凝胶净化浓缩仪-培训资料

Freestyle培训手册郭泰上海磐和电子科技有限公司Telax录GPC.SPE原理介绍Freestyle仪器硬件介绍操作规程，日常维护及常见故障判断处理工作站操作培训

关于GPC凝胶净化系统从样品中除去大分子物质提高分析结果的精确度延长进样口和分析柱的使用寿命经过GPC净化未经过GPC净化GPC的应用目前在对各类中药类样品、环境样品和食品样品中的农药残留物分析时，一般样品的萃取物中含有大量的高分子物质,比如色素、油脂、糖等，这些高分子聚集在GC的进样口和分析柱上，造成色谱分离效率降低。因此，这类样品必须进行有效的净化。凝胶渗透色谱（GPC）作为样品净化的手段之一，已被证明是一种使用最为方便的样品净化技术。这种净化技术在国外已经得到较为广泛的应用,它已成为美国环保局（EPA）,食品药物管理（FDA）,美国分析化学协会（AOAC）及欧州(EN)法定方法。GPC的原理流向高分子量废弃物收集被分析物

Bio-Beads先流出物主要流出物ttSPE基本原理

SPE是一种吸附剂萃取，样品通过填充吸附剂的一次性萃取柱，分析物和杂质被保留在柱上，然后分别用选择性溶剂去除杂质，洗脱出分析物，从而达到分离的目的。SPE的分离模式主要取决于填充剂的类型和溶剂的性质.SPE也是一个柱色谱分离过程，分离机理、固定相和溶剂的选择等方面与高效液相色谱（HPLC）有许多相似之处。但是SPE柱的填料粒径（>40µm）要比HPLC填料（3~10µm）大。由于短的柱床和大的粒径，SPE柱效比HPLC色谱柱低得多。因此，用SPE只能分开保留性质有很大差别的化合物。与HPLC的另一个差别是SPE柱是一次性使用SPE法的优点简单、快速和简化了样品预处理操作步骤,缩短了预处理时间。处理过的样品易于贮藏、运输,便于实验室间进行质控。可选择不同类型的吸附剂和有机溶剂用以处理各种不同类的有机污染物。不出现乳化现象,提高了分离效率。仅用少量的有机溶剂,降低了成本。易于与其他仪器联用,实现自动化在线分析。常见固相萃取小柱的构造

FreestyleSeries重要组成部分真空浓缩腔高效冷凝柱SPE模块进样泵GPC泵GPC柱定量环GPC进样针SPE进样针

FreestyleSeries重要组成部分注射器缓冲管溶剂切换十通阀液相泵密封塞FreestyleSeries重要组成部分主机电源浓缩系统电源电源开关：关闭电源后，再打开中间要间隔1分钟。FreestyleSeries重要组成部分低温恒温水槽低温水槽：

提供冷凝塔的冷凝水，冷凝水温度2-6℃FreestyleSeries重要组成部分

GPC模块：GPC凝胶净化柱（核心部件）

500mmⅹ25mmglasscolumn（国际农残标准柱）

400mmⅹ10mmglasscolumn（迷你柱）700mmⅹ25mmglasscolumn（EPA标准柱）

400mmⅹ20mmglasscolumn（高效快速柱）350mmⅹ25mmglasscolumn（S19快速柱）

内置过滤系统、螺旋柱头以及五层刮片特殊设计，均可自行填充，且自由更换溶剂体系

填料：Bio-Beads,TypeS-X3,200-400

FreestyleSeries重要组成部分多样化、易操作样品/收集架16ml样品架30位4ml样品架60位1ml样品架60位100ml样品架30位250ml样品架8位1L样品架4位250ml旋转蒸发架8位500ml旋转蒸发架6位等多种规格

独有Unique随心换功能：不需要任何工具，用户可以自行更换架并进行精确定位！

FreestyleSeries重要组成部分GPC模块：

紫外检测器（选配件）

FreestyleSeries重要组成部分可选配：1、254或280nm固定波长紫外检测器2、195—800nm可变波长紫外检测器紫外检测器在前处理仪器中的作用：1、验证柱效的一个辅助手段2、针对某些对紫外有响应的样品进行方法研发时的辅助作用FreeStyle

系统-主要组成部分电源开关：主机电源，浓缩系统电源，开关机时间间隔1分钟以上。

进样针：GPC进样针，SPE进样针。GPC柱子：

柱子规格，装填填料的克数，装填高度，柱子带有金属保护外壳可重复使用。注射器，多通阀：抽取清洗溶剂。

样品盘：规格，用于何种模式。浓缩系统：浓缩腔采用水浴和加热片加热模式；可以使用减压蒸馏和氮吹模式进行浓缩；清洗采用喷雾式，使用很少的溶剂就可以清洗干净；激光定容，定容体积从0.5-5ml。冷凝系统：冷凝塔将浓缩后的气态溶剂冷凝到液态，以保证对实验环境的保护。低温水槽：

提供冷凝塔的冷凝水，冷凝水温度2-6C。FreeStyle

系统-操作注意事项先打开低温水槽制冷，在打开电源，再电源打开至少1min后才可以打开工作站。

在进样针移动的过程中，不要碰到针，以免造成运行样品的终止。确认样品架的位置刻度和工作站的样品架位置一致。运行样品前，确认溶剂瓶内的溶剂是否足够，废液瓶内的空间是否足够。

