中国药典与美英药典微生物限度比较

中国药典与美英药典微生物限度检查法的比较

苏德模.1.收载的检查工程

CPBPUSP需气菌+++真菌+++大肠埃希菌+++沙门菌+++铜绿色假单胞菌+++金黄色葡萄球菌+++梭菌++

大肠菌群+++肠杆菌科及其他某些革兰阴性杆菌

+肠道菌、肠杆菌科支原体

+

分枝杆菌

+

病毒的其他因子

+

活螨+

.2.检验量CP取10g或10ml供试品BP、USP10g或10ml供试品数份

.

CPBPUSP一般制剂0.9%的氯化钠溶液pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液乳糖肉汤pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液其他合适培养基pH7.2磷酸盐缓冲液,大豆酪蛋白消化培养基,乳糖液体培养基非水溶性的制剂（膏剂、油剂）司盘80、单硬脂酸甘油酯、吐温-80十四烷酸异丙酯5克吐温-20或吐温-80十四烷酸异丙酯吐温-20其他助溶剂其他不溶于水的膜剂肠溶胶囊制备供试液最终pH调至7.0气雾剂制备法样品加稀释剂至培养基时间不超过1hr3.供试液制备

.

4.制剂抑菌作用确实定〔阳性对照试验〕*0.4%l卵磷脂，4.0%吐温

CPBPUSP控制菌阳性菌加量10~102个102个105~106个需气菌及真菌计数50~100回收率大小于70%判断是否有抑菌作用25~200个金葡、白念、枯草、大肠菌在有无制剂存在下生长的稀释级差别大小判断是否有抑菌作用根据控制菌阳性菌生长的结果判断

抑菌作用处理方法

中和法+++*稀释法+++薄膜过滤法+++离心沉淀法+

.5.需气菌和真菌计数

CPBPUSP方法

平皿法++（浇碟、涂抹）+试管法

++薄膜过滤法++

培养基营养琼脂大豆酪蛋白消化琼脂大豆酪蛋白消化琼脂

玫瑰红钠琼脂含抗生素的沙氏葡萄糖琼脂沙氏葡萄糖琼脂.5.需气菌和真菌计数(续)稀释级的选择3个连续稀释级1个2个培养温度30~35℃23~28℃30~35℃20~25℃30~35℃20~25℃培养时间（天）

需气菌2(5~7)52~3真菌3(5~7)55~7计数结果

需气菌真菌一般30~30030~100不生长按〈10个/1g或ml报告〈300〈10030~300不生长按〈10个/1g或ml报告结果报告1g或ml1g或ml1g或ml.6.大肠埃希菌

CPBPUSP方法MI法I法IMViC法检验量（g或ml）1110稀释剂09%氯化钠溶液pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液乳糖液体培养基预增菌

大豆酪胨肉汤35~37℃18~48h

增菌BL增菌培养基35~37℃18~24hM-I35~37℃5、24h

Mac肉汤43~45℃18~24h乳糖液体培养基35~37℃24~48h分离Mac.琼脂平板35~37℃18~72hMac、EMB琼脂平板35~37℃24~48h生化试验MI及IMViC++

.7.大肠菌群

CPBPUSP检验量（g或ml）11

稀释剂pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液乳糖肉汤

预增菌

35~37℃2~5h

增菌0.1g,0.01g0.001gBL培养基35~37℃18~24h0.1g,0.01g,0.001g乳糖肉汤培养基35~37℃24~48h

分离EMB或Mac.C琼脂平板35~37℃18~24hVRB.琼脂平板35~37℃18~24h

生化试验+-

.8.铜绿假单胞菌

CPBPUSP检验量1（g或ml）1（g或ml）10（g或ml）稀释剂09%氯化钠溶液pH7.2磷酸盐缓冲液pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液大豆酪蛋白消化培养基增菌胆盐乳糖增菌培养基35~37℃18~24h大豆酪蛋白消化培养基35~37℃18~48h大豆酪蛋白消化培养基35~37℃24~48h分离溴化十六烷基三甲铵琼脂平板35~37℃18~24h

Cetrimide琼脂，培养18~72h大豆酪蛋白消化培养基41~43℃18~48h。薄膜过滤大豆酪蛋白消化培养基18~48h，Cetrimide琼脂平板Cetrimide琼脂35~37℃72h生化试验5种1种（42±1）3种.9.金黄色葡萄球菌

CPBPUSP检验量1（g或ml）1（g或ml）10（g或ml）稀释剂09%氯化钠溶液pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液

大豆酪蛋白消化培养基

增菌营养肉汤（或含亚碲酸甲）培养基35~37℃18~24h大豆酪蛋白消化培养基35~37℃18~48hh大豆酪蛋白消化培养基35~37℃24~48h分离甘露醇氯化钠琼脂平板、卵黄氯化钠琼脂平板35~37℃24~48hBP琼脂平板35~37℃18~72hVJ(甘露醇氯化锂)琼脂、MS(甘露醇氯化钠)琼脂、BP琼脂平板35~37℃24~48h凝固酶试验+凝固酶、DNA酶+.10.沙门菌

CPBPUSP检验量1（g或ml）10（g或ml）10（g或ml）稀释剂09%氯化钠溶液、pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液

乳糖液体培养基增菌营养肉汤培养基35~37℃18~24h大豆酪胨肉汤35~37℃18~24h乳糖液体培养基35~37℃培养二次增菌TTB培养基35~37℃18~24h四硫酸盐肉汤培养基41~43℃18~24hSC、TTB液体培养基35~37℃12~24h分离EMB、Mac.C、DHL、SS琼脂平板35~37℃18~24hDC、XLD、BG.琼脂平板35~37℃18~72hBG、XLD、BS琼脂平板35~37℃24~48h生化试验+++.11梭菌

CPBPUSP检验量（g或ml）11010

稀释剂09%无菌氯化钠溶液pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液乳糖肉汤

加热处理1份80℃10min另1份不加热1份80℃10min另1份不加热

增菌100ml0.1%葡萄糖庖肉培养基35~37℃72~96h100ml梭菌增菌培养基35~37℃厌氧48h

分离含庆大霉素哥伦比亚琼脂平板35~37℃48~72h含和不含庆大霉素哥伦比亚琼脂平板35~37℃48h

过氧化氢酶试验++

.12.结果判断及复试

CPBPUSP控制菌一次检出为准一次检出为准不符合标准规定，取大于25g的样品复试需气菌和真菌第一次试验结果超过规定的标准，重新抽样复试两次，三次结果平均值报告测定结果在规定的限度标准5倍以内均为合格同上.微生物限度标准1.收载方式

CPBPUSP各论项下+++制剂通则++

专论+++.2.制剂通那么中规定微生物限度的剂型CPBPUSP注射液1、植入剂1、酊剂、栓剂、软乳糊剂2、眼用剂2、糖浆、气粉喷雾2膜、口服液混悬乳剂、散剂2、滴耳2、滴鼻、洗冲灌肠剂2、搽涂摸剂、凝胶剂、贴剂无微生物限度：片、胶囊、丸、颗粒中药除膏药、橡胶膏剂、巴布膏剂外药典均有规定胶囊剂、口胶剂、颗粒剂、搽剂、泡腾剂1、灌洗剂1、滴鼻剂2、口服液、口服散剂、注射液1、直肠制剂、棒剂1