DB37-T 4485-2021 玉米种子活力测定 加速老化法、抗冷法、冷浸法、破裂法

65.020.20CCS

B

2137 DB

37/T

4485—2021玉米种子活力测定 加速老化法、抗冷法、冷浸法、破裂法Maize

seed

test

by

accelerated

test,

test,

soaking

test 山东省市场监督管理局 发

布DB

37/T

4485—2021 前言

................................................................................

III1

...............................................................................

12 规范性引用文件

.....................................................................

13 术语和定义

.........................................................................

14 缩略语

.............................................................................

25 测定原理

...........................................................................

25.15.25.35.4

加速老化法

.....................................................................

2抗冷法

.........................................................................

2冷浸法

.........................................................................

2破裂法

.........................................................................

36 测定方案

...........................................................................

36.16.26.36.4

总则

...........................................................................

3样品

...........................................................................

3测定平台

.......................................................................

3测定条件

.......................................................................

37 试材和设备

.........................................................................

37.1 试材

...........................................................................

37.2 设备

...........................................................................

38 试验步骤

...........................................................................

48.18.28.38.4

加速老化法

.....................................................................

4抗冷法

.........................................................................

5冷浸法

.........................................................................

6破裂法

.........................................................................

79 试验数据处理

.......................................................................

89.19.29.39.49.5

加速老化法

.....................................................................

8抗冷法

.........................................................................

8冷浸法

.........................................................................

8破裂法

.........................................................................

9重新试验

.......................................................................

910 结果计算和表示

...................................................................

1010.1 加速老化法、抗冷法、冷浸法

...................................................

1010.2 破裂法

.......................................................................

1111 结果报告

.........................................................................

11附录

A（资料性） 玉米种子活力测定（加速老化法、抗冷法、冷浸法）发芽试验原始记录表

....

12附录

B（资料性） 玉米种子活力测定（破裂法）发芽试验原始记录表........................

13附录

C（资料性） 玉米种子活力测定结果报告单..........................................

14DB

37/T

4485—2021参考文献

.............................................................................

15IIDB

37/T

4485—2021 本文件按照GB/T

—《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由山东省农业农村厅提出并组织实施。本文件由山东省农业标准化技术委员会种植业分技术委员会归口。IIIDB

37/T

4485—2021 1 范围本文件规定了玉米(Zea

mays

L.)测定方案、测定程序和结果报告。本文件适用于普通玉米品种的种子活力测定，亦可作为特用玉米品种的种子活力测定推荐方法。2规范性引用文件文件。GB/T

农作物种子检验规程 扦样GB/T

农作物种子检验规程 发芽试验GB/T

8170数值修约规则与极限数值的表示与判定GB/T

26462 种子发芽纸3 术语和定义GB/T

界定的以及下列术语和定义适用于本文件。3.1种子活力 seed

vigour在广泛的田间条件下，决定种子迅速整齐出苗和长成正常幼苗潜在能力的总称。3.2种子批 seed

同一来源、同一品种、同一年度、同一时期收获和质量基本一致、在规定数量之内的种子。[来源：GB/T

3543.2—，3.3送验样品 submitted

送到种子检验机构检验、规定数量的样品。[来源：GB/T

3543.2—，3.4试验样品（简称“试样”）

working

sample在实验室中从送验样品中分出的部分样品，供测定某一检验项目之用。[来源：GB/T

3543.2—，3.5加速老化测定

aging

test发芽率。DB

37/T

4485—20213.6抗冷测定 cold

test将试样低温发芽一定时间后转适温发芽试验，定期统计正常幼苗数，计算发芽率。3.7冷浸测定 cold

soaking

test将试样低温水浴处理后进行标准发芽试验，统计正常幼苗数，计算发芽率。3.8破裂测定 rupture

test在特定发芽温度下，定时统计试样种子已发生果种皮破裂和胚根鞘破裂的种子粒数，计算破裂率，包括果种皮破裂率、胚根鞘破裂率、果种皮胚根鞘破裂率和果种皮未破裂率。4 缩略语下列缩略语适用于本文件。AAT:

