气相色谱实验

气相色谱实验风油精中薄荷脑的含量测定——气相色谱法实验目的1.掌握气相色谱法测定的方法和原理。2.掌握薄荷脑含量测定的操作条件及要点。【处方】

薄荷脑320g水杨酸甲酯260g樟脑30g桉油30g丁香酚30g

【制法】

以上五味，取薄荷脑、樟脑，加入液状石腊适量，再加入桉油、水杨酸甲酯、丁香酚、香精100g、叶绿素适量，加液状石腊使成1000g,混匀，静置24小时，取澄清液，分装，即得。

实验原理内标法

内标物要满足以下要求：（a）试样中不含有该物质；（b）与被测组分性质比较接近；（c）不与试样发生化学反应；（d）出峰位置应位于被测组分附近，且无组分峰影响。实验原理校正因子（f）=(As/Cs)/(AR/CR)

AR

为对照品的峰面积或峰高；

Cs为内标物质的浓度；

CR为对照品的浓度。同一检测器对不同物质的响应值不同，所以当相同质量的不同物质通过检测器时，产生的峰面积（或峰高）不一定相等。为使峰面积能够准确地反映待测组分的含量，就必须先用已知量的待测组分测定在所用色谱条件下的峰面积，计算定量校正因子。

实验原理含量（CX）=f•AX/(As/Cs)标示量%=C测/C标*100%实验材料仪器：GC112A气相色谱仪

氢火焰离子

检测器。微量注射器试药：风油精（含薄荷脑32%）；薄荷脑对照品正辛醇、乙酸乙酯薄荷脑分子质量:156.26沸点:212℃

正辛醇沸点196℃。

实验步骤：（一）毛细管柱色谱条件色谱柱：SE-30熔融石英毛细管柱（30m×0.32mmI.D.×0.33μm，T300℃）；

柱温：120℃;

进样口温度：200℃;

氢火焰检测器温度：200℃;

载气：氮气;

进样量：1μl。内径液膜厚度实验步骤：（二）系统适用性试验按薄荷脑计算理论塔板数不得低于300，在此条件下薄荷脑与内标峰的分离度应大于2。实验步骤：（三）校正因子的测定取薄荷脑对照品50mg，精密称定，置10ml容量瓶中，精密加内标正辛醇100μl，密塞，加乙酸乙酯溶解并稀释至刻度。取1μl注入气相色谱系统，计算校正因子。实验步骤：（四）样品含量测定精密吸取风油精样品100μl，置10ml量瓶中，精密加内标正辛醇100μl，密塞，加乙酸乙酯溶解并稀释至刻度。取1μl注入气相色谱仪测定，按内标法计算标示量百分含量。实验结果：校正因子计算校正因子（f）=(As/Cs)/(AR/CR)

含量（CX）=f•AX/(As/Cs)思考题：1、内标法定量的原理、方法及特点。特点：(1)典型的质量型检测器;(2)对有机含碳化合物具有很高的灵敏度;其响应与碳原子数成正比。（烃类和杂原子有机物不同）(3)无机气体、水、四氯化碳等含氢少或不含氢的物质灵敏度低或不响应。(4)比热导检测器的灵敏度高出近3个数量级，检测下限可达10-12g·mL-1。氢焰检测器的结构

(1)在发射极和收集极之间加有一定的直流电压（50－350V）构成一个外加电场。

(2)氢焰检测器需要用到三种气体：

N2：载气携带试样组分；

H2

：为燃气；空气：助燃气。

使用时需要调整三者的比例关系，检测器灵敏度达到最佳。氢焰检测器的原理

(1)当含有机物CnHm的载气由喷嘴喷出进入火焰时，在C层发生裂解反应产生自由基：

CnHm──→·CH(2)产生的自由基在D层火焰中与外面扩散进来的激发态原子氧或分子氧发生如下反应：

·CH+O──→CHO++e(3)生成的正离子CHO+与火焰中大量水分子碰撞而发生分子离子反应：

CHO++H2O──→H3O++COA区：预热区B层：点燃火焰C层：热裂解区：温度最高D层：反应区(4)化学电离产生的正离子和电子在外加恒定直流电场的作用下分别向两极定向运动而产生微电流（约10-6～10-14A）；(5)在一定范围内，微电流的大小与进入离子室的被测组分质量成正比，所以氢焰检测器是质量型检测器。(6)

组分在氢焰中的电离效率很低，大约五十万分之一的碳原子被电离。(7)离子电流信号输出到记录仪，得到峰面积与组分质量成正比的色谱流出曲线。A区：预热区B层：点燃火焰C层：热裂解区：温度最高D层：反应区影响氢焰检测器灵敏度的因素

各种气体流速和配比的选择

N2流速的选