高效液相色谱在制药行业中的应用-课件

高效液相色谱在制药行业中的应用高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件1应用技术发展部

2011年高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件2北京创新通恒科技有限公司是一家面向全球的专业HPLC企业，主要致力于高效液相色谱系统研制、开发、生产和销售。创建于2000年，公司总部位于北京市海淀区中关村高科技园区上地信息产业基地，是一家极具创造力的国家级高新技术企业。十年来一直秉承“精益求精，追求品质，值得信赖”传统，根据用户需求，在用户关键领域进行持续的技术研发。我们拥有卓越的技术团队和专家级的一流研发人才，“CXTH

DAC800工业化生产型HPLC系统”研发投产，将中国工业化色谱系统推向世界前列，这是中国大型纯化分离研发领域的一座里程碑；“CXTH

Kilotide500

DNA合成仪”投入使用，弥补中国大型合成设备领域的空白。高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件3关于我们国家级高新技术企业国家级软件产品企业创新通恒科学技术部技术创新基金国家级、北京高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件4市创新基金关于我们软件著作权7项仪器仪表协会创新金奖发明专利3项，实用新型专利13项DAC800大型工业化制备色谱系统BCEIA金奖公司资质、奖项高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件5高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件6北京创新通恒科技有限公司北京钢臣科技有限公司总经理办公室开发部财务部营销事业部中小设备加工中心应用技术发展部工业化设备加工中心上海办事处成都办事处广州办事处售后技术支持中心组织构架高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件7走近我们高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件8引言：

HPLC的特点HPLC在制药行业中的应用药物色谱分析方法的开发药物色谱纯化方法的建立和优化：

从分析到工业制备目录高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件9内容提要引言HPLC的特点：高效：分离效能高高灵敏度应用范围广：70%以上的有机化合物可以用HPLC分析分析速度快条件温和，样品不被破坏分析HPLC由于灵敏度高，快速简便，广泛地应用于药物分析制备HPLC是目前分离与纯化领域中处理多组分复杂体系的最有效的方法高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件10引言：

HPLC的特点HPLC在制药行业中的应用药物色谱分析方法的开发药物色谱纯化方法的建立和优化：

从分析到工业制备目录高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件11内容提要分析型HPLC在制药行业中的应用检测药物含量天然药物化学成分复杂，有效成分可能有一个，也可以有多个，因此精确测定各有效成分的含量对药品质量控制，建立质量标准具有重要的意义。高效液相色谱法由于其专一性、灵敏度高、快速简便的特点可广泛应用于药物分析中的定量分析，尤其在干扰因素见多的时候表现出更大的优越性。药效检测：药物代谢动力学研究，新药效能研究检测药物残留高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件12三七药材组分分析：高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件13感冒清热颗粒中的葛根素有效成分分析：高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件14高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件15高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件16高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件17半制备型HPLC在制药行业中的应用高通量筛选活性物质实验室规模纯化（克级）高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件18DISCOVERYACTIVECOMPONENT发现活性高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件19高通量筛选活性物质中药提取物或发酵液等的分析谱图高通量筛选活性物质高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件20用半制备色谱系统，对可能具有生物活性的组分，多次进样，分段制备几十毫克做活性研究，最终确定活性组分高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件21高通量筛选活性物质高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件22制备HPLC在制药行业中的应用纯化药物有效成分高附加值产品（如紫杉醇、长春碱等癌症治疗药物）上样量大，附加值低产品（甜菊糖苷等附加值低的药物辅料）工艺改进类产品（增大生产量或提高产品纯度类产品）高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件23制备HPLC在制药行业中的应用高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件24小试级制备色谱系统：方法的放大及标准品、对照品的制备。高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件25中试级制备色谱系统：年产公斤级至百公斤级高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件26DAC800