加速老化测定（

Ageing

Test）CT:

抗冷测定（Cold

Test）CST:

冷浸测定（Cold

Test）RT:

破裂测定（Rupture

Test）TR:

果种皮破裂（

）CR:

胚根鞘破裂（

）TU:

果种皮破裂（

Unrupture）TRP:

果种皮破裂率（Testa-pericarp

Rupture

Percentage）CRP:

胚根鞘破裂率（Coleorhiza

Rupture

）TRCRP：果种皮胚根鞘破裂率（

Percentage）TUP：果种皮未破裂率（

Unrupture

Percentage）5 测定原理5.1 加速老化法因此，加速老化法能较好地预测田间出苗率和种子耐贮藏性。5.2抗冷法春田间逆境条件，观察种子发芽成苗的能力。高活力种子经一定条件的低温处理后仍能形成正常幼苗，而低活力种子则不能形成正常幼苗甚至丧失生活力。因此，抗冷法能较好地预测田间出苗率。5.3 冷浸法地预测田间出苗率。DB

37/T

4485—20215.4 破裂法萌发事件。因此，破裂法能快速反映种子活力状况，较好地预测田间出苗率。6 测定方案6.1总则定、冷浸测定）和低温发芽、萌发事件统计、数据分析的程序（破裂测定）进行测定。按规定要求填报测定结果，测定报告应注明测定方案所规定的条件。6.2 样品送验样品为玉米种子，重量应不低于1

g。6.3 测定平台人工气候箱、光照培养箱、发芽室或其它能够精准控温的发芽环境。6.4 测定条件种子活力测定应在有利于正确实施测定的控制条件下进行，包括但不限于下列条件：——种子检验员具备熟悉所使用测定方法的知识和技能；——所有仪器与使用的技术相适应，并已经过定期维护、验证和校准。7 试材和设备7.1 试材7.1.1老化盒：

mm×

mm×30

mm

等规格。7.1.2 尼龙网袋：150

mm×100

、400

mm×150

等规格。7.1.3 置种板：可辅助玉米种子置床，每次可平行或交错置种

7.1.4 数种板：可辅助数取一定数目的玉米种子。7.1.5

mm×250

mm

mm×

mm

5

mm铺设。7.1.6 自封袋：

450

mm×

mm）等规格。7.1.7发芽盒（盘）：450

mm×

mm×90

等规格。7.1.8 发芽纸：GB/T

26462，

mm×

等规格。7.1.9 试剂药品：次氯酸钠溶液等。7.1.10 笔、酒精、砂子、喷壶等。7.2 设备7.2.1 人工老化处理设备：种子老化箱等。7.2.2 发芽设备：人工气候箱、光照培养箱、发芽室、恒温循环槽或其它能够精准控温发芽的设备。DB

