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现代生物技术专题宣城中学闫立2021-12-4结合图片来说一说什么是基因工程？基因工程是指按照人们的愿望，进展严厉的设计，并经过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而发明出更符合人们需求的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子程度上进展设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术或基因拼接技术。基因工程培育抗虫棉的简要过程：普通棉花(无抗虫特性)苏云金芽孢杆菌提取抗虫基因棉花细胞(含抗虫基因)棉花植株(有抗虫特性)重组DNA导入拼接上述培育抗虫棉的关键步骤是什么？普通棉花不具有抗虫性，科学家发现苏云金芽孢杆菌可以产生一种毒蛋白，对棉铃虫有一定的杀伤作用。试设计一个简单的方案，使棉花对棉铃虫也有抵抗作用.一、限制性核酸内切酶——“分子手术刀〞思索：1、怎样从苏云金芽孢杆菌体内提取毒蛋白基因？2、这类酶主要在哪些生物中可以找得到？为什么主要存在于这一类生物？3、这一类酶有什么作用？ATGC黏性末端黏性末端黏性末端：被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。一、限制性核酸内切酶——“分子手术刀〞大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成，例如，EcoRΙ、SmaΙ，也有少数有4、5或8个核苷酸组成。GAATTCCTTAAG中轴线CTTAAGAATTCG大肠杆菌的一种限制酶〔EcoRⅠ)能识别GAATTC序列，SmaI识别CCCGGG序列:

CCCGGGGGGCCCCCCGGGGGGCCC黏性末端平末端一、限制性核酸内切酶——“分子手术刀〞当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，产生的是平末端。当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时，产生的是黏性末端。一、限制性核酸内切酶——“分子手术刀〞一、限制性核酸内切酶——“分子手术刀〞主要是从原核生物中分别纯化出来的一类酶。1、来源：4000种2、种类：3、作用：识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。(6个,4、5、8个)构成两种末端黏性末端平末端4、结果：要想获得某个目的基因必需求用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端？一个目的基因有几个黏性末端？要切两个切口，产生四个黏性末端，两个。假设把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？会产生一样的黏性末端。是不是把两者的黏性末端黏合起来，这样就真的合成重组的DNA分子了?思索题：磷酸二酯键DNA衔接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合〞起来，即把梯子两边扶手的断口衔接起来，这样一个重组的DNA分子就构成了。二、DNA衔接酶——“分子缝合针〞GAATTCCTTAAG即脱氧核糖、磷酸基之间的衔接GPAP思索：DNA衔接酶作用是什么？是不是把两者的黏性末端黏合起来，这样就真的合成了重组的DNA分子?DNA衔接酶和DNA聚合酶的区别是什么？

1、种类：2、作用部位：E·coliDNA衔接酶〔黏性末端〕T4DNA衔接酶〔黏性末端和平末端〕磷酸二酯键DNA衔接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合〞起来，即把梯子两边扶手的断口衔接起来，这样一个重组的DNA分子就构成了。二、DNA衔接酶——“分子缝合针〞GAATTCCTTAAG即脱氧核糖、磷酸基之间的衔接GPAP三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车〞思索讨论：1、怎样把毒蛋白基因装载到分子运输车上？2、毒蛋白基因进入棉花细胞后，分子运输车怎样保证它能稳定的存在？3、毒蛋白基因能否进入棉花细胞我们怎样才干觉察？4、分子运输车进入到棉花细胞后能否对棉花本身的平安呵斥要挟？三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车〞能自