林业生物技术复习资料

林业生物技术复习资料一、概念与名词1、植物离体快速滋长——又称微快繁，简称微繁，应用植物细胞的“全能性”理论，在无菌前提下，把离体的植物器官（如根、茎、叶、花、果实、种子等）、组织（如花药、胚珠、形成层、皮层、胚乳等），放在人工操纵的情形中，使其分化、滋长，在短时刻内产生大年夜量遗传性一致的完全新植株的技巧。是应用植物组织培养技巧进行的一种养分滋长方法，是惯例养分滋长方法的一种扩大与延长。2、试管外生根技巧——试管外生根技巧是指将组织培养茎芽的生根引诱与驯化培养结合在一路，直截了当将茎芽扦插到试管外有菌情形中，边引诱生根边驯化培养。该方法舍弃了组织培养苗在试管内生根这一环节，不仅躲开了瓶内生根难的问题，同时也大年夜大年夜缩短了育苗周期和节俭了育苗成本。3、林业生物技巧——应用天然科学及工程学道理，依附丛林植物、动物、微生物作为反响器将物料加工转化，范畴化临盆和供给人们所需的生态情形、生物质产品和公益性办事的科学技巧。（P8）4、细胞全能性——是指植物细胞具有发育成一个完全植株的全部遗传信息，在恰当前提下能够或许形成完全植株。（P26）5、组织培养——组织培养是指将植物的形成层组织、分生组织、表皮组织、薄壁组织和各类器官组织以及愈伤组织进行离体培养的技巧。6、胚珠培养——胚珠培养是将授粉的子房在无菌前提下解剖后，取胚珠置于培养基中培养的过程。有时也把胚珠连同胎座一路取下来培养。7、离体叶的培养——在天然界，专门多植物的叶具有强大年夜的再生才能，能从叶片产生不定芽的植物，离体叶培养指包含叶原基、叶柄、叶鞘、叶片、子叶在内的叶组织的无菌培养。它大年夜多经脱分化形成愈伤组织，再由愈伤组织分化出茎和根。个中叶片培养是一个典范的代表。8、植物细胞工程——植物细胞工程是植物生物技巧的一个重要构成部分，是在离体培养前提下，在细胞程度上对植物原料进行遗传操作的技巧，即对植物体的任何一个部分（器官、组织、细胞、原生质体）进行离体引诱使其称为完全植株的技巧。9、外植体——外植体指植物组织培养顶用来进行无菌培养的离体材料，可因此器官、组织、细胞和原生质体等。10、细胞悬浮培养——细胞悬浮培养是将游离的植物细胞按必定的细胞密度，悬浮在液体培养基中进行培养增殖的技巧。11、花粉培养——花粉培养也叫小孢子培养，是从花药平分别出花粉粒，使之成为分散的或游离的状况，经由过程培养使花粉粒脱分化，进而发育成完全植株的过程。12、原生质体——原生质体是指植物细胞中除去细胞壁具有细胞全能性的裸露部分。13、转基因林木——转基因林木是指应用基因工程技巧改变基因组构成，用于林业临盆或者林产品加工的丛林植物。包含转基因丛林植物、转基因丛林植物产品、转基因丛林植物的直截了当加工品、含有转基因丛林植物及其产品的其它相干产品。14、植物生物反响器技巧——植物生物反响器技巧是指应用植物体系，包含植物细胞、组织、器官甚至植物个别为工厂临盆具有贸易价值的生物成品的方法。15、引诱抗病性——引诱抗病性是指应用生物因子或非生物因子处理植物，以改变植物对病害的反响，并产生局部或体系抗性的现象。16、反义技巧——反义技巧是指依照碱基互补道理，人工合成或生物体合成特定互补的DNA或RNA片段，以克制或封闭某些基因表达的技巧。17、玻璃化——实践注解，当植物原料赓续地进行离体滋长时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会呈半透亮水迹状，这种现象平日称为玻璃化。