高二生物dna重组技术的基本工具

专题1基因工程江苏省通州高级中学巫灿烨基因工程的概念：基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术或基因拼接技术。

第一节DNA重组技术的基本工具基因工程培育抗虫棉的简要过程：普通棉花(无抗虫特性)苏云金芽孢杆菌提取抗虫基因棉花细胞(含抗虫基因)棉花植株(有抗虫特性)重组DNA导入形成DNA重组技术的基本工具准确切割DNA的工具（“分子手术刀”）DNA片段的连接工具（“分子缝合针”）基因转移工具（“分子运输车”）基因的大小以纳米计算，要对它进行剪切、拼接等操作，没有非常精细的工具是不行的。进行基因操作最少需要以下三种工具：一、“分子手术刀”

——限制性核酸内切酶

1、作用——限制性核酸内切酶能识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并在使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。磷酸二酯键即脱氧核糖、磷酸之间的连接ATGGCATCTTCGAAGAATTC

CTTAAG

中轴线CTTAA

G

AATTCG

CCCGGG

GGGCCC

CCCGGG

GGGCCC

黏性末端平末端

大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成，例如，EcoRΙ、SmaΙ，也有少数有4、5或8个核苷酸组成。大肠杆菌的一种限制酶（EcoRⅠ)能识别GAATTC序列，SmaI识别CCCGGG序列:

原核生物很容易受到自然界中外源DNA的入侵，但是长期的进化过程中，这些原核生物却没有因为外源DNA的入侵而灭绝。根据我们刚刚掌握的知识，你能推测这其中的原因吗？

原核生物细胞中的限制酶会将外源DNA切割掉，使之失效，以保证自身的安全，但是不会切割自身的DNA，这是原核生物在长期进化过程中形成的一套防御机制。动手操作吧！2、DNA连接酶——“分子缝合针”作用——把两条DNA末端之间的缝隙“缝合”起来。G

AATTCCTTAA

G

即脱氧核糖、磷酸基之间的连接

GP

AP自己动手吧！

限制酶切割后有两种不同的结果，一种产生黏性末端，一种产生平末端。那么恢复它们的连接时，所用DNA连接酶是否一样呢？E.coliDNA连接酶：连接黏性末端T4DNA连接酶：连接黏性末端和平末端DNA连接酶DNA聚合酶连接DNA链双链单链连接部位两DNA片段之间的磷酸二酯键将游离的脱氧核苷酸通过磷酸二酯键连接起来。寻根问底：DNA连接酶和DNA聚合酶是一回事吗？为什么？基因进入受体细胞的载体

要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行表达，还得将这个基因送到乙生物的细胞内去！能将外源基因送入细胞的工具就是载体。质粒拟核大肠杆菌细胞作为载体的必要条件能自我复制有切割位点有标记基因对受体细胞无害随堂练习：1、关于限制酶的说法中，正确的是（）A、限制酶是一种酶，只识别GAATTC碱基序列B、EcoRI切割的是G—A之间的氢键C．限制酶一般不切割自身的DNA分子，只切割外源DNAD．限制酶只存在于原核生物中答案：C2.（多选）有关基因工程的叙述中，错误的是

A、基因工程技术能定向地改造生物的遗传性状，培育生物新品种

B、重组DNA的形成在细胞内完成

C、目的基因须由运载体导入受体细胞

D、质粒都可作为运载体答案：BD3.下列四条DNA分子，彼此间具有粘性末端的一组是

A．①②B．②③C．③④D．②④答案：D大话西游发布站/大话西游发布站我顺着楼梯来到二楼，婴儿的啼哭声从卧室里传来。妻子敲开门，马天栓一见是肖燕，便赶紧把她往屋里让，“弟妹，你来得正好，这小祖宗就要把人吵死了，你快去看看……”说完，他如释重担地拉我去了客厅。“六叔，”客厅的门半开着，念儿探进头跟我打着招呼，“我说六叔在我家，你还不信，怎么样？让我猜中了吧？”念儿嬉笑着做了个鬼脸。念儿和宝根背着书包走了进来。我起身要走，马天栓执意要我陪他喝酒谈心，我拗他不过，只好坐了下来。不一会儿，饭菜做好了，我们两家人围坐在一起又吃起团圆大餐来。“来，我们哥俩喝上两盅。”马天栓把酒杯倒满“祝贺大哥喜得贵子。”我们哥俩碰起杯来。“六弟，你什么都好，就是这个老观念要改一改喽，现在的形势变了，男孩女孩都一样。依我看现在的社会，男孩却成了一种负担，又买楼又要车，你想想看，这不是负担是什么？”“大哥，我们都是过来的人，话是这么说，但事却不能这么做……有个儿子心里还是踏实……”“你看，还是转不过弯来吧？别的不说，就说咱们村的张老汉，有七个姑娘，整天的不是这个姑娘来就是那个姑娘去，大包小包的，你看把张老汉美得天天哼着小曲唱二黄……”马天栓闷了口小酒，继续说：“远的不说就说你爹和你娘，八个儿子，辛苦了一辈子，到头来，有哪一个在他们身边照顾他们的？”“天栓，你喝多了！”马大嫂急忙阻止他的话。马天栓摆了摆手，“我说的都是实情，六弟，你说我说的对不对？”我默然了，无话以对。“当然，我不是说我们做儿子的不孝敬父母，恰恰相反，我们这做儿子的被负担压地喘不过气来。”“天栓，别扯远了，你忘了我们说好的，让六弟给孩子起个名字。”马大嫂打断了他的话。“你不说我还真把这事给忘了，你就给我们的儿子起个名字吧。”“我可担当不起，现在的孩子可不像我们那个年代，起名是有讲究的，你还是找个起名先生吧……”“那些人我信不过，你的话我最爱听，你就随便来一个，叫啥都行。“不是叫马奔驰吗？我听念儿妹妹说的……”宝根插上了话。“不行不行……”马天栓摇着手，“笨啊痴啊的，不吉利。”“骏马奔驰在辽阔的草原上……你看大名叫马骏、小名叫苗苗怎么样？……”“好！这个名字我爱听！就叫马骏！就叫苗苗！”我的话还没说完，马天栓就拍案叫绝，把马骏的名字定了下来。“来，感谢六弟给我儿子起了个好名字，咱哥俩再干一杯！”我们俩又喝了起来。肖艳和宝根回了家，临走时嘱咐我别忘了接小荷。马大嫂去了卧室，念儿也去做功课。我和马天栓喝了很多酒，谈到很晚很晚。我忽然想起妻子嘱咐我的话，告辞了马天栓，踉踉跄跄地向学校走去……来到街口的路灯下，我倚靠在电