仪器的维护：至少2周冲一次柱子。具体操作，开机自检完成后，直接点击“startpump”，运行15-30min后，点击“stoppump”，退出工作站，关闭电源。上样样品的要求：样品体系必须和柱子的体系一致；脱水；去除可见杂质；油脂的上样量控制在1g以下（标准柱）。FreeStyle

系统-操作注意事项常见故障的判断和处理：1.低压报警：由于泵头里有空气造成溶剂抽不上。解决方案：打开液相泵的密封塞，在工作站上将流速调制20ml/min，运行“startpump”，待有连续溶剂流出，”stop”并关闭密封塞，将流速调回至5ml/min。再次冲柱子，压力上升至正常值，问题解决。2.高压报警：由于管路里有堵塞。解决方案：将柱子倒过来用，反冲，如果压力下降，可以继续使用；如果压力仍然偏高，建议更换柱内过滤膜。同时也可将反压阀拆下来，用丙酮超声。Freestyle系统-软件操作培训1.双击，打开工作站。2.点击“Init.”进行自检。自检完成后，会显示以下图示。3.自检完成后，新建方法：选择相应模式的方法（GPC，EVA，SPE，FLEX），进行方法编辑。

Freestyle系统-软件操作培训4.调用已编辑好的方法5.选择所用的样品盘。6.编辑样品序列，将实际样品位置和工作站上样品位置相对应。7.点击“start”，开始运行8.序列运行完成后，点击退出工作站，并关闭主机电源。9.客户自行操作，熟悉仪器及工作站的使用。

液相泵的压力范围流速流动相进样速度进样方式标准模式充满定量环定量转移（小于定量环体积）定量转移（大于定量环体积一个小瓶）定量转移（大于定量环体积多个小瓶

分段收集时间紫外检测器废液瓶GPC柱子选择和参数编辑样品收集模式选择建立新方法分段收集模式online联机模式收集瓶的选择GPC方法建立新方法样品加入浓缩腔水浴温度加热套温度浓缩腔真空度浓缩时体积样品瓶选择收集瓶选择样品全部转移到浓缩腔样品部分转移到浓缩腔SPE或GPC在线联机EVA方法浓缩参数设定浓缩真空度设定停止浓缩时体积清洗溶剂体积清洗溶剂选择清洗次数最大浓缩时间浓缩定容参数样品瓶型号选择样品瓶分瓶设定每瓶分样体积收集瓶设定定容溶剂选择清洗溶剂选择清洗溶剂体积设定清洗次数设定定容体积设定浓缩清洗参数设定清洗溶剂选择清洗溶剂选择第一次清洗体积清洗次数第二次清洗体积清洗次数FLEX方法方法名称建立新方法调用的方法名称调用的方法的及参数样品瓶规格及数量收集瓶规格及数量清洗体积重复次数吸取注入的等待时间该步后的等待时间该步骤溶剂的流出位置该步骤运行时间SPESTEP-condition活化吸溶剂速度使用溶剂注入溶剂速度抽气体体积重复次数该步骤结束后的等待时间该步骤运行时间SPESTEP-emptying放空吸取注入空气速度吸取注入等待时间样品瓶类型取样体积样品上柱速度SPESTEP-load上样吸取样品速度取样方式样品收集位置该步骤结束后等待时间取样注入间隔时间清洗体积重复次数注入速度该步骤结束后的等待时间该步骤溶剂的流出位置该步骤运行时间SPESTEP-wash清洗吸取溶剂速度使用溶剂吸取注入间隔时间收集瓶类型及数量吹干方式空气吹干空气体积该步骤溶剂的流出位置该步骤运行时间SPESTEP-dry吹干注入空气流速洗脱体积重复次数注入速度该步骤结束后的等待时间该步骤溶剂的流出位置该步骤运行时间SPESTEP-eluting洗脱吸取溶剂速度使用溶剂吸取注入间隔时间收集瓶类型及数量选择样品架样品盘类型，必须和实际放置的盘类型一致，刻度一致选择方法选择样品盘类型编辑序列样品名称运行模式方法名称GPC柱子填装标准柱GPC10010（500*25mm），称取50g填料（Bio-BeadsSX3），加入200ml环己烷乙酸乙酯溶剂（体积比1：1的混合溶剂）或二氯甲烷迷你柱GPC20010(500*10mm)，10g填料，100ml混合溶液高效快速柱GPC40010(500*10mm)，25g填料，150ml混合溶液；EPA标准柱子GPC50010(500*10mm)，70g填料，300ml混合溶液；

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填料的称取————填料的浸泡称取相应重量填料加入适量环己烷、乙酸乙酯混合溶剂（体积比1：1）或二氯甲烷搅匀，用一次性橡胶手套封口，放于避光处浸泡12h以上再装填。GPC柱子填装————装填步骤1.装柱之前，将空柱长塞向上的固定在铁架台上，拔去长塞。短塞处连接一小段管子。2.将浸泡好的填料搅匀后，从上端倒入柱内

GPC柱子填装

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