18、基因工程——基因工程又称为重组DNA技巧，是按着人们的科研或临盆须要，在分子程度上，用人工方法提取或合成不合生物的遗传物质（DNA片段），在体外切割，拼接形成重组DNA,然后将重组DNA与载体的遗传物质从新组合，再将其引入到没有该DNA的受体细胞中，进行复制和表达，临盆出相符人类须要的产品或制造出身物的新性状，并使之稳固地遗传给下一代。19、驯化——驯化是指试管苗移植前可将培养瓶移到天然光照下锤炼3-10d，让试管苗接收天然光的照耀，感触感染天然温度的日夜温差现象，使其结实，然后再开瓶移植，经由较低温、湿度的处理，以适应天然温、湿度前提。20、脱毒苗——脱毒苗是指不含该栽种物的重要损害病毒，即经检测重要病毒在植物内的存在表示为阴性反响的苗木。二、长短与选择1、林业生物技巧应用范畴重要包含：优质、高抗、速生林木良种培养，良种苗木工厂化繁育，有益天然产特离体临盆，林业蛋白质工程、酶工程、能源生物技巧、情形生物技巧、药材生物技巧等其它林业生物技巧。2、植物细胞全能性的实现需通过细胞脱分化和再分化过程。3、依照原由不合，植物细胞的逝世亡分为病理性逝世亡和心理性逝世亡。4、器官培养法度榜样包含：无菌外植体的获得、初代培养物的建立、培养物形状产生、植株再生等环节。5、植物养分器官培养重要包含：根段培养、茎段培养、叶培养。6、植物滋长器官培养重要包含：花器官培养、幼果培养、种子培养。7、原生质体培养的体细胞变异大年夜于细胞培养的变异，而细胞培养的变异又大年夜于组织器官培养的变异。8、优良变异的选择方法有：直截了当选择法、间接选择法。9、细胞变异的类型包含：自发产生的变异、诱发产生的变异。10、决裂素/进展素的比例是操纵芽和根形成的一个重要前提，比例高时产生芽，比例低时产生根。11、由完全的植物器官分别单细胞，叶片是分别单细胞的最好材料。12、成功的悬浮细胞培养体系必须知足三个前提：悬浮培养物分散性优胜，均一性好，细胞进展灵敏。13、植物细胞培养可分为：单细胞培养、单倍体培养、原生质体培养。14、常用的植物进展调剂剂有两大年夜类：进展素类，如2,4-D、IAA、NAA等；细胞冲动素类，如6-BA、TDZ和ZT。15、原生质体培养基的全然成分与组织培养基类同，只是添加了渗入渗出压稳固剂。多半情形下所用的培养基是MS、B5或它们的衍生培养基。16、花草基因工程研究的内容重要有：喷鼻味基因工程、花发育基因工程、花草保鲜基因工程、花草株型基因工程、花草抗性基因工程等五大年夜方面。17、自1986年第一株转基因杨树问世以来，不合树种的转基因工作接踵开展。18、关于植物悬浮细胞培养的生物反响器应相符：合适的氧传递、优胜的流淌性、低的剪切力等要求。19、依照引诱子的来源可将其分为生物因子或非生物因子，生物因子包含真菌、细菌、病毒，还包含一些病原体的非致病性心理小种、选择过的非病原体、弱致病性病原体、强致病性病原体以及病原体和非病原体的毒性产特；非生物因子包含一些物理和化学因子，如毁伤、电击、高温、紫外线、重金属、有机化合物、无机化合物等。20、从实践得知有些植物在B5培养基上进展更合适，如双子叶植物专门是木本植物。21、母液是欲配制液的浓缩液，如许不只能够包管各物质成分的精确性及配制时的快速移取，同时还便于低温保藏，一样母液配成比所需浓度高10-100倍。22、常用的灭菌方法可分为物理的和化学的两类，即：物理方法如干热(烘烧和灼烧)、湿热(常压或高压蒸煮)、射线处理(紫外线、超声波、微波)、过滤、清洗和大年夜量无菌水冲刷等方法；化学方法是应用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏儿、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理。23、植物离体培养常用的重要糖类是蔗糖。