食品生物化学第5章 酶

第五章酶主要内容酶的概念及其催化作用的特点酶的命名与分类酶分子的组成与结构酶催化作用的机制酶促反响动力学酶活力测定酶的应用1.酶的概念及其催化作用的特点1.1酶的概念

酶是活细胞产生的，能在体内或体外起同样催化作用的生物分子，又称生物催化剂(biocatalyst)。

绝大多数的酶是蛋白质，称这类酶为enzyme

具有催化功能的RNA被称为核酶(ribozyme)具有催化功能的DNA被称为脱氧核酶(deoxyribozyme)1.2酶催化作用的特点1.2.1酶与非生物催化剂的共性都能加快反响速度但不改变反响的平衡点；用量少，反响前后不发生质与量的变化；通过降低活化能加快化学反响速度。一般催化剂反响活化能反响总能量变化酶促反响活化能非催化反响活化能初态终态能量改变活化过程酶促反响活化能的改变过渡态1.2.2酶作为生物催化剂的催化特性1.高效性：通常比非生物催化剂的催化活性高106~1013倍。2H2O22H2O+O21mol过氧化氢酶5×106molH2O2/s1mol离子铁6×10-4molH2O2/s专一性绝对专一性：除一种底物以外，其它任何物质它都不起催化作用。相对专一性立体专一性：只能对一种立体异构体起催化作用，对其对体则全无作用。基团专一性：除了要求A和B之间的键合适外，还对其所作用键两端的基团具有不同的专一性。键专一性：只要求底物分子上有适合的化学键就可以起催化作用。这种专一性催化作用，对于其在食品、化工领域的应用具有重要实践意义。2.高度专一性：酶对底物具有严格的选择性。即：一种酶只能催化一种或一类结构相似的化合物发生一定的反响。绝对专一性：只能作用于某一底物脲酶：H2N—C—NH2+H2OO2NH3+CO2凝血酶作为一种特殊的蛋白酶只作用于蛋白分子中精氨酸残基的羧基与甘氨酸残基形成的肽键。---Arg-Gly----相对专一性：作用于一类化合物或一种化学键。如脂肪酶、磷酸酯酶和蛋白水解酶等。〔1〕键专一性：只对其底物分子中所作用的键要求严格，而对键两端的基团没有选择性。酯酶：R—C—O—R′

+

H2OORCOO-+ROH+H+′〔2〕基团〔族〕专一性：酶对底物分子的要求较高,不仅要求底物具有一定的化学键，而且对键一端的基团有特殊要求。OCH2OHOHOHOH15α-葡萄糖苷酶OR+H2OOCH2OHOHOHOHOH15+ROH立体异构专一性

当底物具有立体异构体时，酶只能催化一种异构体发生某种化学反响，而对另一种异构体无作用。旋光异构专一性如：乳酸脱氢酶只能催化L-乳酸脱氢变成丙酮酸；

D-氨基酸氧化酶只能作用于各种D-氨基酸，催化其氧化脱氨；

胰蛋白酶只作用于L-氨基酸残基构成的肽键或其衍生物。2.几何异构专一性(顺反异构专一性)如琥珀酸脱氢酶只能催化丁二酸脱氢生成反-丁烯二酸的可逆反响。FADH2FAD研究酶的专一性的意义例如，某药物具有某一种构型才有生理效用，而有机合成的是消旋混合物，假设用酶可以进行不对称合成或不对称拆分，即得到单一构型的药物。3.反响条件温和常温、常压、近中性pH值4.酶的催化活性受调节和控制在分子水平上对酶活性进行调节：共价修饰调节，变构调节，同工酶调节，多功能酶调节在酶分子合成水平上对酶量进行调节

1.2.2酶作为生物催化剂的催化特性2.酶的分类与命名2.1酶的国际系统分类法及编号1961年国际生化协会酶命名委员会(EnzymeCommittee,EC)根据酶所催化的反响类型将酶分为六大类，即氧化复原酶类、转移酶类、水解酶类、裂解酶类、异构酶类和合成酶类，分别用1、2、3、4、5、6的编号来表示.再根据底物中被作用的基团或键的特点将每一大类分为假设干个亚类，每个亚类可再分假设干个亚-亚类，仍用1、2、3、……编号。故每一个酶的分类编号由用“．〞隔开的四个数字组成。编号之前是酶学委员会的缩写E.C.。酶编号的前三个数字说明酶的特性：反响性质、反响物〔或底物〕性质、键的类型，第四个数字那么是酶在亚-亚类中的顺序号。乳酸脱氢酶E.C.1.1.1.27第1大类，氧化还原酶第1亚类，氧化基团为CHOH第1亚亚类，H受体为NAD+该酶在亚亚类中的顺序号+NAD++NADH+H+举例：乳酸脱氢酶〔〕CH3C=OCOOHCH3CHOHCOOH氧化复原酶类〔oxido-reductases〕：