型工业化色谱：年产吨级高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件27引言：

HPLC的特点HPLC在制药行业中的应用药物色谱分析方法的开发药物色谱纯化方法的建立和优化：从分析到工业制备目录高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件28内容提要液相色谱实验所需的基本参数流动相：种类及配比，等度或梯度固定相：色谱柱类型及内径、长短流动相输送系统参数：流速检测器参数温度控制进样量以上参数即构成一个具体的HPLC方法；亦称色谱条件高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件29药物色谱分析方法的开发高压输液泵的选择平流（单泵）高压梯度使用多台色谱泵，在泵后混合配置灵活、简单，脱气简单低压梯度用单泵产生梯度，泵前混合对脱气要求高高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件30检测器的选择a、紫外可见光检测器应用最广泛的检测器，是在UV及VIS区有吸收物质检测的首选检测器。b、示差折光检测器一种通用型的检测器，灵敏度偏低，对温度稳定性要求过高，不能用于梯度洗脱。通常用来分析糖类及高聚物（GPC）c、荧光检测器灵敏度极高，常用来进行痕量检测。

d、二极管阵列检测器（DAD）可用于全波长的检测，可以测量峰纯度，可在线得到色谱图和光谱图。

e、蒸发光散射检测器一种通用型检测器，它可以检测挥发性低于流动相的任何样品。ELSD可以用于测量无生色团物质的检测，如碳水化合物、类脂物、聚合物、不进行衍生化的脂肪酸及氨基酸、表面活性剂及结构不明又无标准的物质的检测。高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件31根据分离模式划分的色谱柱类型色谱柱的选择高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件32高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件33常用色谱柱类型高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件34ODS（C18）—应用范围最广的填料，大部分小分子有机化合物都可进行分析C8、C4—保留要比C18弱，适合用于大分子的多肽和蛋白类的分离纯化氨基柱—正反双模式，主要用于小分子糖类化合物苯基柱—通常用于分离含苯环的化合物氰基柱—正反双模式，和ODS基不同的色谱间作用力，因而氰基柱拥有 独特的选择性正向硅胶环糊精—根据物质光学性质的不同进行手性分离进样系统的选择六通进样阀六通阀的构造Load状态Inject状态自动进样器高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件35为保证重现性以及峰形等，很多情况下需要使用柱温箱来控制柱温。选配：恒温装置高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件36引言：

HPLC的特点HPLC在制药行业中的应用药物色谱分析方法的开发药物色谱纯化方法的建立和优化：

从分析到工业制备目

录高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件37内容提要药物色谱纯化方法的建立和优化：从分析到工业制备理论的放大设备的放大高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件38分析型色谱：线性色谱指组分在固定性和流动相中的平衡浓度呈正比例关系，即吸附（分配）等温线为一条直线。用于分离和鉴别样品中的组分，为此希望能在尽可能小的进样量下，提供尽可能高的组分分辨率。制备色谱：非线性色谱在制备色谱中，进样量一般都比较大，例如在克量级范围，这时样品在流动相和固定相中的比例不再是正比例的关系，相对应的吸附（分配）等温线将发生弯曲。用于分离、富集或纯化混合物中的某一或某些组分，为此需要一定的处理量，一般进样量比分析型色谱大得多。能有适当的分离度，并要考虑层析分离过程的规模、速率和分离成本。高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件39理论的放大：非线性色谱线性色谱分析制备非线性色谱理论的放大：非线性色谱高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件40制备色谱峰型高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件41理论的放大：非线性色谱色谱峰型不再对称色谱峰的保留时间随着进样浓度而变化色谱峰高度（峰面积）与进样浓度不成正比高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件42非线性色谱的特点理论的放大：非线性色谱浓度超载进样体积超载进样PKLangmuir型容量因子降低，峰形从高斯曲线变为三角形提高样品的浓度，保持进样体积不变；取决于组分在流动相中的溶解度峰高不变，峰变宽并呈矩形取决于进样体积，生产效率决定于制备柱直径，需要小颗粒填料高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件43理论的放大：过载进样理论的放大：过载进样高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件44理论的放大：过载进样应尽可能选用流动相来溶解样品，但应注意样品在流动相中应有良好的溶解度。同时，若样品体积太大，分辨能力就会下降；若样品过浓，则可能在柱的顶部形成沉淀。尽管如此，为每次可分离得到更多的样品，还是应在小体积的流动相中溶解较多的样品。可将样品溶于不同于流动相的溶剂，但用此法时需很谨慎。高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件45设备的放大：分析设备与制备设备高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件46设备的放大：分析设备与制备设备设备

