上海市嘉定区嘉一中2024届高考仿真模拟生物试卷含解析

上海市嘉定区嘉一中2024届高考仿真模拟生物试卷考生请注意：1．答题前请将考场、试室号、座位号、考生号、姓名写在试卷密封线内，不得在试卷上作任何标记。2．第一部分选择题每小题选出答案后，需将答案写在试卷指定的括号内，第二部分非选择题答案写在试卷题目指定的位置上。3．考生必须保证答题卡的整洁。考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．下列关于真核细胞结构和功能的叙述，错误的是（）A．细胞质中许多重要细胞器的形成以膜的分化为基础B．细胞核通过mRNA和核糖体对细胞生命活动进行控制C．胰高血糖素和胰岛素空间结构的形成均需要内质网参与D．细胞骨架由纤维素构成，在物质运输等方面起重要作用2．某生态养殖大棚内，水草丛中栖息着螃蟹，水面上有浮床．其间栽培的某种绿叶蔬菜在水面上方，黄瓜藤枝枝蔓蔓。同时大棚里还栽种了一种特殊辣椒，能起到驱虫的作用。下列有关该生态系统的叙述．正确的是（）A．螃蟹、绿叶蔬菜、黄瓜等生物的分布体现了群落的垂直结构B．特殊辣椒的驱虫作用依赖于生态系统的能量流动C．浮床遮光有利于浮游藻类的生长繁殖，可为水生生物提供食物D．大棚内生态系统中的能量主要来自太阳能和化学能3．多酶片是一种促消化的药品，主要成分是胰蛋白酶、胃蛋白酶。多酶片还具有分解脂质的功效，加速胆固醇的酯化从而降低血液中的胆固醇含量。下列说法合理的是（）A．多酶片应整颗服用，防止唾液淀粉酶对多酶片水解B．胃蛋白酶在肠道中把蛋白质水解成多肽C．胆固醇是动物细胞膜的重要成分之一D．人体小肠黏膜可通过主动运输的方式吸收胰蛋白酶4．某动物种群中AA、Aa和aa的基因型频率分别为55%、30%和15%，假设该种群之后是一个遗传平衡群体，则以下分析错误的是（）A．该种群的子一代中Aa的基因型频率为42%B．该种群的子二代中A、a的基因频率不会发生改变，aa的基因型频率会发生改变C．该种群中基因型频率等于基因频率的一半D．若该种群A、a控制的显性和隐性性状个体数目相等，则说明该显隐性基因频率不等5．如图是某物质跨膜运输的示意图，据图分析错误的是（）A．该物质跨膜运输的顺序为丙→乙→丁→甲B．葡萄糖进入哺乳动物成熟红细胞的方式与该物质的运输方式相同C．该物质跨膜运输过程中需要消耗ATPD．用药物抑制载体蛋白的活性会影响该物质的运输速率6．某生物兴趣小组的同学从资料上获知：二氯二乙胺能够阻止参与DNA复制的酶与DNA相互作用。他们推测二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖，能作为癌症的一种化疗药物。他们对二氯二乙胺作用于癌细胞的适应浓度进行了探究。下列是兴趣小组同学们的实验设计思路，其中正确的是（）A．取小鼠肝脏的肿瘤细胞为实验组，正常肝脏细胞为对照组B．将实验组细胞放在含有不同浓度二氯二乙胺的生理盐水中进行培养C．在进行细胞培养时应放在25℃恒温箱中培养，并保证氧气浓度正常D．实验开始时和实验结束后都要用抽样调查的方法对每组细胞进行计数并记录二、综合题：本大题共4小题7．（9分）2018年4月，（ReproductiveBioMedicine）期刊在线发表的一篇文章显示，到2100年，借助辅助生殖技术（即试管婴儿技术）诞生的人数可能将达到全球总入口的1．5%---约4亿人。请回答下列问题：（1）试管婴儿技术是体外受精技术________技术等人工助孕技术的俗称。（2）体外受精首先需采集卵子，成熟的卵子能与____________的精子结合，形成受精卵。受精卵发育成胎儿的大致过程是受精卵→_____→囊胚→_____→组织器官的分化。（1）在体外培养受精卵时，除了给予一定量的O2以维持细胞呼吸外。还需要提供_______以维持培养液的正常pH。母体对移入子宫的外来胚胎____________，这为胚胎在母体内存活提供了可能。（4）借助于胚胎分割技术，理论上一次可以获得多个胎儿，胚胎分割操作过程霄要特别注意的问题是将__________均等分裂。（5）人也是生态系统的一员，要维持地球的和谐有序发展，我们必须关注生态工程建设。下列结构示意图最能体现生态工程中系统学和工程学原理的是______________。8．（10分）阅读以下资料，回答相关问题。资料1：小鼠制备的抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成的“早早孕试剂盒”，检测早孕的准确率在90%以上。资料2：葡萄糖异构酶在工业上应用广泛，为提高其热稳定性，朱国萍等人在确定第138位甘氨酸为目标氨基酸后，用有效方法以脯氨酸替代甘氨酸，结果其最适反应温度提高了10—12℃，使蛋白质空间结构更具刚性。资料3：巴西是全球最大的甘蔗生产国，但是甘蔗易受螟虫的侵害。2017年6月8日，巴西向世界宣布，全球首款能抵抗螟虫的转基因甘蔗已培育成功，并且批准该品种进入市场。资料4：大肠埃希菌，俗称大肠杆菌。是人和动物肠道中的正常栖居菌。自来水一旦被它污染，就有可能引发肠道传染病，甚至流行病。因此，必须对自来水进行严格的检测，以确保饮水安全。我国规定1000ml自来水中的大肠杆菌数不得超过3个。（1）资料1中，在该“单抗”的生产过程中，将______________作为抗原对小鼠进行接种后，从脾脏中提取B淋巴细胞，并设法将其与鼠的骨髓瘤细胞融合，再用特定的选择培养基进行筛选，选出融合的杂种细胞，对该细胞还需进行____________________，经多次筛选，就可获得足够数量的符合需要的____________。单克隆抗体最主要的优点有_________________。（2）资料2中提到的生物技术属于____工程的范畴。在该实例中，直接需要操作的____________（选填“肽链结构”、“蛋白质空间结构”、“基因结构”）。（3）资料3中获得转基因甘蔗的过程中，核心步骤是________________________，为了避免目的基因和运载体的自身连接成环和反向连接，应该采取的措施是用____________________对目的基因和载体分别进行切割。（4）实验前应进行无菌处理。将漏斗、培养皿、三角瓶和镊子等进行