37/T

4485—20217.2.3 消毒干燥设备：高压蒸汽灭菌锅、电热鼓风干燥箱等。8试验步骤8.1 加速老化法8.1.1试样准备粒，4

%的次氯酸钠溶液浸泡消毒10

，消毒后用无菌蒸馏水冲洗3遍，拭去种子表面浮水，备用。包衣种子可先柔性清洗后消毒，或无须消毒处理。8.1.2试验材料准备发芽纸：将发芽纸

1

℃高压蒸汽灭菌20

后，烘干备用；发芽盒（盘）：将发芽盒（盘）清洗干净后，用75

%的酒精溶液擦拭消毒，风干备用。8.1.3加速老化测定45

于98

%72

h

用。2380

mm×

mm

×

mm×90

mm2

cm～

cm。种子置床后，加盖1张润湿的发芽纸，盖上发芽盒（盘）盖，贴好标签并标注品种名称、样品编号、重复次数、置床时间等基本信息，放入人工气候箱。按照GB/T

3543.4，25

0.5

℃标准发芽7

d统计正常幼苗数，计算发芽率。75

%2

mm×

mm纸边距5

cm1关信息后，垂直放入人工气候箱（纸卷种孔端朝下）。按照GB/T

3543.4，25

℃±

℃标准发芽7

d统计正常幼苗数，计算发芽率。同时按照GB/T

，对未老化处理种子进行标准发芽测定，25

℃±

℃标准发芽7

d统计正常幼苗数，计算发芽率。8.1.4 检查管理36

h和发芽4

d时分别检查1次老化和发芽环境，若有问题及时进行相应维护。老化处理：温度和湿度检测；温度保持在45

℃±

℃范围，相对湿度不低于98

%。发芽床检查：发芽床始终保持湿润。发芽温度检查：温度保持在25

℃±

℃范围内。种子检查：发霉的种子应及时取出洗涤去霉。当发霉种子超过5

%时，应更换发芽床，以免霉菌因素影响测定结果。如发现腐烂无生活力的种子，应及时去除并做好相应记载。8.1.5 数据记录DB

37/T

4485—2021按照

3543.4中正常幼苗、新鲜不发芽种子、硬实、不正常幼苗和死种子的鉴定标准进行数据统计，根据正常幼苗数，计算发芽率。8.2 抗冷法8.2.1 试样准备粒，4

%的次氯酸钠溶液浸泡消毒10

，消毒后用无菌蒸馏水冲洗3遍，拭去种子表面浮水后，备用。包衣种子可先柔性清洗表面包衣后消毒，或无须消毒处理。8.2.2 试验材料准备发芽纸：将发芽纸

1

℃高压蒸汽灭菌20

后，烘干备用。发芽盒（盘）：将发芽盒（盘）清洗干净后，用75

%的酒精溶液擦拭消毒，风干备用。130

℃±3

℃高温烘干灭菌4

h孔径

mm筛子过筛，除杂质，备用。8.2.3 抗冷测定按采取卷纸、纸砂上或纸砂间置床方式对玉米种子进行抗冷测定。75

%2

mm×

mm距5

cm1

℃避光发芽7

d25

℃±

℃发芽4

d（

h光暗交替）统计正常幼苗数，计算发芽率。2

mm×255

mm×

mm×90

mm置塑料框架内，整平床面），床厚5

，置种板辅助平行置种，种胚与砂床紧密接触，种孔朝向一致，纸边距5

cm10

℃±

℃避光发芽7

d后，转

0.5

℃发芽4

d（12

h光暗交替）统计正常幼苗数，计算发芽率。

%2380

mm×255

mm5

mm板辅助交错置种，种孔朝向一致，纸边距5

。种子置床后加盖1张润湿的发芽纸，将纸床（或夹样品10

℃±0.5

℃避光发芽7

d后，转25

℃±

℃发芽4

d（12

h光暗交替）统计正常幼苗数，计算发芽率。8.2.4 检查管理在种子发芽期间，应进行适当的检查管理，以维持原有发芽条件。10

℃±

℃发芽4

d和

0.5

℃发芽2

d分别检查1次发芽环境，若有问题及时进行相应维护。发芽床检查：发芽床始终保持发芽床湿润。10

℃±

25

0.5

内。DB

37/T

4485—20215

%以免霉菌因素影响检测结果。如发现腐烂死亡种子，应及时去除并做好相应记载。8.2.5 数据记录按照GB/T

3543.4中正常幼苗、新鲜不发芽种子、硬实、不正常幼苗和死种子的鉴定标准进行数据统计，根据正常幼苗数，计算发芽率。8.3 冷浸法8.3.1 试样准备粒，4

