【高效液相色谱-紫外检测法检测奶茶添加剂实验探究2700字（论文）】

高效液相色谱-紫外检测法检测奶茶添加剂实验探究目录TOC\o"1-2"\h\u阿44091材料与试剂 254521.1样品来源 2195461.2试剂 299961.3器材 2313142实验方法 2280612.1溶液配置 2181352.2样品前处理 3293152.3液相色谱分析条件 45983注：流动相中，A为甲醇，B为乙酸铵溶液（0.02mol/L） 418843实际样品测定结果 4228194结论与分析 5奶茶饮品口感香甜可口，且不同的品种口味层出不穷，是当代年轻人群的心头好，如此美味的奶茶，其中也必然含有多种食品添加剂，如防腐剂、甜味剂以及咖啡因等。食品防腐剂是指为防止食品因微生物污染导致腐败变质，而加入食品中的人工合成的化学物质或天然的化合物。目前，苯甲酸及苯甲酸钠是众多防腐剂里，我国各大食品加工厂中最常用的。苯甲酸在进入细胞后，通过电离酸化碱储，降低呼吸酶系的活性，阻止乙酰辅酶A的缩合反应，从而达到食品防腐的目的。但超过限定剂量的苯甲酸具有一定的生物毒性，应严格规范其使用。糖精钠的甜度为蔗糖的三百到五百倍，作为甜味剂中的一种，其作用除了在味觉上带来的甜蜜感以外，本身并不具有营养价值，当摄入量较大时，会干扰消化酶的正常分泌，削弱小肠的吸收能力，同时导致食欲不振，致使青少年出现营养不良的症状。咖啡因作为一种中枢神经兴奋剂，不仅能解除疲劳、还可以促进人体血液循环，但剂量过大后，容易提高致突变和致畸的几率，还会引起局部缺血性心脏病。这些添加剂在规定范围和用量内使用是不会对人体造成影响的，但若是高频率地摄入，长期以往则会导致各类添加剂在体内蓄积，成为危害身体健康的一大隐患。因此，检测食品中的苯甲酸、糖精钠、咖啡因等对维护广大消费者群体的健康具有重要意义。材料与试剂样品来源购自嘉兴市各个县区的不同奶茶店，包括但不限于一点点、古茗、coco、茶百道等众多奶茶品牌的不同品种茶饮料。经统计，共有50份市售奶茶样品，分别标记编号，冷藏保存。试剂甲醇（HPLC，批号：20150608），咖啡因标准品（BW0130-15-1，浓度1000μg/mL），苯甲酸标准品（BW（E）100006，浓度：100.0μg/mL），糖精钠标准品（GBW（E）100008，浓度：100.0μg/mL），超纯水，冰乙酸，甲酸，亚铁氰化钾（分析纯，批号：20190220），乙酸锌（分析纯，批号：20190712），乙酸铵（分析纯，批号：20170913）器材1260高效液相色谱仪带DAD检测器（购自美国Agilent公司），Milli-Q超纯水系统（购自美国Millipore公司），XW-80A旋涡混合器（购自中国精科实业有限公司），KQ5200DA型数控超声波清洗器（购自昆山市超声仪器有限公司），LG10-2.4A高速离心机（购自中国北京医用离心机厂），0.22μm水相微孔滤膜（13mm×0.22μm，购自中国上海安谱实验科技股份有限公司），一次性无菌注射器（5mL，购自岳阳民康医用材料有限公司，批号：190125），50mL塑料离心管，电子天平（购自赛多利斯科学仪器有限公司），抽滤装置，一次性吸管，移液枪，一次性枪头。实验方法溶液配置试剂配制亚铁氰化钾溶液（92g/L）：称取106g亚铁氰化钾（K4Fe(CN)6），加入适量纯水溶解，用纯水定容至1000mL。乙酸锌溶液（183g/L）：称取220g乙酸锌[(CH3COO)2Zn]，加入少量纯水溶解，加入冰乙酸30mL，纯水定容至1000mL。乙酸铵溶液（20mmol/L）：称取1.54g乙酸铵（CH3COONH4），适量水溶解后，用纯水定容至1000mL，经0.22μm滤膜过滤后备用。