_________________灭菌。培养基进行_______________灭菌。为了鉴定大肠杆菌，在培养基中应加入_______________________。在该培养基上，大肠杆菌的菌落呈现_________________色。9．（10分）探针是指以放射性同位素、生物素或荧光染料等进行标记的已知核苷酸序列的核酸片段，可用于核酸分子杂交以检测目标核苷酸序列是否存在。如图（1）所是某实验小组制备的两种探针，图（2）是探针与目的基因杂交的示意图。请回答下列有关问题：（1）核酸探针与目标核苷酸序列间的分子杂交遵循________________。设计核苷酸序列是核酸探针技术关键步骤之一。图（1）所示的两种核酸探针（探针2只标注了部分碱基序列）都不合理，请分别说明理由_________________、_________________________。（2）cDNA探针是目前应用最为广泛的一种探针。制备cDNA探针时，首先需提取、分离获得____________作为模板，在_______________的催化下合成cDNA探针。利用制备好的β-珠蛋白基因的cDNA探针与β-珠蛋白基因杂交后，出现了如图（2）中甲、乙、丙、丁等所示的“发夹结构”，原因是____________________。（3）基因工程中利用乳腺生物反应器生产α-抗胰蛋白酶，应将构建好的重组DNA导入___________中，再利用SRY基因（某一条性染色体上的某性别决定基因）探针进行检测，将检测反应呈____________（填阳或阴）性的胚胎进行移植培养。10．（10分）蜘蛛丝是自然界中机械性能最好的天然蛋白纤维，其强度高于制作防弹衣的凯夫拉纤维，有广泛的应用前景，但如何大量获取蜘蛛丝纤维的问题一直未解决。近期，中国科学家利用基因工程技术成功的在家蚕丝腺细胞中大量表达蜘蛛丝蛋白。（1）在转基因过程中，若利用图所示质粒构建基因表达载体，需要用_____________酶来切割目的基因，该切割方法的优点是_____________________________________________(答出一点即可)。（2）为获取大量的蜘蛛丝基因，常采用_______________技术对该基因进行扩增。扩增蜘蛛丝基因前，需根据目的基因的核苷酸序列设计__________种引物。进行扩增时需先加热至90～95℃，加入引物后冷却至55~60℃，以上调控温度操作的目的是____________________。（3）载体中的启动子是____________酶的识别结合位点，以便于驱动遗传信息的表达过程；而载体本身的扩增，需借助于载体上的_________________；载体上的标记基因的作用是_____________________________。（4）研究人员发现若将蛛丝蛋白31号位的色氨酸替换为酪氨酸，蛛丝韧性可提高50％，这项成果用到的生物工程技术为____________________________。11．（15分）研究发现，牛的瘤胃中含有多种纤维素分解菌，这些纤维素分解菌可用于分解秸秆等废弃物。某科研小组按以下实验流程分离获取了牛瘤胃中的纤维素酶高产菌株。（1）纤维素酶是由多种酶组成的复合酶，其中能催化纤维二糖水解的是________。纤维素酶的测定方法，一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的_______进行定量测定。（2）步骤A是_____________，可以通过此步骤增加______________________。（3）科研小组的某个同学将瘤胃菌种提取液接种到适宜的培养液中，调节pH及温度至适宜条件，并持续通入无菌空气，结果一段时间后发现培养液中几乎没有菌种，原因是_________。（4）按照修正后的实验方法，研究人员在刚果红培养基平板上，筛选到了几株有透明圈的菌落（如图）。图中透明圈的大小与纤维素酶的________有关；图中降解纤维素能力最强的菌株是____________。（5）现利用稀释涂布平板法测定该目的菌的数量，在同一稀释倍数下4个平板上均接种0.1ml样品溶液，菌落数分别为156、178、486、191，通过计算得知原样品溶液中每毫升含有目的菌1.75×108个，则稀释倍数是________________。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、D【解题分析】