%的次氯酸钠溶液浸泡消毒10

min，消毒后用无菌蒸馏水冲洗3遍，拭去种子表面浮水后，备用。包衣种子可先柔性清洗表面包衣然后消毒，或无须消毒处理。8.3.2 试验材料准备发芽纸：将发芽纸

1

℃高压蒸汽灭菌20

后，烘干备用。发芽盒（盘）：将发芽盒（盘）清洗干净后，用75

%的酒精溶液擦拭消毒，风干备用。8.3.3冷浸测定采取纸间（卷纸）置床方式对玉米种子进行冷浸测定。可以选择置床前冷浸或置床后冷浸。4

℃冷浸处理3

d2

×

mm泡后，置种板辅助交错置种，种孔朝向一致，纸边距5

cm。种子置床后加盖1张润湿的发芽纸，将纸床25

0.5

℃发芽7

d（

h光暗交替）统计正常幼苗数，计算发芽率。2380

mm×255

5

cm14

℃冷浸处理3

d25

℃±0.5

℃发芽7

d（12

h发芽率。8.3.4 检查管理在种子冷浸和发芽期间，应进行适当的检查管理，以维持原有冷浸和发芽条件。冷浸1

d和发芽4

d分别检查1次冷浸和发芽环境，若有问题及时进行相应维护。发芽床检查：发芽床始终保持湿润。发芽温度检查：冷浸温度保持在4

℃范围内，发芽温度保持在25

0.5

℃范围内。种子检查：发霉的种子应及时取出洗涤去霉。当发霉种子超过5

%时，应更换发芽床，以免霉菌因素影响测定结果。如发现腐烂无生活力的种子，应及时去除并做好相应记载。DB

37/T

4485—20218.3.5 数据记录按照GB/T

3543.4中正常幼苗、新鲜不发芽种子、硬实、不正常幼苗和死种子的鉴定标准进行数据统计，根据正常幼苗数，计算发芽率。8.4 破裂法8.4.1 试样准备粒，4

%的次氯酸钠溶液浸泡消毒10

，消毒后用无菌蒸馏水冲洗3遍，拭去种子表面浮水后，备用。包衣种子可先柔性清洗表面包衣然后消毒，或无须消毒处理。8.4.2 试验材料准备发芽纸：将发芽纸

1

℃高压蒸汽灭菌20

后，烘干备用；发芽盒（盘）：将发芽盒（盘）清洗干净后，用75

%的酒精溶液擦拭消毒，风干备用。8.4.3 破裂测定15

℃±

20

0.5

℃。15

℃：置床

h±15

（5

d±15

）统计果种皮破裂种子数、胚根鞘破裂种子数和果种皮未破裂种子数。20

h±15

（3

d±

min裂种子数。2380

mm×

mm

×

mm×90

mm2

cm～2.5

1胚根鞘破裂率。75

%2

mm×

mm面，除去余液和纸间气泡后，置种板辅助交错置种，种孔朝向一致，纸边距5

cm。种子置床后加盖1张和果种皮未破裂种子数，计算果种皮破裂率、胚根鞘破裂率、果种皮胚根鞘破裂率和果种皮未破裂率。8.4.4 检查管理2

d1问题及时进行相应维护。发芽床检查：发芽床始终保持湿润。发芽温度检查：发芽温度保持在选定测定温度（15

℃±

20

℃±0.5

℃）范围内。种子检查：发霉的种子应及时取出洗涤去霉。当发霉种子超过5

%时，应更换发芽床，以免霉菌因素影响测定结果。如发现腐烂无生活力的种子，应及时去除并做好相应记载。耐贮藏性等级85

65

30

29

DB

37/T

4485—20218.4.5数据记录按照表1玉米种子活力测定破裂法鉴定标准对果种皮破裂、胚根鞘破裂和果种皮未破裂事件进行鉴胚根鞘破裂率、果种皮胚根鞘破裂率和果种皮未破裂率。表1 玉米种子活力测定破裂法鉴定标准表1 玉米种子活力测定破裂法鉴定标准9.1加速老化法分别计算加速老化测定各重复（粒种子）的发芽率，按照GB/T

8170，求得四次重复的平均值，老化发芽率与标准发芽率的比值记为加速老化相对发芽率。加速老化发芽率=（正常幼苗数/供检种子粒数）×

%标准发芽率=（正常幼苗数/供检种子粒数）×

%加速老化相对发芽率=（加速老化发芽率/标准发芽率）×

%反之则弱。依照加速老化相对发芽率大小可将玉米种子耐贮藏性分为耐（A）、中耐（B）、弱（C不耐（D）4个等级。玉米种子批耐贮藏性评价见表2。表2 玉米种子批耐贮藏性评价表2 玉米种子批耐贮藏性评价100GB/T