催化氧化复原反响的酶。－－主要是催化氢的转移或电子传递的氧化复原反响AH2+BA+BH2〔1〕脱氢酶类：催化直接从底物上脱氢的反响。AH2

+BA+BH2（需辅酶Ⅰ或辅酶Ⅱ）〔2〕氧化酶类①催化底物脱氢，并氧化生成H2O2：AH2+O2A+H2O2（需FAD或FMN）②催化底物脱氢，氧化生成H2O：2AH2+O22A+2H2O〔3〕过氧化物酶ROO+H2O2RO+H2O+O2〔4〕加氧酶〔双加氧酶和单加氧酶〕O2+OHOHC=OC=OOHOH（顺，顺-已二烯二酸）RH+O2+还原型辅助因子ROH+H2O+氧化型辅助因子（又称羟化酶）2.转移酶类(transferases)：催化分子间基团转移的酶。A·X+BA+B·X根据X分成8个亚类：转移碳基、酮基或醛基、酰基、糖基、烃基、含氮基、含磷基和含硫基的酶。3.水解酶类(hydrolases)：催化水解反响的酶。AB+H2OAOH+BH水解酶类大都属于胞外酶，在生物体内分布最广，数量也多4.裂解酶类〔或裂合酶类,lyases〕：催化非水解性地除去分子中的基团及其逆反响的酶。CH3C=OCOOHC—C键CH3C=OH+CO2C—O键CH2COOHHO—CH—COOHHCCOOHHOOCCH+H2OC—N键COOHCH—NH2CH2COOHCOOHCHHCCOOH+

NH35.异构酶〔isomerases〕：催化分子异构反响的酶。AB常见的有消旋和变旋、醛酮异构、顺反异构和变位酶类。6.合成酶类〔或连接酶类,synthetases或ligases〕：催化有ATP参加的合成反响(即两个分子合成一个分子)的酶。A+B+ATPA·B+ADP+Pi2.2酶的命名

两种命名方法：国际系统命名法、习惯命名法。〔1〕国际系统命名法在系统命名法中，一种酶只可能有一个名称和一个编号。在科技文献中，一般使用酶的系统名称。系统名称包括底物名称、构型、反响性质，最后加一个酶字。例如：系统名称:丙氨酸：-酮戊二酸氨基转移酶它所催化的反响:谷氨酸+丙酮酸-酮戊二酸+丙氨酸但因某些系统名称太长，为方便起见，有时仍用酶的习惯名称。〔2〕习惯命名法:A.根据作用底物来命名，如淀粉酶、蛋白酶等。B.根据所催化的反响的类型命名，如脱氢酶、转移酶等。C.两个原那么结合起来命名，例如丙酮酸脱羧酶等。D.根据酶的来源或其它特点来命名，如胃蛋白酶、胰蛋白酶等。这在一定程度上造成很多酶有多种名称的情况。3.酶分子的组成与结构酶单纯酶结合酶（全酶）=酶蛋白+辅因子3.1单纯酶和结合酶结合酶=酶蛋白+辅因子

辅因子辅酶:与酶蛋白结合比较松驰的小分子有机物辅基:与酶蛋白结合比较紧密的小分子有机物金属离子★金属离子：(1)作为酶活性部位的组成局部，(2)帮助形成酶活性所必需的构象★辅酶或辅基：通常作为电子、原子或某些化学基团的传递载体★酶的催化专一性主要决定于酶蛋白局部3.2单体酶、寡聚酶和多酶体系单体酶