1、细胞核包括核膜（将细胞核内物质与细胞质分开）、染色质（DNA和蛋白质）、核仁（与某种RNA（rRNA）的合成以及核糖体的形成有关）、核孔（核膜上的核孔的功能是实现核质之间频繁的物质交换和信息交流），是遗传物质贮存和复制的场所，是细胞遗传和代谢的控制中心。2、生物膜系统：内质网、高尔基体、线粒体、叶绿体、溶酶体等细胞器膜和核膜、细胞膜等结构共同构成细胞的生物膜系统。功能：（1）保证内环境的相对稳定，对物质运输、能量转换和信息传递等过程起决定作用。（2）为多种酶提供附着位点，是许多生物化学反应的场所。（3）分隔细胞器，保证细胞生命活动高效、有序地进行。3、、真核细胞中分泌蛋白的合成与分泌过程：附着在内质网上的核糖体合成蛋白质→内质网进行粗加工→内质网“出芽”形成囊泡→高尔基体进行再加工形成成熟的蛋白质→高尔基体“出芽”形成囊泡→细胞膜，整个过程还需要线粒体提供能量。【题目详解】A、在真核细胞的细胞质中大多数细胞器都具有膜结构，故许多细胞器都是以膜的分化为基础形成的，A正确；B、大多数mRNA在细胞核内转录产生，经核孔进入细胞质，与核糖体结合翻译出相应的蛋白质，从而对细胞进行稳定性调控，B正确；C、胰高血糖素和胰岛素都是蛋白质类的激素，在核糖体上合成后进入内质网形成一定的空间结构，经过高尔基体的进一步加工成熟后分泌出细胞，C正确；D、细胞骨架是由蛋白质构成的网架结构，在物质运输能量转换等方面起重要作用，D错误。故选D。【题目点拨】本题是对细胞结构和功能的综合考查，需要考生识记生物膜的组成和功能，分泌蛋白的合成途径和细胞骨架等知识。2、A【解题分析】