24、无菌操作接种时，在操作前和操作时代要经常用于擦拭双手和台面的酒精浓度是70%。25、根、茎、叶、花、果、木质部、形成层、韧皮部、中柱鞘等植物体细胞均可作为培养材料，引诱形成完全植物体。（√）26、以小孢子和大年夜孢子细胞等植物性细胞为培养材料，可引诱形成完全植物体，该植物体叫单倍体，能正常开花结实。（╳）27、植物细胞培养过程中，温度、光照（如紫外线、湿度、通气状况）均会阻碍培养细胞的全能性。（√）28、愈伤组织是尚未分化的原始细胞团，其心理年纪几乎为零。（√）29、每种激素必须零丁配成母液，浓度一样配成1mg／ml。（√）30、一样来讲，继代时刻越长、继代次数越多，细胞变异的几率就越大年夜。（√）31、茎尖培养与脱毒中，可否培养成功关键在于培养基。（×）32、平板培养是花粉培养的一种方法。（√）33、原生质体培养的合适温度为25-30℃。（√）34、情形的相对湿度能够阻碍培养基的水分蒸发，一样要求80％-90％的相对湿度。（×）35、无病毒植株实际应用中最大年夜的问题并非反复感染。（×）36、机械法分别原生质体的重要缺点是原生质体的产量专门低、方法繁琐辛劳。（√）37、植物组织培养形成的愈伤组织进行培养，又能够分化形成根、芽等器官，这一过程称为脱分化。（×）38、植物组织培养的培养基PH值都在5.8－6.0之间。（×）39、花粉培养是将花粉从花药中游离出来，成为分散或游离态进行培养。（√）40、单细胞培养中选择优良细胞株常用平板培养法。（√）三、简答与问答1、植物离体快速滋长的阻碍身分有哪些？答：1、外植体（1）外植体的基因型，（2）外植体的类型，（3）外植体的来源，（4）外植体的心理状况，（5）外植体的大年夜小，（6）极性，（7）继代培养次数2、芽的增殖门路3、培养基（1）全然培养基，（2）碳源，（3）氮源，（4）植物激素，（5）培养基中其它因子4、培养前提（1）光照，（2）培养温度，（3）容器内气体成分，（4）湿度2、植物离体快速滋长的常见问题有哪些？答：1、污染，2、外植体褐变3、试管苗的玻璃化4、试管苗移栽的成活率5、遗传稳固性3、植物离体快速滋长中外植体褐变的阻碍身分有哪些？若何克服？答：阻碍外植体褐变的身分有：（1）植物种类和品种（基因型），含有单宁、酚类化合物、多酚氧化酶活性大年夜、色素含量多的植物较易产生如苹果。（2）外植体的心理状况，成年期＞幼龄期，老熟组织＞幼嫩组织，夏季＞春冬季。（3）取样时刻欠妥，培养时刻过长，长时刻不继代。（4）培养基，无机盐浓度过高，细胞决裂素过高。（5）温度，过高（6）光照，高光。（7）外植体受损程度，受伤严峻，消毒剂损害。克服方法有：（1）外植体选择的时刻、季候、部位，遮光处理。（2）合适的培养基。（3）合适的培养前提。（4）参加抗氧化剂，应用VC，PVP，活性碳。（5）缩短继代时刻。（6）削减外植体受损程度及合理应用消毒剂。4、林业生物技巧的全然特点是什么？（P8-9）答：（1）林业生物技巧是以丛林群落（丛林植物、动物和微生物）为生物反响器进行产品临盆。（2）林业生物技巧为人类供给生态产品、生物质产品和公益办事。（3）林业生物技巧克服物种间生殖隔离，以各类来源的目标基因定向培养林木新品种。5、花器官培养的意思有哪些？答：花器官培养的意义有：（1）经由过程离体花芽培养可明白得整体植物和内源激素在花芽性别决定中所起的感化；（2）能够明白得花器官各部分对果实和种子发育的感化；（3）内、外源激素在果实种子发育过程中的调控感化；（4）临盆上也可用于名贵品种的扩大年夜滋长。6、简述种子培养的技巧答：种子培养技巧包含：（1）种子灭菌：种皮厚或不饱满的种子，宜用0.1％升汞消毒10-20min。幼嫩的或发育不全的种子，宜用饱和漂白粉消毒15-30min。