甲酸-乙酸铵溶液（1：10）：称取1.54g乙酸铵，少量水溶解后，加入75.2μL甲酸（HCOOH），纯水定容至1000mL，过0.22μm滤膜后备用（存在干扰峰时使用）。标准溶液配制苯甲酸、糖精钠、咖啡因标准中间溶液：取适量苯甲酸标准溶液、糖精钠标准溶液和咖啡因标准溶液，用超纯水配制成标准混合液，混匀待用。苯甲酸、糖精钠、咖啡因标准混合液：取适量苯甲酸、糖精钠、咖啡因标准中间溶液，加入超纯水进行稀释，分别配制成浓度为1.00μg/mL、5.00μg/mL、10.0μg/mL、25.0μg/mL、50.0μg/mL的标准溶液，颠倒混匀后，过0.22μm滤膜于进样小瓶中，待测。样品前处理待测样品取50支50mL塑料离心管，每管进行编号，将样品奶茶颠倒混匀，用吸管准确吸取2.0g奶茶液体于离心管中，加入2mL甲醇溶液，用超纯水定容至50mL，试使用旋涡混合器对定容好的样品管进行振荡混匀，持续2min后，继续对其超声5min。超声结束，取出离心管，放入高速离心机中，8000r/min离心5min。一次性注射器吸取适量上清液，过0.22μm滤膜于进样小瓶中，待测。加标样品随机选择一份空白样品，添加一定标准混合溶液后制成标准物质含量分别为0.05g/kg、0.10g/kg、0.50g/kg的加标样品，按上述步骤同步进行前处理操作后，过滤待测。液相色谱分析条件色谱柱：AgilentPoroshell120EC-C18柱（3mm×150mm，2.7μm）；柱温：35℃；流动相：甲醇-乙酸铵溶液（0.02mol/L）洗脱方式：梯度洗脱，具体程序见表2-1；进样量10μL；流速：1.0mL/min；紫外检测器波长：240nm。表2-1梯度洗脱条件时间（min）流动相A（%）流动相B（%）0595740609208012595注：流动相中，A为甲醇，B为乙酸铵溶液（0.02mol/L）实际样品测定结果该实验中共检测市售奶茶50份，取样后对样品1：1加入甲醇沉淀剂沉淀离心，分离效果均良好，根据检测得到的色谱图，按保留时间定性、峰面积定量，经计算，待测的三种添加剂成分各有一定程度的检出，详细结果见表3-3。检测的50份市售奶茶饮品中，有6份检测出苯甲酸，含量在0.0988～0.197g/kg之间；有4份检测出糖精钠，含量在0.0550～0.176g/kg之间；有12份检测出咖啡因，含量在0.0195～0.483g/kg之间。表3-3样品中苯甲酸、糖精钠、咖啡因含量检测结果组分检出数（份）检出范围（g/kg）苯甲酸60.0988～0.197糖精钠40.0550～0.176咖啡因120.0195～0.483结论与分析上述实验结果中，关于标准曲线绘制，除苯甲酸检测得到的标准曲线的相关系数较低、线性较差外，糖精钠及咖啡因所对应的标准曲线均线性良好，相关系数在0.9999以上。分析可能存在原因是，在制作标准混合溶液时，未能准确控制好苯甲酸的加入量，导致实际浓度与坐标上对应点的浓度不符。检测结果表明，本实验中使用的样品预处理方式更加便捷，沉淀分离后去除杂质的效果也更好，优化后的色谱检测条件也具有更好的分离度及精确度，适用于奶茶饮品中苯甲酸、糖精钠及咖啡因的同时检测，为这三种食品添加剂的定量分析及监管提供了技术支持。经过对市售奶茶中三种添加剂的定量分析表明，各个品种奶茶中虽各有部分添加剂检出，但都未超过国家食品安全检测中对这三种物质规定的剂量标准，但若长期频繁摄入，仍具有较低风险。同时，因部分奶茶中本就以茶汤作为原材料，而茶叶中本就含有部分咖啡因，因此在50份市售奶茶中咖啡因的检出份数较多且含量也略高。本次实验仅检测了50份市售奶茶中的三种添加剂，并不能代表奶茶中的全部添加剂种类及含量，且样本量较小，不能涵盖市面上所有的奶茶品牌及种类，仅能作为参考而不具有很大的代表性。奶茶虽然好喝，但市售奶茶中并无太多对人体有益的成分，极少数添加纯奶，大多奶茶店都选择加入奶精及其他调味剂来