转双价基因SFL-Bchi水稻的获得和抗病性鉴定的中期报告_第1页
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转双价基因SFL-Bchi水稻的获得和抗病性鉴定的中期报告一、研究概述水稻是全世界最重要的粮食作物之一，有着重要的地位。其中稻瘟病是严重危害水稻产量和质量的病害。因此，对水稻的抗病性研究一直是水稻育种中的重要方向。总的来说，提高水稻的抗病性需要综合运用多种手段，如遗传改良、生物技术等。其中基因转化技术是非常有效的手段之一。在过去的几十年中，研究人员已经成功地将一些与水稻抗病性相关的基因导入水稻中，从而获得一些抗病性转基因水稻。其中，双价基因是一类可以通过同时表达两种不同的抗病基因的转基因水稻。本文介绍了一个关于转双价基因SFL-Bchi水稻的中期研究报告。该研究旨在通过转基因技术，将来自水稻和水稻外基因库的两个不同的抗病基因组合成一个双价基因，并将其导入水稻中，从而获得一个具有抗稻瘟病功能的转基因水稻。本文将分别介绍该研究的实验方法、研究进展和初步结果。二、实验方法1.基因构建该研究设计了一个双价基因SFL-Bchi，其中SFL基因来自水稻基因库，Bchi基因来自桉树基因库。该两个基因分别与pCAMBIA1391Z载体中的双35S启动子和nos终止子相组合，构成了双价基因SFL-Bchi转录单元（TU）。2.农杆菌介导转化基于十分之一MS培养基的愈伤组织培养技术，取靶表达载体SFL-Bchi和构建用载体pCAMBIA1300，以比例1:1的摩尔质量配对混合，经梯度稀释，使用农杆菌介导法转化水稻卡尔普3号品种愈伤组织。3.分子鉴定利用PCR和Southernblot方法对转化植株的基因型进行分析，以筛选出目标基因。4.抗性鉴定利用米稻瘟菌和稻红叶霉菌进行抗性鉴定，以检测转化植株的抗病性。同时，采用ELISA法分析转化水稻SFL-Bchi中对应蛋白的表达情况。三、研究进展和初步结果1.基因构建本研究成功合成了SFL和Bchi基因的双价基因SFL-Bchi。PCR验证结果显示，SFL-Bchi转录单元已成功插入载体。2.农杆菌介导转化本研究采用梯度稀释法将SFL-Bchi载体和转座子载体pCAMBIA1300以1：1摩尔比混合，并利用农杆菌介导法转化水稻卡尔普3号品种愈伤组织。经过初步筛选和连锁遗传分析，记录了50个阳性转化株。3.分子鉴定对50个阳性转化株进行PCR分析，得到SFL-Bchi在水稻细胞中的存在验证。对16个的PCR阳性转化株进行Southernblot分析，结果表明，SFL-Bchi基因在转化植株的基因组DNA中出现。4.抗性鉴定本研究在自然和人工条件下分别利用稻瘟病菌和稻红叶霉菌进行抗性鉴定和ELISA检测，得到某些转化株的抗病率超过90%。四、结论与展望本研究成功构建了SFL和Bchi基因的双价基因SFL-Bchi并将其导入水稻中，并通过PCR和Southernblot方法验证了转化植株中SFL-Bchi的存在，同时也通过稻瘟病菌和稻红叶霉菌对转化水稻的抗性进行了验证。尽管还

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