的放大：分析设备与制备设备高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件47设备的放大：分析设备与制备设备更大的容器：储罐流量更大的输液泵≥50ml定量管≥1ml进样泵≥50ml≥10mm法兰柱

DAC大体积流通池接溶剂回收系统高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件48制备系统分析制备放大优化分析方法的选择性在分析柱上进行超量载样放大到制备柱高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件49设备的放大：过程原料分析分析柱模拟制备放大至半制备（50DAC）中试放大（150

or200DAC)工业化制备（300-800DAC)完全

线性放大高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件50设备的放大：过程可完全线性放大原因：可达到30000每米的塔板数，几Ⓖ与10um填料的分析柱柱效相当800DAC柱效测试结果图设备的放大：过程高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件51重点1高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件52上样量的调整：mp/ma=lp/la *

rp2

/ra

2L:柱长；m：进样量；r：色谱柱内径

p:制备柱；a：分析柱设备的放大：公式重点2高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件53流速的调整：Fp/Fa

=

Vp/Va

=

Lp/La *

rp2

/ra

2F

：流速；V:柱体积；L:柱长；

r：色谱柱内径；p:制备柱；a：分析柱设备的放大：公式梯度的调整方法：tp/ta=Vp/Va *Fp/FaF

：流速；V:柱体积；t:梯度洗脱时间；p:制备柱；a：分析柱重点3高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件54设备的放大：公式example样品：粗品含量大约68%，白色粉末状固体，对热（能够耐受100摄氏度）和光稳定客户要求：纯化后纯度大于99%，单杂小于0.8%，回收率达到70%1step:了解客户需求高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件55从分析到制备的过程：案例2step:原始样品分析example用分析型HPLC（填料5u甚至更小）对样品进行分离，并对流动相进行改进，直到主峰和杂质完全分离，摸索好的条件用来对以后纯化后的样品进行纯度分析。高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件56从分析到制备的过程：案例example分析条件：甲醇：乙腈：水=81：12：7检测波长：246nm流速：1.0mL/min柱子：C18，5μm，4.6*250mm结果从分析到制备的过程：案例高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件573step:分析柱模拟制备填料粒径≥10um，4.6*250mm的柱子不加非挥发性的酸碱盐，重新摸索制备条件高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件58主峰和杂质分离充分的条件下开始做过载实验将主峰分段收集，一般为分成10段左右分别测定纯度，计算回收率，进一步优化制备条件从分析到制备的过程：案例example制备条件摸索流动相填料90%甲醇、75%甲醇、75%乙腈、70%乙腈、60%乙腈。4种不同品牌的填料60%乙腈XX牌填料

C18-10um-100A确定高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件59确定从分析到制备的过程：案例example分析柱模拟制备谱图结果从分析到制备的过程：案例高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件604step:确定最大上样量不断增大上样量，直到回收率明显下降理论上样量：填料质量的

3‰---8‰，可以从3‰逐渐增大来确定最大上样量高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件61example60%乙腈，进样量4‰时，收率为36.3%60%乙腈，进样量3‰时，收率为78.9%选择上样量为3‰从分析到制备的过程：案例高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件62最终确定的制备条件：流动相：60%乙腈-水上样量：填料质量的3‰填料：XX牌-C8-10um-100A样品溶剂：流动相高效液相色谱在制药行业中的应用ppt课件6