8170抗冷测定发芽率。抗冷测定发芽率=（正常幼苗数/供检种子粒数）×

%9.3冷浸法100GB/T

8170冷浸发芽率。冷浸发芽率=（正常幼苗数/供检种子粒数）×

%50

50

99989796959310911011891112871313841514811815782116732417672918563519514620DB

37/T

4485—20219.4破裂法分别计算破裂测定各重复（100粒种子）的果种皮破裂率（）、胚根鞘破裂率（CRP）、（果种皮胚根鞘破裂率（TRCRP）和果种皮未破裂率（TUP），按照GB/T

8170，求得四次重复的平均值，通过CRP和TRCRP指标评价种子活力。果种皮破裂率=(果种皮破裂种子数/供检种子粒数)×100

%胚根鞘破裂率=(胚根鞘破裂种子数/供检种子粒数)×100

%果种皮胚根鞘破裂率=[(果种皮破裂种子数+胚根鞘破裂种子数)/供检种子总数]×100

%果种皮未破裂率=(果种皮未破裂种子数/供检种子粒数)×

%9.5 重新试验参考GB/T

，当试验出现下列情况时，应重新试验。或纸砂间进行重新试验。如有必要，应增加种子之间的距离。当发现实验条件、幼苗鉴定或计数有差错时，应采用同样方法进行重新试验。当一次试验的四次重复间的差距超过表3最大容许差距时，应采用同样的方法进行重新试验。如果第二次结果与第一次结果相一致，即其差异不超过表4中所示的容许差距，则将两次试验的平均数填报在结果单上。如果第二次结果与第一次结果不相符合，其差异超过表4所示的容许差距，则采用同样的方法进行第三次试验，填报符合要求的结果平均数。表3表3 同一发芽试验四次重复间的最大容许差距（

%显著水平的两尾测定）

50

50

989591108511771760255142DB

37/T

4485—2021表4同一或不同实验室来自相同或不同送验样品间发芽试验的容许差距（表4同一或不同实验室来自相同或不同送验样品间发芽试验的容许差距（2.5

%显著水平的两尾测定）10.1 加速老化法、抗冷法、冷浸法按照GB/T

的百分率总和必须为100（玉米种子活力测定种苗鉴定标准见表5修约进入最大值中。表5表5玉米种子活力测定种苗鉴定标准（简化版）DB

37/T

4485—202110.2 破裂法参考GB/T

3543.4，对试样的测定结果进行填报。果种皮破裂种子、胚根鞘破裂种子和果种皮未破100（玉米种子活力测定破裂法鉴定标准见表1中。11 结果报告11.1 种子活力测定结果报告应包含以下信息：——标题；——测定机构的名称与地址，进行测定的地点；——测定证书或报告的唯一性标识和每页及总页数的标识；——委托方的名称和地址；——被测定种子样品的说明和明确标识；——测定种子样品的特性和状态；——测定种子样品的接收和进行测定的日期；——对所采用测定方法的标识的明确说明；——涉及的扦样程序；——对测定方法的任何偏离、增加或减少以及其他任何与特定的检验有关的信息；——测定、检查和导出的结果，以及对结果失效的证明；——对估算的测定结果不确定度的说明；——对测定证书或报告内容负责人员的签字、职务或等效标识，以及签发日期；——委托测定，作出本结果仅对所测定样品有效的声明；——未经测定机构书面批准，不得复制测定证书或报告（完整复制除外）的声明。11.2

A。其中任何一项结果为零，则将符号“0.0”填入该格中。同时还须填报采用的标准和发芽前处理和方法。11.3 玉米种子活力测定（破裂法）发芽试验原始记录表编写格式可参考附录

B。裂种子的百分率。假如其中任何一项结果为零，则将符号“同时还须填报采用的标准和发芽前处理和方法。11.4 玉米种子活力测定结果报告单编写格式可参考附录

C。同时还须填报采用的种子活力测定方法及发芽方式和条件。11