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文档简介
ICS
21
非洲猪瘟病毒
目视检测方法
Amplification（LAMP）
辽宁省市场监督管理局 发
布
本文件按照GB/T
1.1—2020《标准化工作导则
第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定文件布实后，何单和个如有题和意见议，可以过来和来等方进行街2：024-文件起草单位通讯地址：辽宁省农业发展服务中心（沈阳市沈北新区人和街95号），联系电话：
倍～10
倍的核酸扩增。在DNA合成
倍～10
倍的核酸扩增。在DNA合成时，从脱氧核糖核酸三磷酸底物(dNTPs)中析出的焦磷酸离子与
本文件规定了非洲猪瘟病毒（African
Virus）
LAMP目视检测方法的生物安全基本文件用于洲猪的诊、监及流病学调查适用猪全、脾、扁体、巴结
列文中的内容过文的规范性用而成本件必不可的条。其中，日期引用，仅该日对应的版适用于本件；不注期的用文件，最新版本包括所有修改单）
针对靶基因的6个区域设计4种特异引物，并引入环引物加快反应，在链置换DNA聚合酶的作用下，基因模板、引物、链置换型DNA合成酶等在60
℃进行恒温扩增，15
二级生物安全柜、高速台式冷冻离心机、组织研磨仪、冰箱（2
℃～8
℃和-20
℃以下）、金属浴或恒温水浴锅（25
℃～100
℃）、微量移液器（量程：0.5
μL～10
μL、2
μL～20
μL、20
L～200
核酸提取试剂盒、离心管（15
血液样品：按照
中第
条中猪血液样品采集的要求进行，将采集的血液注
脏器、组织样品：按
中第
条和
条中的要求进行，将采集的病死或剖杀猪要脏器（脏、扁桃、淋巴结肾脏）、骨髓样品使用织研磨仪研钵在二
应在制备行，商品提取按说提取酸，核酸
2×反应液（RM）
μ
μmol/L）
μ
μmol/L）
μ
μ
μ
μ
μ
μ
μ
μ
在试剂配制区进行。设所需PCR管数为n（n=待测样品数+1管阴性对照+1管阳性对照）。按n+1计算
μL/管分装至PCR管并编号。表1
向上述编号的PCR管中分别加入制备的阴性对照核酸、阳性对照核酸和样本核酸各2
μL，扣紧混
min。
引物的名称和序列见表A.1。
取引物对（内引物FIP、内引物BIP、外引物F3、外引物B3、环引物LB）干粉，按
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