼花绽放”的动态效果。

2.将第二段设置为居中对齐，并加15%的青色底纹。

3.将正文中的“PC”改为“微型计算机”。

手持型PC,例圳a.k.a.palmtop（掌上型电脑）、PDA（个人数字助理）、口袋型PC、or

ganizer（信息管理器）或是clamshell计算机，已在去年取得了很大的进展,很多新的机型已可以

进行下列商业应用,如文字处理、E-maiL电子表格、图像工具、传真及WWW浏览器。除

此之外，绝大多数机器还允许用户与其台式机实现信息共享与同步。

手持型PC的灵巧与易于携带使其销售量大幅上涨,IDC（国际数据公司）曾估测1997年手

持PC的市场会以79.9%的比率上升至360万台，而笔式系统，如FujitsuStylistic1200和Point

510则有望增长22.7%。

IDC高级工业分析员DianaHwang说:"在接下来的一年中，你会看到尽管有新的机型不

断进入市场,但大型PC的设计也会因构成部件的关税降低而改变，但像PalmPilot这样适合个

人用的手持PC市场仍将有较大的增长”。

WORD操作题

i.将文中的圆形项目编号换为四边形项目编号。

2.将文中最后两段的字体设置为小五楷体，并加粗显示。

3.为文中倒数第二段设置10%的绿色底纹。

创业成功的六条原理

密歇根州立大学的一项研究，发现了六条指导创业成功的原理。

•原理1.反复构造图景

•原理2:抓住连续的机会成功

・原理3:放弃自主独断

•原理4:成为你竞争对手的恶梦。

•原理5:培育创业精神

•原理6:靠团队配合而势不可挡

随着公司的发展和雇员人数的增多，一天接一天的日常工作会使人们看不到公司的主要

H标。通过鼓励和协助团队合作，雇员把自己放在正确的努力方向上。需要不断剪裁调整团

队，如规模、职责范围和它的组成等来适应眼下特定的情境。

把培训雇员的概念延展为横向培训。使雇员们熟悉公司、公司中其他人在做什么，这能

够帮助雇员们看到他们在更大的情景中自己所适宜的地方。利用团队去减少扯皮，用团队去

建立相互尊重，把团队建成•个人，给团队以反馈来证明你对团队的重视。

WORD操作题

i.添加标题“《地雷站》简介”，并将其设置为“黑体”，三号，粗体，加下划

线。

2.将第一段的段前间距设置为18磅，行间距为1.5倍行距。

3.将页的左边距设为3.5厘米，右边距设为3厘米。

《地雷战》是一款典型的战棋类游戏，战斗采用回合制。游戏的进程由两个大的组成部

分组成，即战斗关和休息关。休息关里接受新的战斗任务并进行其它准备工作，其中最重要的

事情就是制造地雷。《地雷战》中一共设计了十类地雷，有杀伤敌人体力（相当于生命）的土雷、

石雷、铁雷、彻地雷、轰天雷，还有消耗敌人的斗志、攻击力、防御力的伪装雷、蝎子雷、

风火雷等。每类地雷又有四种不同的属性。不同品种不同属性的地宙在制造时材料的配方是

各不相同的，如何利用现有的有限资金制造出需要的地雷种类,玩家还需费些周折。战斗中,

对地雷的使用状况直接影响战斗的成败，敌人可能不会踏上地宙，可能会派工兵排除你辛辛苦

苦埋下的地雷，甚至会逼迫老百姓在前面踩雷开道……不过，当玩家具有足够的技术能够制造

各种地雷并熟悉它们的性能后，地雷将变成一种克敌制胜的法宝:可连环引爆，可定时引爆、可

遥控引爆、甚至可以牺牲自己强制引爆，给敌人以沉重打击。

WORD操作题

1.将正文中所有的"Internet"替换为"互联网(Internet)w»

2.将第二段的字体设为“楷体”，四号，并加下划线。

3.将第一段的段前间距设置为6磅，段后间距设置为12磅。

历史发展证明，科技进步能使人类的生产、流通和服务领域发生巨大的变化。Internet的

发展如同PC的出现，是一次席卷计算机界以及其它众多产业的浪潮。我们唯有适应它，才能

在严峻的商业竞争中求得生存。

目前Internet的潮流仅仅是一个开始。但它正以令人难以置信的速度发展着。根据

InterNIC的调查，在过去的3年里,Internet的使用量每年要翻一番还多。目前Internet上有超

过100万个注册域，其中74%是在过去的•年里建立的，并以每天3000个新域的速度增加着。

这些站点中88%是公司或商业站点。如果您认为这些仅仅是在美国发生的，那就错了。尽管

美国目前拥有Internet上57%的主机，但由于欧洲站点的增长率高于美国，据估计到2000年,

美国将只拥有50%Internet站点。

WORD操作题

1.对全文进行页面设置，设置每行字符数为36个，每页为40行。

2.将第四段移到第三段前。

3.将全文中的“因特网”替换为蓝色的“Internet”。

互联网行业鉴最近发布的一项调查显示，美国使用因特网的人数仍然超过其他国家;同时,

世界各地的上网冲浪者也在日益增加。

1997年,54%的因特网使用者是美国居民他们利用因特网进行商务活动、教育活动和居

家办公。这一百分比比1991年有大幅下降，那时美国因特网使用人数占全世界的80%。预

计到2000年时，美国因特网使用人数所占百分比会降到40%。

排在前10名的国家还有日本、英国、加拿大、德国、澳大利亚、荷兰、瑞典、芬兰和

法国。这项调查预计，人口较多的国家，如中国、俄罗斯等,将会很快取代较小的工业化国家,

从而改变现有排名。

根据这项调查，美国因特网使用人数所占百分比与计算机行业的发展趋势相一致,美国通

常在新兴的市场上领先，而代表这一新兴市场的技术一经成熟，美国所占份额就会下降到少于

30%。

去年，包括美国、英国和日本在内的11个国家的因特网使用人数超过了100万。这项调

查预测，还有9个国家将突破100万大关，其中包括西班牙、巴西、意大利和韩国，也许还包括

南非。

WORD操作题

1.将文中所有的“打印机”，提升3磅，并将它设为斜体

2.将第二段在“此外，它”前进行分段。

3.将“网络打印”作为本文的标题，并将它居中，字体为三号宋体。

单机打印是指一台计算机独占某个或多个打印设备。显然,如果该计算机的用户不进行

打印输出，那么这些打印机就被闲置起来。另一方面，如果这些打印机不能满足用户的某些要

求（圳分辨率、色彩等）,用户也就无法获得满意的输出文稿或图像，而让每个用户都去购置各

种型号的打印机既不经济也不必要。打印机共享器在局部范围内部分地解决了这一问题。随

着计算机网络的发展和普及,网络打印可以在更大范围内彻底解决这一问题。

对于网络打印而言，一个网络的用户可以使用该网络上连接的多台打印机，而每台打印机

也可以由多个用户来使用，所以它必须照顾到网络上的每位使用者，只要某使用者下达了打印

命令,它就要进行打印处理而不能忽略。此外，它还应该能根据打印文件的优先级别将紧急文

件尽快输出。为了有效地完成上述打印工作，