GB 7300.503-2023 饲料添加剂 第5部分：微生物 屎肠球菌

饲料添加剂第5部分：微生物屎肠球菌Feedadditives—Part5:L2023-05-23发布国家市场监督管理总局国家标准化管理委员会I本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规Ⅱ饲料添加剂是指在饲料加工、制作、使用过程中添加的少量或者微量物质，包括营养性饲料添加剂和一般饲料添加剂。为便于使用，按照产品类型，GB7300《饲料添加剂》分为以下13个大类：——维生素及类维生素；——矿物元素及其络(螯)合物；——酶制剂；——微生物；——非蛋白氮：——抗氧化剂；——着色剂：——调味和诱食物质；——多糖和寡糖；——其他。本文件的产品屎肠球菌属于第5大类微生物，因屎肠球菌是此大类第3个发布的产品标准，所以本文件以GB7300.503编号，作为GB7300的第503部分。1饲料添加剂第5部分：微生物屎肠球菌GB/T5917.1饲料粉碎粒度测定两层筛筛分法GB13078饲料卫生标准GB/T30956饲料中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定免疫亲和柱净化-高效液相色谱法敏感性试验第1部分：抗菌药物的体外活性检测方法(Clinicallaboratorytestingandinvitrodiag-nostictestsystems—Susceptibilitytestingofinfectiousagentsandevaluationofperformanceofanti-microbialsusceptibilitytestdevices—Part1:Referencemicrobialagentsagainstrapidlygrowingaero2属于细菌界厚壁菌门芽孢杆菌纲乳杆菌目肠球菌科肠球菌属，为革兰氏阳性球菌，菌体卵圆形，主4技术要求载体和稀释剂品种来自《饲料原料目录》或《饲料添加剂物质及微生物的限量要求。中有毒有害理化指标应符合表1的要求。屎肠球菌活菌计数*/(CFU/g)活菌数以每克产品中菌落形成单位(colonyformingunits,CFU)表示。卫生指标应符合表2的要求。表2卫生指标总砷/(mg/kg)铅/(mg/kg)汞/(mg/kg)镉/(mg/kg)黄曲霉毒素B₁*/(μg/kg)3表2卫生指标(续)脱氧雪腐镰刀菌烯醇*/(mg/kg)玉米赤霉烯酮*/(mg/kg)大肠菌群/(MPN/g)不得检出表中所列限量，除特别注明外均以干物质含量88%为基础计算(大肠菌群、霉菌总数、沙门氏菌除外)此类指标仅适用于植物性载体生产的产品。4.6屎肠球菌的氨苄青霉素敏感性屎肠球菌对氨苄青霉素的最低抑菌浓度(MIC)小于或等于2mg/L。5.1采样原则样品的采集应遵循随机性、代表性的原则，采样过程应遵循无菌采样要求，防止一切可能的外来5.2.1应在同一批次产品中采集样品，每件样品的采样量应满足微生物指标检验的要求，一般不少于5.2.2独立包装小于或等于500g的产品，取完整包装。5.2.3独立包装大于500g的产品，应用无菌采样器从同一包装的不同部位分别采取适量样品，放入同一个无菌采样容器内作为一件样品。5.3采集样品的贮存和运输5.3.1应尽快将样品送往实验室检验。5.3.2应在运输过程中保持样品完整。5.3.3应在接近原有贮存温度条件下贮存样品，或采取必要措施防止样品中微生物数量的变化。6试验方法6.1外观与性状按附录A规定的方法测定。4按GB/T6435规定的方法测定。按GB/T5917.1规定的方法测定。6.8汞(以Hg计)按GB/T30956规定的方法测定。按GB/T28716规定的方法测定。5不应超过50t。6A.1.1肠球菌选择性培养基(胆汁七叶苷叠氮钠琼脂)加热使培养基熔化，冷却至45℃~50℃时使用。用接种针或接种环随机挑取5个菌落。7试验项目结果十十十(4种)反应十十一十注：“十”表示为90%以上的菌株为阳性反应；“一”表示90%以上菌株为阴性反应。酸序列数据库中模式菌株ATCC19434的16SrRNA基因序列进行同源性比较，序列差异小于1%,则8B.1试剂吐温80pH临用时加热使培养基熔化，冷却至45℃~50℃时使用。中均质。待均匀后，再将样品用无菌溶剂按十倍稀释法制成不同浓度稀释液。取1.0mL养皿中倒入15mL～20mL,摇匀并凝固，制成相应培养基的琼脂平板。36℃±1℃倒置培养24h~9B.3菌落计