生态系统由非生物的物质和能量、生产者、消费者和分解者组成，完整的结构决定其功能；生态系统的功能包括物质循环、能量流动和信息传递。【题目详解】A、螃蟹、绿叶蔬菜、黄瓜等生物的分布体现了群落的垂直结构，A正确；B、特殊辣椒的驱虫作用依赖于生态系统的信息流动，B错误；C、浮床遮光不利于浮游藻类的生长繁殖，C错误；D、从题干中看出大棚内生态系统中的能量来自于生产者固定的太阳能，没有人工提供能量（化学能），D错误。故选A。【题目点拨】本题考查生态系统的结构和功能的相关知识，重点是对于群落结构和生态系统能量流动的知识的掌握。3、C【解题分析】

“多酶片”的双层结构应是依据“药物先进入胃，然后才进入小肠”来设计的，外层含有胃蛋白酶，内层含有胰蛋白酶、胰淀粉酶等，使其中各种酶能缓慢地释放出来发挥作用。据此分析解答。【题目详解】A.多酶片应整颗服用，防止胃酸对多酶片的破坏，A错误；B.胃蛋白酶在胃中把蛋白质水解成多肽，B错误；C.胆固醇是动物细胞膜的重要成分之一，C正确；D.胰蛋白酶属于大分子物质，不可通过主动运输的方式吸收，D错误。故选C。4、B【解题分析】

1、遗传平衡定律：遗传平衡定律也称哈代——温伯格定律，其主要内容是指：在理想状态下，各等位基因的频率和等位基因的基因型频率在遗传中是稳定不变的，即保持着基因平衡。该理想状态要满足5个条件：①种群足够大；②种群中个体间可以随机交配；③没有突变发生；④没有新基因加入；⑤没有自然选择。此时各基因频率和各基因型频率存在如下等式关系并且保持不变：设A=p，a=q，则A+a=p+q=1，AA+Aa+aa=p2+2pq+q2=1。2、由题意知，该种群中，AA=55%、Aa=30%、aa=15%，该种群中基因频率A=AA+Aa=0.55+×0.3=0.7，a=1-0.7=0.3。【题目详解】A、由分析可知，该种群中，AA=55%、Aa=30%、aa=15%，该种群中基因频率A=AA+Aa=0.55+×0.3=0.7，a=1-0.7=0.3，所以，由哈代——温伯格平衡定律得，该种群子一代中Aa的基因型频率=2×A×a=2×0.7×0.3=0.42即42%，A正确；B、由于该种群之后是一个遗传平衡群体，所以该种群的子二代中A、a的基因频率不会发生改变，aa的基因型频率也不会发生改变，B错误；C、按照遗传平衡定律计算，由于雄性只有一条X性染色体，则雄性的X基因频率就是基因型频率，但雄性占总数的，则XbY的频率为Xb基因频率的一半，C正确；D、若该种群A、a控制的显性和隐性性状个体数目相等，即aa=50%，由遗传平衡定律得，a=即基因频率A<a，D正确。故选B。【题目点拨】本题旨在考查学生理解遗传平衡定律的含义和使用条件，并应用相关知识解决实际问题，学会应用遗传平衡定律进行相关计算。5、B【解题分析】