单体酶只有一条多肽链，是一个独立的三级结构，属于这一类的酶很少，一般都是催化水解的酶，分子量在13000～35000之间，如溶菌酶、胰蛋白酶等寡聚酶

寡聚酶由几个甚至几十个亚基组成，这些亚基可以是相同的多肽链，也可以是不同的多肽链。亚基之间不是共价结合，彼此很容易分开。是一个独立的四级结构。多酶体系多酶体系是由几种酶彼此嵌合形成的复合体。它有利于一系列反响的连续进行。如脂肪酸合成酶体系、呼吸链酶系等。根据组成酶蛋白分子的肽链数量及其组装特点，又可将酶分为三类：3.3酶的活性部位3.3.1酶活性部位〔活性中心〕是指酶分子中直接与底物结合并与酶催化作用直接有关的部位。酶活性部位的特点1.活性部位在酶分子整个体积中只占很小的一局部2.活性部位是一个三维实体3.底物通过较弱的键结合到酶分子上形成酶和底物的复合物〔ES〕4.酶的活性部位是酶分子外表的一个裂隙或裂缝(－－在所有结构的酶中都是位于酶分子的外表呈裂缝状)5.活性部位有结合底物的专一性6.酶活性部位具有柔性或可运动性3.3.2必需基团必需基团：酶分子中直接或间接与酶催化活性相关的某些氨基酸残基的功能基团。－－这些基团假设经化学修饰使其改变，那么酶的活性丧失。必需基团活性部位维持酶的空间构象结合基团催化基团专一性催化性质S-S活性中心外必需基团结合基团催化基团活性中心必需基团底物

肽链活性中心酶活性中心示意图3.3.3酶原的激活

没有活性的酶的前体称为酶原。酶原转变成有活性的酶的过程称为酶原的激活.该过程实质上是酶活性部位形成和暴露的过程。举例1.胰蛋白酶原的激活

胰蛋白酶是一个关键酶,胰脏中酶原(胰凝乳蛋白酶原,弹性蛋白酶原,羧肽酶原等)的激活都要通过胰蛋白酶的作用。在胰脏中存在着较丰富的胰蛋白酶抑制剂,抑制胰蛋白酶的活性。

酶原在胰脏中提早活化是胰腺炎的特征，严重的可以致命。

-S-S-X缬天天天天赖异甘缬组46丝183静电吸引力或氢键肠激酶胰蛋白酶胰蛋白酶原-S-S-甘缬天天天天赖异缬丝胰蛋白酶SSSS组活性中心游离的六肽胰蛋白酶原的激活过程◆酶原与酶原激活的生理意义：

1.保护组织器官本身免受酶的水解破坏；2.保证酶在特定时空发挥催化作用；3.酶原可视作酶的储存形式。

如：凝血和纤维蛋白溶解酶类以酶原的形式在血液循环中运行，一旦需要便不失时机地转化为有活性的酶，发挥其对机体的保护作用。3.3.4同工酶(isoenzyme)——能催化相同的化学反响，但在蛋白质分子的结构、理化性质和免疫性能等方面都存在明显差异的一组酶，称为同工酶。酶蛋白差异源于：〔1〕编码基因不同；〔2〕加工过程不同，导致相同基因的转录产物mRNA或翻译产物不同。1959年Markert首次用电泳别离法发现动物的乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)具有多种分子形式，并提出同工酶的概念。乳酸脱氢酶〔LDH〕同工酶:

LDH1LDH2LDH3LDH4LDH5(H4)(H3M)(H2M2)(HM3)(M4)M

H乳酸脱氢酶〔LDH〕

同工酶不仅存在于同一个体的不同组织中，甚至同一组织、同一细胞的不同亚细胞结构中。♦同工酶研究的意义：

1.是研究代谢调节、分子遗传、生物进化、个体发育、细胞分化和癌变的有力工具；2.是研究蛋白质结构与功能的好材料，在酶学、生物学、医学和农业中占有重要地位。举例:心、肝病变引起血清LDH同工酶酶谱变化

心脏疾病LDH1↑,LDH2↑;LDH3↓,LDH5↓急性肝炎LDH5↑明显原发性肝癌LDH3↑,LDH4↑,LDH5↑,LDH5>LDH44.酶催化作用的机制4.1中间产物学说－－关于酶催化高效性的假说E+SESE+P由于形成不稳定的ES,可有效降低发生反响的活化能,从而解释酶催化的高效性4.2诱导嵌合学说－－关于酶作用专一性的假说4.2.1锁钥学说〔Fisher，1890〕：酶的活性中心结构与底物的结构须非常吻合，如同锁和钥匙一样，紧密结合成中间络合物。4.2.2诱导嵌合学说〔Koshland，1958〕：

