【生物课件】动物细胞培养 2023-2024学年高二下学期生物人教版选择性必修3

第2节

动物细胞工程皮肤的自体移植灰绿色小面积烧伤：患者通过切除+植皮(自身)后恢复1）使用他人皮肤如何？患者自身皮肤的不够用，如何解决？大面积烧伤？2）培养自身细胞？

目前，科学家还在研究对皮肤干细胞进行培养，以获得适合临床上使用的人造皮肤。从社会中来1、概念：从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适当的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。2、目的：获得细胞或细胞产物；

不能获得完整动物个体。3、原理：细胞增殖（有丝分裂）4、实例：克隆皮肤皮肤烧伤那么，获得这些细胞或细胞产物的培养条件和具体过程又是怎样的？动物细胞培养一、动物细胞培养的条件欲使动物细胞体外培养顺利进行，应营造怎样的环境？阅读p43-44思考讨论糖类、氨基酸、无机盐、维生素……无菌、无毒的环境适宜的温度、pH和渗透压适宜的气体环境+合成培养基血清人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分。培养动物细胞一般使用液体培养基，也称培养液。一一、动物细胞培养的条件将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制的培养基。如何维持无菌、无毒的环境？适宜的温度、pH分别是多少？适宜的气体环境包括？分别有什么作用？如何保持该气体环境？对培养液和所有培养用具进行灭菌处理、无菌环境下操作定期更换培养液，清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。温度：（36.5±0.5）℃；pH：7.2-7.495%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱；O2是细胞代谢所必需的，CO2的作用是维持培养液的pH；培养皿或松盖培养瓶。一一、动物细胞培养的条件思考讨论细胞贴壁接触抑制二、动物细胞培养的过程任务：阅读教材P44-45并结合动物细胞培养的定义，相关关键词和箭头表达出一般过程。动物细胞实验室培养体系抗生素培养瓶扁平：较大的贴附面积瓶塞：透气材质：无色，无毒，透明度高CO2培养箱37℃，5％CO2

，95%。定期消毒（90℃，14h)酚红培养基基础营养血清一动物细胞培养过程用机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理原代培养加培养液

制成细胞悬液在培养皿

或培养瓶内悬浮生长贴壁生长(大多数）④接触抑制细胞分裂受阻解决传代培养分瓶培养取动物组织分散成单个细胞②制成细胞悬液，分瓶培养。①收集细胞①缺乏营养物质、②有害代谢废物积累③细胞密度过大等分裂、增殖旺盛细胞充分接触营养物质动物胚胎或幼龄动物的组织、器官剪碎细胞悬浮液加培养液单个细胞胰蛋白酶动物细胞培养过程黏附贴壁铺展细胞贴壁（细胞生长、分裂）培养动物胚胎或幼龄动物的组织、器官剪碎细胞悬浮液加培养液单个细胞胰蛋白酶动物细胞培养过程细胞停止生长密度抑制分瓶培养胰蛋白酶原代培养细胞贴壁（细胞生长、分裂）培养动物胚胎或幼龄动物的组织、器官剪碎细胞悬浮液加培养液单个细胞胰蛋白酶接触抑制动物细胞培养过程10∼50代左右癌变衰老死亡传代培养细胞停止生长分瓶培养胰蛋白酶原代培养细胞贴壁（细胞生长、分裂）培养动物胚胎或幼龄动物的组织、器官剪碎细胞悬浮液加培养液单个细胞胰蛋白酶动物细胞培养过程观看视频：动物细胞的培养资料比较项目植物组织培养动物细胞培养原理培养基性质培养基特有成分培养过程培养目的相同点获得细胞或细胞产物常用固体培养基新植株葡萄糖、动物血清常用液体培养基细胞增殖细胞的全能性蔗糖、植物激素1.培养过程中细胞都进行有丝分裂，不涉及减数分裂；2.均需无菌操作，需要适宜的温度、pH等条件思考.比较

原代培养、传代培养脱分化、再分化动物细胞培养

与

植物组织培养干细胞培养及其应用

动物和人体内仍然保留着少数具有分裂和分化能力的细胞，叫做干细胞。早期胚胎1.种类及存在部位

胚胎干细胞(ES细胞)成体干细胞存在部位①

组织特异性任何一种类型特性具有分化为成年动物体内的②

的细胞,并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能

具有③

,只能分化成特定的细胞或组织,不具有发育成完整个体的能力

三、干细胞培养及其应用成体组织或器官，包括骨髓中的造血干细胞、神经系统中的神经干细胞和睾丸中的精原干细胞免疫排斥神经组织损伤(1)造血干细胞移植，可以治疗

及一些恶性肿瘤放疗或化疗后引起的造血系统、免疫系统功能障碍等疾病。(2)可以用于治疗人类的某些顽症:如神经干细胞在治疗

和神经系统退行性疾病(如帕金森病、阿尔茨海默病等)方面有重要的应用价值。

(3)诱导多能干细胞(iPS细胞):诱导过程无须破坏胚胎,且iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞,因此移植过程理论上可以避免

反应。

三、干细胞培养及其应用2、干细胞应用：白血病2、干细胞应用：体外诱导小鼠成纤维细胞诱导多能干细胞iPS临床治疗人类疾病多种体细胞定向诱导分化如：白血病、帕金森病、阿尔茨海默病等三、干细胞培养及其应用移植取成纤维细胞等iPS细胞转入相关因子细胞发生转化分化胰岛细胞神经元血细胞肠上皮细胞心肌细胞肝细胞病人iPS细胞用于治疗人类疾病示意图无菌、无毒营养温度、pH和渗透压气体环境制备细胞悬液原代培养传代培养动物细胞培养动物细胞培养的条件动物细胞培养的过程干细胞的培养和应用干细胞的种类、特点及应用iPS细胞的培养和应用课堂小结1.判断下列有关动物细胞培养的表述是否正确。（1）培养环境中需要O2，不需要CO2。（

）（2）细胞要经过脱分化形成愈伤组织。（

）（3）培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清（

）（4）培养瓶中的细胞需定期用胰蛋白酶处理,分瓶后才能继续增殖（

）×√××