小分子物质跨膜运输的方式有自由扩散、协助扩散和主动运输：名称运输方向载体能量实例自由扩散高浓度→低浓度不需不需水，CO2，O2，甘油，苯、酒精等协助扩散高浓度→低浓度需要不需红细胞吸收葡萄糖主动运输低浓度→高浓度需要需要小肠绒毛上皮细胞吸收氨基酸，葡萄糖，K+，Na+等【题目详解】A、初始状态为丙，图示物质运输过程表示被运输的物质先与载体蛋白特异性结合，在有能量供应的条件下载体蛋白发生变形，物质释放出去，故顺序为丙→乙→丁→甲，A正确；B、图示物质运输方式为主动运输，葡萄糖进入哺乳动物成熟红细胞的方式为协助扩散，两者方式不同，B错误；C、由图可知该物质跨膜运输过程中需要消耗能量，主要由ATP提供，C正确；D、该物质运输过程中需要载体蛋白协助，用药物抑制载体蛋白的活性会导致运输速率下降，D正确。故选B。6、D【解题分析】

分析题目可知，本题是通过实验研究癌症治疗的方法，实验设计应遵循对照原则和单一变量原则，由实验目的可知，自变量是不同浓度的二氯二乙胺，因变量是癌细胞增殖的数量。【题目详解】A、应该是含有肿瘤细胞的培养液中添加不同浓度的二氯二乙胺溶液作为实验组，对照组中加入等量的生理盐水，A错误；B、应该是将细胞放在培养液中培养，B错误；C、动物细胞的培养应该在37℃恒温箱中培养，C错误；D、对于细胞的计数可以采用抽样检测法利用血球计数板计数，实验前后实验后都计数并记录，D正确。故选D。二、综合题：本大题共4小题7、胚胎移植获能桑椹胚原肠胚CO2基本上不发生免疫排斥反应内细胞团D【解题分析】

1、试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。2、胚胎移植的生理基础（1）供体与受体相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境；（2）胚胎在早期母体中处于游离状态，这就为胚胎的收集提供了可能；（1）子宫不对外来胚胎发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。（4）胚胎遗传性状不受受体任何影响。1、胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；（2）桑椹胚：12个细胞左右的胚胎；（1）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔；（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。【题目详解】（1）试管婴儿技术是体外受精技术、胚胎移植技术等人工助孕技术的俗称。（2）体外受精首先需采集卵子，成熟的卵子能与获能的精子结合，形成受精卵。受精卵发育成胎儿的大致过程是受精卵→桑棋胚→囊胚→原肠胚→组织器官的分化。（1）动物细胞培养时，提供CO2的作用是维持培养液的正常pH。母体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这为胚胎在母体内存活提供了可能。（4）胚胎分割操作过程需要将内细胞团均等分裂，否则会影响分割后胚胎的进一步发育。（5）通过改善和优化系统结构可以改善功能，即系统的结构决定功能原理，图中最能体现该原理的是D图所示。故选D。【题目点拨】本题考查胚胎工程和生态工程的相关知识，要求考生识记试管婴儿技术的概念；识记早期胚胎发育的具体过程以及胚胎移植的基本程序；识记生态工程的原理及实例，能结合所学的知识准确答题。8、人绒毛膜促性腺激素克隆化培养和抗体检测杂交瘤细胞特异性强、灵敏度高，并可大量制备蛋白质基因结构基因表达载体的构建使用两种能产生不同黏性末端的（不同）限制酶干热高压蒸汽伊红—美蓝黑【解题分析】