酶活性中心的结构有一定的柔性,当底物与酶分子结合时,诱导酶蛋白的构象发生有利于与底物结合的变化,使反响所需的催化基团和结合基团正确地排列和定向,转入有效的作用位置,这样才能使酶与底物完全吻合,结合成中间产物。SEE-S复合物abcabcES诱导契合学说4.3使酶具有高催化效率的因素酶分子为酶的催化作用提供各种功能基团和形成特定的活性中心，酶与底物结合成中间产物，使分子间的催化反响转变为分子内的催化反响。4.3.1邻近定向效应酶与底物结合成中间产物过程中,底物分子密集到活性中心区,并使活性中心的催化基团与底物的反响基团之间正确定向排列所产生的效应。酶AB靠近与定向作用

4.3.2“张力〞与“形变〞底物与酶的结合，不仅诱导酶分子发生构象变化，同样底物分子也会发生扭曲变形，使底物分子的敏感键产生“张力〞，甚至“形变〞，某些键的键能减弱，从而促进酶-底物中间产物进入过渡态〔降低了反响活化能〕。4.3.3酸碱催化酶活性部位上的某些基团可以做为良好的质子供体或受体对底物进行酸碱催化。蛋白质中起酸或碱催化的功能基团有氨基、羧基、咪唑基、巯基和酚基。影响酸碱催化速度的2种因素:(1)酸或碱的强度(pK);(2)质子传递速度。His的咪唑基最活泼。酶活性中心广义酸碱基团

氨基酸残基广义酸的形式（质子供体）广义碱的形式（质子受体）4.3.4共价催化酶可以和底物生成不稳定的共价中间物，这种共价中间物进一步生成产物要比非催化反响容易得多。Lewis的酸碱电子理论:酸是可以接受电子对的物质，是亲电物质；而碱那么是可以提供电子对的物质，是亲核物质。共价催化又称亲核或亲电子催化，实际上也是酸碱催化。4.3.5活性部位微环境的影响

5.酶促反响动力学酶促反响动力学：研究酶促反响速度及其影响因素的科学。酶浓度[E]底物浓度[S]反响温度pH值激活剂抑制剂v[E]o在有足够底物和其他条件不变、无任何不利因素的情况下：

v=k[E]5.1酶浓度对酶作用的影响1、底物浓度对酶促反响速度的影响

vVm0.30.2Vm20.1012345678[S][S]与v关系：当[S]很低时，[S]与v成比例--一级反响当[S]较高时，[S]与v不成比例-混合级反响当[S]很高时，[S]，v不变--零级反响5.2底物浓度对酶作用的影响当底物浓度很低时，有多余的酶没与底物结合，随着底物浓度的增加，有更多的中间络合物生成，因而反响速度也不断增高。当底物浓度很高时，体系中的酶全部与底物结合成中间产物，虽增加底物浓度也不会有更多的中间产物生成，因而反响速度几乎不变。S+EESE+Pk1k2k32.米氏方程式〔Michaelis-Mentenequation〕LeonorMichaelis和MaudMenten〔1913〕根据中间产物学说推导了能够表示整个反响中底物浓度和反响速度关系的公式，称为米氏〔米－曼氏〕方程式：v=Vmax[S]Km+[S]米氏方程的三个假设中间产物学说：E+SESE+P〔1〕反响开始，[P]很低，由P+EES可忽略不计，即：E+SESE+Pk1k2k3k4k1k2k3〔2〕E+SES为快速反响(快速平衡假说)〔3〕ESE+P为慢速反响(限速步骤),反响速度v决定于最慢的一步即K3Km=[S]3.米氏常数的意义当v=½Vmax时

