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文档简介

高三生物pcr技术复习试题高三生物PCR技术复习试题一、知识回顾PCR技术是一种体外扩增DNA的技术,可在短时间内将目的基因扩增上百万倍,达到肉眼可见的量。其具体过程为:首先,将DNA加热使其双链分开;然后将人工合成的一段单链核苷酸即DNA引物黏附到DNA单股螺旋上;之后按照引物就能够复制出DNA来,重复放大50次后就可以制成10亿个基因。在PCR放大过程中的关键是利用耐热DNA聚合酶使少量的DNA在短期内即能扩增数百万倍,便于分析、检测。二、试题精练1、PCR技术是一种DNA的扩增技术。在一定条件下,加入模板DNA、DNA聚合酶、dATP、dCTP、dGTP、dTTP可以实现DNA的扩增。据此判断不合理的是C.DNA扩增过程未加解旋酶,可以通过先适当加温的方法破坏氢键,使模板DNA解旋2、PCR技术是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述三十多次循环:95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性(引物与DNA模板链结合)→72℃下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是:()D.PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高3、下列有关PCR技术的叙述,不正确的是:()C.PCR技术需在体内进行4、PCR技术扩增DNA,需要的条件是()A、①②③④5、在基因工程中,将目的基因放入PCR仪中扩增4代,需要将胞嘧啶脱氧核苷酸的个数至少设为多少?A.640B.8100C.600D.8640正确答案:D6、对禽流感的确诊,先用PCR技术将标本基因大量扩增,然后利用基因探针,测知待测标本与探针核酸的碱基异同。下图中,哪份标本最有可能确诊为禽流感?(图片省略)A.MB.NC.QD.W正确答案:C7、某考古学家在西伯利亚泰加林地区的冰中,发现了一种冰冻的已灭绝的巨大动物的肌肉。他想了解该巨型动物的DNA与现今印度大象的DNA的相似性,于是做了如下检测工作,正确的操作步骤及顺序是什么?①通过PCR技术扩增巨型动物和大象的DNA②降低温度,检测处理后形成的杂合DNA双链区段③把巨型动物的DNA导入大象的细胞中④在一定的温度条件下,将巨型动物和大象的DNA水浴共热正确答案:B8、聚合酶链式反应(PCR技术)是在实验室中以少量样品DNA制备大量DNA的生化技术,反应系统中包括微量样品DNA、DNA聚合酶、引物、四种脱氧核苷酸及ATP等。反应中新合成的DNA又可以作为下一轮反应的模板,故DNA数以指数方式扩增。请回答以下问题:(1)某个DNA样品有1000个脱氧核苷酸,已知它的一条单链上碱基A:G:T:C=1:2:3:4,则经过PCR仪五次循环后,将产生多少个DNA分子,其中需要提供胸腺嘧啶脱氧核苷酸的数量至少是多少个?(2)分别以不同生物的DNA样品为模板合成的各个新DNA之间存在差异,这些差异是什么?(3)请指出PCR技术与转录过程的三个不同之处。正确答案:(1)经过PCR仪五次循环后,将产生326200个DNA分子,其中需要提供胸腺嘧啶脱氧核苷酸的数量至少是8640个。(2)分别以不同生物的DNA样品为模板合成的各个新DNA之间存在碱基(脱氧核苷酸)的数目、比例和排列顺序不同。(3)PCR技术以DNA的两条单链为模板合成子代DNA,转录以DNA的一条单链为模板合成RNA;PCR技术的原料为脱氧核苷酸,转录的原料是核糖核苷酸;二者反应时的催化酶不同。资料显示,近十年来,PCR技术(DNA聚合酶链式反应技术)已成为分子生物实验中的常规手段。其原理是利用DNA半保留复制的特性,在试管中进行DNA的人工复制,将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍,使分子生物实验所需的遗传物质不再受限于活的生物体。加热至94℃的目的是使DNA样品的键断裂,这一过程在生物体细胞内是通过酶的作用来完成的。通过分析得出新合成的DNA分子中,A=T,C=G,这个事实说明DNA分子的合成遵循碱基互补配对原则。新合成的DNA分子与模板DNA分子完全相同的原因是DNA分子中独特的双螺旋结构,或以模板DNA分子的一条链为模板进行半保留复制。复制过程中严格遵循碱基互补配对原则。通过PCR技术使DNA分子大量复制时,若将一个用N标记的模板DNA分子(第一代)放入试管中,以N15标记的脱氧核苷酸为原料,连续复制到第五代时,含N标记的DNA分子单链数占全部DNA总单链数的比例为1/16。PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利,而且改进了检测细菌和病毒的方法。若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒,可以用PCR扩增血液中的病毒核酸。另一方面,甲图中的DNA决定某一多肽链中的酪氨酸和丙氨酸过程示意图,乙图示样品DNA经PCR技术扩增,可以获取大量DNA克隆分子。甲图中含有8种核苷酸,丙氨酸的遗传密码子是GCC。该图表示了DNA中遗传信息的转录和翻译过程。有一种贫血症是血红蛋白分子的一条多肽链上,一个酪氨酸被一个苯丙氨酸所替代造成的。此种贫血症的根本原因是基因突变,即发生了DNA的碱基序列或基因结构的改变。乙图的“PCR”与人体内的DNA复制相比有何特殊之处?离体条件,需要高温,高温酶是PCR技术与人体内DNA复制的主要区别。现在要通过“PCR”得到甲图中DNA片段的1024个克隆片段,则至少要向试管中加入3069个腺嘌呤脱氧核苷酸。1.DNA分子复制所需的条件是模板、原料、能量和酶。在细胞核中,DNA分子复制需要进行解旋。95℃条件下变性30s的目的是使DNA分子解旋。反应体系中的缓冲液相当于细胞核中的核液。2.如果反应体系中加入了100个模板DNA分子,则经过30个循环后,DNA分子的数量将达到23000个。1.PCR技术能把某一DNA片段进行扩增,是依据DNA的复制原理。利用PCR技术扩增DNA片段时用到的“体外酶”通常是指DNA聚合酶。2.电泳过程中分子的迁移率除与本身所带电荷的多少有关以外,还受到分子的大小和形状的影响。3.由图1可推知该蛋白质由12种氨基酸构成,该蛋白质水解时需要的水分子数是47个。4.根据图2中DNA指纹图谱的比较,F1最可能是该小孩的生物学父亲。现在我们使用了三种不同的限制性内切酶来剪切一段长度为6.2kb的线状DNA,并通过凝胶电泳将各DNA

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