1、单克隆抗体的制备过程的细节：（1）二次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。（2）细胞来源：B淋巴细胞：能产生特异性抗体，在体外不能无限繁殖；骨髓瘤细胞：不产生专一性抗体，体外能无限繁殖。（3）杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体。（4）提取单克隆抗体：从培养液或小鼠腹水中提取。2、单克隆抗体优点：特异性强，灵敏度高，能大量制备。3、基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取；第二步：基因表达载体的构建；第三步：将目的基因导入受体细胞；第四步：目的基因的检测和表达。【题目详解】（1）资料1中，在该“单抗”的生产过程中，将人绒毛膜促性腺激素作为抗原对小鼠进行接种后，从脾脏中提取B淋巴细胞，并设法将其与鼠的骨髓瘤细胞融合，再用特定的选择培养基进行筛选，选出融合的杂种细胞，对该细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的符合需要的杂交瘤细胞。单克隆抗体最主要的优点有特异性强、灵敏度高，并可大量制备。（2）资料2是改造现有蛋白质，使之符合人类需求，属于蛋白质工程，其原理是通过改造基因来获得相应功能的蛋白质。（3）基因工程的关键环节是构建基因表达载体，为了避免目的基因和运载体的自身连接成环和反向连接，应该采取的措施是使用两种能产生不同黏性末端的（不同）限制酶对目的基因和运载体分别进行切割。（4）微生物培养过程中要注意防止杂菌污染，培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，漏斗、培养皿、三角瓶和镊子等进行干热或高压蒸汽灭菌，为了鉴定大肠杆菌，在培养基中应加入伊红——美蓝。在该培养基上，大肠杆菌的菌落呈现黑色。【题目点拨】本题考查单克隆抗体的制备过程和基因工程等相关知识，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查。9、碱基互补配对原则探针1碱基序列过短，特异性差探针2自身会出现部分碱基互补配对而失效mRNA逆转录酶β-珠蛋白基因中含有内含子（或不表达序列）受精卵阴【解题分析】

分析图（1）：探针一序列为-CAGG-，该序列过短，特异性差；探针二序列为-CGACT--AGTCG-，该序列有自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效。

分析图（2）：探针与目的基因杂交后，出现甲、乙、丙、丁等所示的“发夹结构”。【题目详解】（1）核酸探针是单链DNA分子，其与目标核苷酸序列间的分子杂交遵循碱基互补配对的原则。图（1）中探针1碱基序列过短，特异性差；探针2自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效。因此这两种探针都不合理。（2）cDNA是以mRNA为模板逆转录形成的，该过程需要逆转录酶的催化。逆转录法合成的cDNA不含内含子，而β-珠蛋白基因中含有不表达序列，因此探针利用制备好的β-珠蛋白基因的cDNA探针与β-珠蛋白基因杂交后，出现了如图二中甲、乙、丙、丁等所示的“发夹结构。（3）利用乳腺生物反应器生产α-抗胰蛋白酶时，应将构建好的重组DNA导入受精卵中，再利用SRY探针进行检测，将检测反应呈阴性（雌性）的胚胎进行移植。【题目点拨】本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生的识图能力和理解所学知识要点的能力；应用能力和关注对科学、技术和社会发展有重大影响和意义的生物学新进展。10、XbaI和SacI防止目的基因自身环化、防止目的基因反向连接PCR2使DNA解链，然后使引物结合到互补DNA链上RNA聚合酶复制原点重组DNA的鉴别与选择蛋白质工程【解题分析】

1、基因工程的操作步骤包括：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。其中基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤。基因表达载体的构建：①过程：一般用同一种限制酶切割目的基因和运载体，再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子。②目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用。③基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。（1）启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始；（2）终止子在基因的尾端，它控制着转录的结束；（3）标记基因便于目的基因的鉴定和筛选。2、PCR扩增技术：PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：（1）模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备。（2）模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。（3）引物的延伸：DNA模板--引物结合物在Taq酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链。【题目详解】（1）识图分析可知，构建基因表达载体时，目的基因需要插入到启动子和终止子之间，图中启动子和终止子之间存在XbaI和SacI的酶切位点，因此需要用XbaI和SacI限制酶切割目的基因，以产生与质粒相同的末端，相比用同一种酶进行酶切，用两种酶切割可以防止目的基因自身环化或防止目的基因反向连接。（2）为获取大量的蜘蛛丝基因，常采用PCR扩增技术扩增目的基因。利用PCR技术扩增蜘蛛丝基因前，需根据目的基因的核苷酸序列设计2种引物分别与2条模板链结合；进行PCR时需加热至90~95℃然后冷却至55~60℃，此操作的目的是使DNA解链，然后使引物结合到互补DNA链上。（3）基因表达载体中的启