½Vmax=Km+[S]Vmax[S]可见，Km的涵义〔物理意义〕是当反响速度为最大反响速度一半时的底物浓度。其单位是浓度单位，一般以mol/L或mmol/L表示。米氏常数意义：〔1〕Km是酶的一个特征性常数。Km大小只与酶的性质有关，而与酶浓度无关。Km值随测定的底物、反响的温度、pH和离子强度而改变。一个酶在一定条件下，对某一底物有一定的Km值，故通过测定Km的数值，可鉴别酶。大多数酶的Km值介于10-6~10-1mol/L之间。〔2〕从Km可判断酶的专一性和天然底物。当酶可作用于几种底物时，Km最小的底物通常就是该酶的最适底物，也就是天然底物。Km愈小，到达最大反响速度一半所需要的底物浓度就愈小，即底物与酶的亲和力愈大。Km值随不同底物而异的现象可以帮助判断酶的专一性，并且有助于研究酶的活性部位。∵Km=〔k2+k3)/k1Km≈k2/k1∴Km可以看作ES的解离常数ks：Km=ks=————[S][E][ES]Km大，说明ES容易解离，酶与底物结合的亲和力小。Km小，那么说明酶与底物的亲和力大。〔3〕当k2＞＞k3时，km的大小可以近似地表示酶与底物的亲和力大小。S+EESE+Pk1k2k3〔4〕Km可以帮助推断某一代谢物在体内可能的代谢途径。丙酮酸乳酸乙酰CoA乙醛乳酸脱氢酶（1.7×10-5）丙酮酸脱氢酶（1.3×10-3）丙酮酸脱羧酶（1.0×10-3）当丙酮酸浓度较低时，代谢走哪条途径决定于Km最小的酶。(∵只有Km值小的酶反响比较占优势)√米氏常数可根据实验数据作图法直接求得：先测定不同底物浓度的反响初速度，从v与[S]的关系曲线求得Vmax，然后再从1/2Vmax求得相应的[S]即为Km〔近似值〕。4、Km值与Vmax值测定通常用双倒数作图法测定酶促反响的Km和Vmax。〔y=ax+b〕1v斜率=km/Vmax1/[S]1/v1/Vmax-1/km5.3pH对酶作用的影响2.最适pH

1.pH稳定性－－酶表现最大活力的pH值。在一定的pH范围内酶是稳定的。一些酶的最适pH值

酶最适pH胃蛋白酶1.8过氧化氢酶7.6胰蛋白酶7.7延胡索酸酶7.8核糖核酸酶7.8精氨酸酶9.8酶的最适pH只在一定条件下才有意义－－

酶的最适pH不是固定的常数,其数值受酶的纯度、底物种类和浓度、缓冲液种类和浓度等影响pH影响酶活力的原因：

1.环境过酸、过碱可使酶的空间结构破坏，引起酶构象的改变，酶变性失活；

2.pH改变能影响酶分子活性部位上有关基团的解离，从而影响与底物的结合或催化；

3.pH影响底物有关基团的解离。5.4温度对酶作用的影响两种不同影响：1.温度升高，反响速度加快；2.温度升高，热变性速度加快。Tv最适温度

酶的最适温度:在一定条件下，酶表现最大活力时的温度。酶的最适温度不是一个固定的常数，其数值受底物种类、作用时间等因素影响而改变。5.5激活剂对酶作用的影响——凡能提高酶活力的物质都称之为该酶的激活剂。激活剂无机离子大多为金属离子:如K+,Na+,Ca2+,Mg2+,Zn2+,Fe2+等少数为阴离子:如Cl-,Br-,I-,CN-,PO43-等小分子有机物：如Vc,Cys,GSH,胆汁酸盐等生物大分子：如蛋白激酶，激活酶原的蛋白酶等5.6抑制剂对酶作用的影响——使酶的必需基团或活性部位中的基团的化学性质改变而降低酶活力甚至使酶丧失活性的物质，称为抑制剂〔inhibitor,I〕。由抑制剂所引起的酶活力降低或丧失称为抑制作用〔inhibition〕。凡可使酶蛋白变性而引起酶活力丧失的作用称为失活作用〔inactivation〕。5.6.1不可逆抑制作用(irreversibleinhibition〕抑制剂与酶的结合〔共价键〕是不可逆的，不能用透析、超滤等物理方法除去抑制剂使酶恢复活性。S+EESE+P

+I↓EI5.6.2可逆抑制作用(reversibleinhibition)

抑制剂与酶以非共价键结合引起酶活性的降低或丧失,结合是可逆的,能够通过透析、超滤等物理方法使酶恢复活性。抑制程度由酶与抑制剂之间的亲和力大小、抑制剂的浓度以及底物的浓度决定。

