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文档简介

ICS65.020.20CCSB38

5333怒 江 州 地 方 标 准DB5333/T32—2024滇黄精组培苗生产技术规程TechnicalRegulationsonPropagationofPolygonatumkingianumviaTissueCulture2024-01-24发布 2024-02-24实施怒江州市场监督管理局  发布DB5333/T32DB5333/T32—2024II前 言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由云南省农业科学院药用植物研究所、怒江昂可达生物科技开发有限公司提出。本文件由怒江州市场监督管理局归口。本文件起草单位:云南省农业科学院药用植物研究所、怒江昂可达生物科技开发有限公司。DB5333/T32DB5333/T32—2024PAGEPAGE1滇黄精组培苗生产技术规程范围本文件适用于云南怒江境内滇黄精组培苗生产管理。规范性引用文件(包括所有的修改单适用于本文件。NY/T2306花卉种苗组培快繁技术规程DB5333/T17滇黄精规范化种植种子种苗质量要求术语和定义下列术语和定义适用于本文件。滇黄精coll.etHemsl)2020年版一部收录的黄精药材的植物基源之一,为食药两用植物。组织培养外植体从鲜活植物体上获取的用于植物组织培养的组织或器官。驯化组培苗瓶苗从人工控制的培养条件到自然环境适应的过渡过程。缩略语MS:是植物组培常用的一种基本培养基,由Murashige和Skoog发明的,以两人名字的缩写命名。6-BA:6-Benzylaminopurine,6-苄氨基腺嘌呤。NAA:Naphthylaceticacid,萘乙酸。IBA:Indole-3-butyricacid,吲哚丁酸。AC:Activecarbon,活性炭。培养准备生产场地与设备按照NY/T2306中的规定执行。容器和器械清洗容器采用650ml组培瓶。清洗按照NY/T2306中的规定执行。培养基配制以MS培养基为基本培养基,配制方法见附录A。添加琼脂4.0g/L~4.5g/L,蔗糖30g/L,调节pH值为5.8;激素的具体用量和比例应根据不同培养基类型、品种特性及其在培养中的表现加以适当调整和优化。诱导培养基:MS+6-BA2.0mg/L。继代增殖培养基:MS+6-BA3.0~4.0mg/L+NAA0~1mg/L。生根培养:1/2MS+NAA0~1mg/L+IBA0~1mg/L+AC0.5g/L。灭菌培养基配制完毕后,分装至组培瓶中,在121℃下高压灭菌15min~20min,并尽快取出使其冷却备用。外植体采集和处理外植体的选择长势良好、大小近似的滇黄精不定芽或顶部具叶柄幼嫩叶。外植体的采集30min内不能处理,则需装入自封袋中,排除空气后密封保存。长途运输需0~5外植体的清洁外植体在加有适量洗衣粉的自来水中浸泡刷洗后。滴加2滴~3滴吐温-80,震摇10min~15min后用自来水冲淋60min~80min。外植体的消毒将洗净的外植体,转移至超净台,用75%酒精消毒20s,后用无菌水涮洗3次~4次。经酒精消毒后的外植体,用0.1%升汞溶液消毒15min,无菌水涮洗6次~8次。经升汞消毒的外植体,用无菌滤纸吸去表面水分,同时伤口处切除0.2cm~0.5cm。消毒废液的处理使用过的氯化汞溶液按照国家有关剧毒化学品使用的法规进行回收处理。接种初代培养增殖培养0.5cm45d~50d继代一次,直至增殖小苗达到需要的数量,不宜超过6代。生根培养将增殖的不定芽切割成单个完整的幼芽并切去愈伤,将其按极性插入生根培养基中。生根培养40d~50d发育出完整根系,即可出瓶。培养条件培养温度为25℃±2℃,用光强2000lx~3000lx白光光照,每日光照12h。驯化出瓶准备培养瓶内长出3条以上长2.0cm~3.0cm的不定根时,连瓶移至遮阴率60%~80%的自然光温室大棚内继续培养3d~4d;后拧松瓶盖继续在温室大棚内培养3d~4d。出瓶500倍的多菌灵浸泡根部2min~3min,按5cm×10cm的密度,栽植于泥炭土与珍珠岩(1:1)的混合基质中,在苗床上搭建塑料小拱棚或种植于大棚中。温湿度要求温度苗床温度白天温度控㓡在30℃以下,夜间温度控制在15℃以上。空气湿度开始驯化10d内,完全关闭小拱棚,空气湿度控制在90%以上。驯化后10d~20d,打开小拱棚两侧,空气湿度控制在50%~80%,驯化20d后,逐步打开小拱棚至完全打开。基质湿度组培苗驯化期间基质含水量控制在50%~60%。施肥管理配制成0.1%的浓度喷施,后浓度逐步增加至0.5%,施肥间隔时间为7d~15d。病虫害防控参照附录B进行滇黄精组培苗的主要病虫害防治。出苗出苗要求11.0cm及以上的小块茎时出苗。种苗分级符合DB5333/T17中的规定。包装、标识和运输包装以100苗为单位,用塑料袋包裹根及茎基部,将装袋苗放入包装箱。标识外包装贴上标识,注明品种(含品系)、规格、等级、数量、生产者、发货日期等信息。运输装车和搬运时勿倒置,运输途中避免日晒、雨淋。附 录 A(资料性)MS培养基的组分及含量名称成分含量(mg/l)大量元素20*NH4NO31650KNO31900MgSO4.7H2O370KH2PO4170CaCl2.2H2O440铁盐50*Na2.-EDTA37.25FeSO4.7H2O27.85有机物100*甘氨酸2.0盐酸硫胺素0.1盐酸吡哆醇素 盐酸毗哆醇素0.5烟酸0.5肌醇100微量元素MnSO4.4H2O22.3ZnSO4.7H2O8.6H3BO36.2KI0.83Na2MoO4.2H2O0.25CuSO4.5H2O0.025CoCl2.6H2O0.025附 录 B(资料性)滇黄精组培苗主要病虫害及其防治方法病虫害名称危害部位及症状防治方法根茎腐病75%80070%恶4000倍液灌根。炭疽病色小斑扩展成椭圆形、楔状或不规则轮纹状斑,潮湿时病斑处出黑色

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