若种子上有绒毛或蜡质，应先用95％酒精或吐温80处理，进步消毒后果。对壳厚难萌发的种子，可去壳培养。（2）培养基：A.促种子萌发用MS培养基，加或不加激素，引诱愈伤组织则可参加6-BA或2,4-D。B.无胚乳种子（棉花、大年夜豆、花生、向日葵、番薯、马铃薯、苹果、烟草、薄荷）应恰当加进展素。C.一样糖浓度为1-3%。D.打破休眠可加GA，或在接种前浸种处理。（3）接种：把种子按每瓶3-5粒放人培养瓶中，平均分列。培养温度20-28℃，培养光强为1000-20001x，天天光照时刻10-12h。7、简述组培中细菌污染的症状与致因答：组培中细菌污染的症状是：菌落呈黏液状或浑浊的水渍状痕或显现泡沫的发酵状等情形，色彩多为白色，与培养基别处界线清晰，接种后1~2天发明。引起细菌污染的可能缘故：外植体、培养基灭菌不完全、操作欠妥、接种对象、呼吸、不洁净的手、室内不洁净等。8、简述组培中真菌污染症状与致因答：组培中真菌污染的症状是：菌落多为黑色，绿色，黄色，白色的绒毛状，棉絮状，与培养基别处界线不清晰，接种后3~10天发明。引起真菌污染的可能缘故：四周情形、空气污染、超净工作台、操作欠妥、器皿瓶口大年夜等。9、简述细胞悬浮培养的长处答：细胞悬浮培养的长处重要有：能大年夜量供给比较平均一致的细胞，细胞增殖的速度比愈伤组织快，合适大年夜范畴培养，成为细胞工程中专门的家当。10、简述植物组织培养所需养分与情形前提答：养分前提包含：无机养分（大年夜量元素、微量元素），有机养分（维生素类、肌醇、氨基酸、天然复合物），植物进展调剂物质，琼脂，碳源，抗生物质，抗氧化物，活性炭等。情形前提包含：温度，光照，湿度，渗入渗出压，pH值，气体。11、简述 一个标准的组织培养实验室必须具备的前提 答：一个标准的组织培养实验室必须具备的以下前提：第一、清洗和储存玻璃器皿、塑料器皿和其他实验器皿； 第二、培养基的配制、灭菌和储存； 第三、植物原料的无菌操作； 第四、可控温度、光照、湿度的前提，以便对材料进行体外培养； 第五、培养物进展发育过程的显微不雅察。12、简述MS培养基的重要特点 答：MS培养基是1962年由Murashige和Skoog为培养烟草细胞而设计的。其重要特点是：无机盐和离子浓度较高，为较稳固的均衡溶液；其养分的数量和比例较合适，可知足植物的养分和心理须要；它的硝酸盐含量较其他培养基为高，广泛地用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培养，后果优胜；有些培养基是由它演变而来的。13、简述继代培养时材料玻璃化的解决方法答：继代培养时材料玻璃化的具体解决方法为： ①增长培养基中的溶质程度，以降低培养基的水势； ②削减培养基中含氮化合物的用量； ③增长光照； ④增长容器通风，最好进行C02施肥，这对减轻试管苗玻璃化的现象有明显的感化； ⑤降低培养温度，进行变温培养，有助于减轻试管苗玻璃化的现象产生； ⑥降低培养基中细胞决裂素含量，能够推敲参加适量脱落酸。14、简述基因工程有凸起的特点：答：基因工程有两个重要特点：第一是可把来自任何生物的基因转移到与其毫无关系的任何其他受体细胞中，是以能够实现按照人们的欲望，改革生物的遗传特点，制造出身物的新性状；第二是某一段DNA可在受体细胞内进行复制，为预备大年夜量纯化的DNA片段供给了可能，拓宽了分子生物学的研究范畴。四、实践与案例1、试述进步试管苗驯化移栽成活率的方法答：试管苗驯化移栽成活率低的缘故：（1）内因：一样地，试管苗细长、黄化、根系发育不良者移栽成活率低。试管苗叶片浓绿、茎细小、根系蓬勃及长势好者移栽成活率高。