丙泊酚、氯胺酮、神经节苷酯对幼年SD大鼠认知功能和神经细胞影响的实验研究

丙泊酚、氯胺酮、神经节苷酯对幼年SD大鼠认知功能和神经细胞影响的实验研究第一部分丙泊酚对幼年SD大鼠认知和神经细胞的影响目的:探讨反复注射不同剂量丙泊酚(propofol)对幼年SD大鼠学习记忆功能及Caspase-3和Bcl-2表达的影响。方法:将日龄17-18天的清洁级(SPF)幼年SD大鼠32只(体重33g-42g)随机平均分为4组,分别给予:生理盐水10ml/kg(NS组)、丙泊酚50mg/kg(P50组)、丙泊酚100mg/kg(P100组)、丙泊酚200mg/kg(P200组),每天一次,各组均连续腹腔注射6天。根据预实验确定给药方式:NS组,P50组为一次性注射,剩余两组则分次给药:丙泊酚首次50mg/kg,待刺激大鼠有体动反应时追加50mg/kg,直至给完当天总量。每天各组大鼠醒2小时后,前5天进行Morris水迷宫实验测试其空间学习能力,第6天撤去平台并测试其记忆能力。第6天测试结束后处死实验大鼠,断头取脑组织,应用免疫组织化学方法检测Caspase-3和Bcl-2的表达情况。结果:(1)与NS组相比,P100组和P200组逃避潜伏期、上台前路程显著延长,穿越平台次数明显减少(P<0.05)。(2)免疫组化结果显示,P100组和P200组Caspase-3的表达明显较NS组与P50组增高(P<0.05)。(3)与NS组相比,P100、P200组Bcl-2的表达均明显降低(P<0.05);P50组与NS组相比Bcl-2的表达没有明显差异(P>0.05);P200组和P100组表达没有显著性差异(P>0.05)。结论:小剂量的丙泊酚对幼鼠的认知功能没有影响,较大剂量的丙泊酚则可能促发神经细胞的凋亡,对幼鼠的认知产生影响,其机制可能与Caspase-3的表达增加和Bcl-2的表达减低,引起神经细胞凋亡有关。第二部分丙泊酚复合神经节苷酯对幼年SD大鼠认知功能和神经细胞的影响目的:探讨丙泊酚复合神经节苷酯(GM1)多次给药对幼年SD大鼠认知功能和脑神经细胞caspase-3表达的影响。方法:SPF级SD幼年大鼠77只,日龄17-18天,体重33g-42g,随机分为7组,每组11只,每组分别腹腔注射生理盐水10ml/kg(NS组)、丙泊酚50mg/kg(P50组)、丙泊酚100mg/kg(P100组)、丙泊酚200mg/kg(P200组)、神经节酯10mg/kg(G组)、丙泊酚100mg/kg+神经节酯10mg/kg(P100G)组及丙泊酚200mg/kg+神经节酯10mg/kg(P200G组),连续腹腔注射6天,给药方式由预实验确定。前5天每天均用Morris水迷宫测试其空间学习能力,第6天撤去平台测试其记忆能力。第6天测试结束后处死实验大鼠,断头取脑组织,每组随机选取8只应用免疫组化方法检测caspase-3,余下3只取新鲜组织做western-blotting检测。结果:1水迷宫:1)G组、P50组与NS组相比各项指标没有显著性差异。2)P100组与NS组相比潜伏期、上台前路程、穿越平台次数均有显著性差异(P<0.05);P100G组与NS组相比,上台前路程明显变长(P<0.05)。3)P200组和P200G组寻找平台潜伏期比NS组及G组明显要长,上台前路程也明显延长,穿越平台次数明显减少(P<0.05)。2、免疫组化检测:1)G组、P50组与NS组相比无显著性差异(P>0.05);2)P100组、P200组、P100G组和P200G组Caspase-3的表达与NS组相比均明显增强(P<0.05);3)P200组,P200G组与P50组相比均有明显增高(P<0.05);4)P100组与NS组与G组有显著性差异(P<0.05)。3、western-blotting检测:1)P50组、G组、P100G组与NS组相比没有显著差异(P>0.05);2)与NS组相比,P100组、P200组和P200G组与β-actin的比值明显高于NS组与β-actin的比值(P<0.05),这三组之间没有显著性差异。结论:神经节苷酯能明显抑制大剂量丙泊酚引起的caspase-3的表达增加,抑制其引起的神经细胞凋亡,减轻其引起的幼鼠学习记忆能力下降。第三部分氯胺酮对幼年SD大鼠认知功能和神经细胞的影响实验研究目的:观察氯胺酮对SD幼年大鼠认知功能和脑神经细胞caspase-3表达的影响。方法:同前,将SPF级SD幼年大鼠22只,日龄17-18天,体重33g-42g,随机分为2组,每组11只,每组分别给予生理盐水10ml/kg(NS组)、氯胺酮50mg/kg(Keta组),采用腹腔注射,一次性给予,连续6天。前5天每天均用Morris水迷宫测试其空间学习能力,第6天撤去平台测试其记忆能力。第6天测试结束后处死实验大鼠,断头取脑组织,每组随机选取8只应用免疫组化方法检测caspase-3,余下3只取新鲜组织做western-blotting检测。结果:1、水迷宫实验中氯胺酮组,潜伏期、上台前路程变长,穿越平台次数减少,与NS组相比均有明显差异(P<0.05)。2、免疫组化及