可采用动力学方法鉴别可逆抑制作用和不可逆抑制作用[E]vabca.反响体系中不加I。b.反响体系中参加一定量的不可逆抑制剂。c.反响体系中参加一定量的可逆抑制剂。图可逆/不可逆抑制剂的区别(一)(1)竞争性抑制(competitiveinhibition)概念抑制剂〔I〕与底物〔S〕竞争酶的活性中心〔结合部位〕,从而影响底物与酶的正常结合，降低了酶的催化活力。可逆抑制类型：竞争性抑制(competitiveinhibition)非竞争性抑制〔non-competitiveinhibition〕反竞争性抑制〔uncompetitiveinhibition〕SSEEIIEE+P无I有I

竞争性抑制的底物浓度曲线〔Michaelis-Menten图〕v竞争性抑制作用过程[S]不反响竞争性抑制的特点：I与S分子结构相似；Vmax不变，表观Km增大；抑制程度取决于I与E的亲和力，以及[I]和[S]的相对浓度比例，能用增大[S]的方法克服。〔2〕非竞争性抑制(non-competitiveinhibition)概念底物和抑制剂同时结合在酶的不同部位上,两者没有竞争作用，但形成的ESI不能进一步转变为产物。也称作混合型抑制作用(mixedinhibition)。非竞争性抑制作用过程：SSEEEE

+PSESIIII[S]v无I有I(′)km非竞争性抑制的底物浓度曲线V/2v=———————Vmax1+[I]/ki·[S]km+[S]————非竞争性抑制的特点：1、I与S分子结构不同；2、Vmax减小，表观Km不变；3、抑制程度取决于[I]大小，不能用增大[S]的方法克服。反竞争性抑制〔uncompetitiveinhibition〕概念抑制剂仅与酶和底物的中间复合物结合而抑制酶活性。反竞争性抑制作用过程：EEE+PEIISSS反竞争性抑制作用－－抑制剂必须在酶与底物结合后才能进一步形成ESI复合物。[S]vkm′kmVmax2′Vmax2反竞争性抑制的底物浓度曲线v

=Vmax1+—[I]ki·[S]km1+——[I]ki+[S]反竞争性抑制的特点：1、I与S分子结构不同,I只与ES结合2、Vmax和表观Km都减小；〔存在I时，不仅不排斥E和S的结合，反而增加二者的亲和力，这与竞争性抑制作用恰恰相反〕3、抑制程度取决于[I]和[ES]二者的浓度，不能用增大[S]的方法克服。竞争性抑制作用总结：3种可逆抑制作用图示竞争性抑制剂只同自由〔游离〕酶结合非竞争性抑制作用非竞争性抑制剂既能同自由酶结合又能同ES结合反竞争性抑制作用反竞争性抑制剂只能同ES结合总结：不同类型可逆抑制作用的米氏方程和常数类型方程式VmaxKm无抑制剂竞争性抑制非竞争性抑制反竞争性抑制v=Vmax

·

[S]Km

+

[S]v=Vmax

·

[S]Km(1+)

+

[S][I]Kiv=Vmax

·[S](Km

+

[S])(1+)

v=Vmax

·

[S]Km

+

[S][I]Ki(1+)

[I]KiVmaxKm不变不变增大减小减小减小6.酶活性的调节控制－－酶的别构〔变构〕效应

非共价调节----酶的别构调节共价调节

不可逆共价调节——酶原的激活可逆共价调节——酶的共价修饰酶活性的调节控制别构酶(allostericenzyme):具有别构效应的酶。别构酶通常能对反响起调节作用，是调节酶的一种。酶的别构〔变构〕效应别构效应：底物或底物以外的物质和别构酶分子上的相应部位可逆地非共价结合后，通过酶分子构象的变化影响酶的催化活性，这种效应称为别构效应

别构效应剂：引起别构效应的物质。

别构激活剂：但凡和酶分子结合后使酶反响速度加快的别构效应剂〔亦称正效应剂〕别构抑制剂：〔亦称负效应剂〕别构酶的主要特点：

1.一般是寡聚酶；

别构酶的组成：

两个部位活性部位：与底物结合并完成催化作用调节部位:与别构效应剂结合,调节酶活性2.具有别构效应；3.υ对[S]作图不服从米氏关系式，不呈直角双曲线，而是S形曲线〔正协同〕或表观双曲线〔负协同〕。正效应剂通常是别构酶的底物负效应剂一般是代谢反应序列的终产物协同效应：指一个配体与酶蛋白结合后，可以影响另一配体与酶蛋白的结合正协同效应：指一分子配体与酶结合后可促进下一分子配体的结合，使酶对配体的亲和力增高，即酶愈饱和对配体的结