（2）外因：光、温、水、气、湿度、有无杂菌、治理技巧及工作人员的义务心。进步试管苗驯化移栽成活率的方法：（1）尽力进步试管苗的质量，要求：有针对性调剂培养基配方及培养前提。（2）及时出瓶驯化，幸免苗老化。（3）出苗时能够推敲应用生根粉。（4）选用合适的基质，制造合适的培养前提。（5）按期喷施养分液及杀菌剂，防虫防病；结合浇水浇灌养分液。用自来水浇灌时可不消加微量元素，一样一周一次，初期浓度低0.15-0.2％，后期可增长到0.3％。逐步延长光照时刻，增长光照强度。同时每隔7-10天瓜代喷1000倍的百菌清或灭枯净。（6）进步工作人员的义务心。2、试述茎尖培养的方法及步调答：茎尖培养的步调有：取材——材料处理及消毒——接种——培养——驯化移栽（1）取材①直截了当取材：在进展旺盛、枝条结实、无病的母株上选进展不久、杂菌污染少的顶梢（1－2cm）（取前可喷杀菌药，可顶芽或侧芽）。②从试管苗猎取。（2）材料处理及消毒将采集到的茎尖切成0.5-1.0cm长→→去叶（休眠芽预先剥除鳞片）→→流水冲刷2-4h→→75％的酒精中处理30s→→稀释20倍的次氯酸钠中浸5-8min(取自老枝条上的可恰当延长时刻）→→用无菌水冲刷数次，预备接种。（3）接种接种前再剥掉落一些叶片，使茎尖0.5cm→→接种。要求：随切随接，动作灵敏。亦可将切下茎尖材料在1－5%VC液中浸一下。（4）培养1）培养基①全然培养基MS、White、B5、Heller培养基。②蔗糖作碳源后果好，浓度2－3%。③激素（2，4-D，IAA，NAA）和有机添加物有明显阻碍。但激素浓度以0.1mg/L为宜，不要太高。茎尖进展状况：进展太慢：茎尖不增大年夜→→变绿→→细胞逐步老化→→休眠。缘故:进展素浓度太低；温度过低或过高。进展太快：茎尖灵敏增大年夜→→愈伤组织→→损掉成苗才能。缘故:进展素浓度过高；光照太弱或温度太高。进展正常：茎尖基部稍增大年夜并形成少量愈伤组织，茎尖色彩逐步变绿，并伸长，叶原基发育成可见的小叶，进而形成小苗。2）初代培养前提：天天光照16h/d，照度1500-2000Lx，温度25±2℃。3）继代培养：茎尖长成的新梢→→切成小段→→增殖培养基中→→1个月阁下→→新梢又可切成小段→→再转入新培养基→→建立和保持了茎尖无性系。（即微型扦插）继代培养可用MS培养基。4）引诱生根：采取I／2MS培养基参加必定的进展素类调剂物质，如NAA、IBA等。新梢基部浸入50或100mg/l的IBA溶液处理4-8h，然后转移到无激素的生根培养基中。5）驯化移栽入土：在生根培养1个月阁下→→进展结实而蓬勃的根系→→炼苗→→移栽→→治理（温、光、湿、气）。3、试述植物离体培养过程中无菌操作的留意事项答：无菌操作留意事项重要有：（1）实验器具和材料的预备。（2）用75%的酒精擦拭超净工作台，然后室内及超净工作台用紫外灯杀菌20min-30min。（3）关紫外灯、打开风机，过5-10min进入缓冲间，以75%洗手和手臂，改换无菌服、帽子和口罩。进入接种室。（4）用70－75％的酒精拭擦台面并消毒双手。实验器具也应当用酒精消毒。点燃酒精灯，将金属器械在其火焰上灼烧，冷却待用。（5）取流水冲刷（至少30min）过的外植体，用必定的消毒剂浸泡消毒，用无菌水冲刷3~4次，放入无菌培养皿中，置于酒精灯火焰下方，用无菌的接种器械进行分别、切割或其他处理。（6）打开培养瓶，瓶口在灯焰处扭转灼烧，用镊子将培养材料置于培养基上，灼烧镊子放回，灼烧瓶口，盖上瓶塞。（7）整顿台面。4、红叶石楠试管苗驯化和移栽基质配制答：基质的全然要求是：松散通气、合适的保水性、洁净卫生。基质的成分比例是：V蛭石/V珍宝岩/V泥炭=6/3/1。成活率可达95