《迷迭香水中微量芳香性化合物的测定 气相色谱法》-编制说明

《迷迭香水中微量芳香性化合物的测定气相色谱法》标准征求意见稿编制说明用率低的迷迭香水的研究和标准化工作对我省迷迭香系列产品附加值的提升有要是为了形成测定迷迭香水中微量芳香性物质的标准化检测规范，构建一个准图1直立型迷迭香监标函〔2023〕25号），项目由湖南省产商品质量检验研究院、湖南省药品检湖南先伟阳光生物科技有限公司、湖南德普斯医疗科技有限公司在前期资料搜2023年2月标准制定任务下达后，湖南省产商品质量检验研究院、湖南省限公司迅速组建了标准起草组并召开了项目启动会议。会上确定了标准修订原2023年3～10月：按照第一次会议安排，标准起草组单位和成员各司其职到的反馈意见进行了逐条讨论和研究并依据相关意见对标准进行了认真修改和《迷迭香水中微量芳香性化合物的测定气相色谱法》标准在制定工作中，定了本文件的适用范围，将迷迭香水芳香性化合物检测的项容的可行性，确保标准要求可以有效适用于迷迭香水中相关芳香性物质检测需本文件中涉及的术语和定义均引用国内、国际现行标准和行业管理规范要调节试样pH值至4.0-5.0后，用四氯化碳萃取微量芳香性化合物，离心分法的可操作性和实验室间所有的设备仪器差异，本文件规μm,或相当色谱柱。载气，高纯氮气(纯度≥99.999%);恒流模式，柱流速1.0mL/min。采用程序升温：柱初始温度50℃,保持3min,以4℃/min升温至160℃,保持0min,以20℃/min升温至240℃,保持5.5min,色谱分析进样方式：分流进样，分流比20:1。保留时间的确定：将24种各标准储备溶液 试样溶液注入气相色谱仪中，得到峰面积，根据标准曲线计算得到待测溶液中24种目标物质的质量浓度。如果待测试样溶液某种目标物质峰面积超过标准曲图224种混标稀释液的气相色谱谱图(50μg/mL)图3天然迷迭香纯露(进口迷迭香叶)的气相色谱谱图图4天然迷迭香纯露(中国产迷迭香叶)的气相色谱谱图注：图2、图3、图4代表的物质与表1相同序号代表的物质一致。表124种目标物质在出峰时间、定量限、线性回归方程和相关系数r²(n=3)目标物质保留时间1α--蒗烯234月桂烯5678青叶醛11.9450.03Y=811.7X-41080.99979γ-萜品烯12.7880.03Y=1260.9X-58310.9997对伞花烃13.5590.03Y=1376.0X-64930.9997萜品油烯13.9720.03Y=1152.9X-53220.9997甲基庚烯酮15.7200.03Y=1039.5X-52980.999717.2980.03Y=984.6X-49570.9997樟脑（天然）21.2480.03Y=1473.7X-71870.9997芳樟醇22.1990.03Y=1091.4X-51260.9997乙酸芳樟酯22.4010.03Y=1240.2X-54350.9997乙酸异龙脑酯23.2940.03Y=1492.2X-72090.9997反式石竹烯23.5750.03Y=1901.2X-77220.99974-萜烯醇23.8170.03Y=1613.3X-76820.999720异龙脑25.6900.03Y=1256.6X-55700.999821α-松油醇26.4790.03Y=924.5X-36380.999822马鞭草烯酮26.7300.03Y=1396.2X-74400.999723乙酸橙花酯27.1740.03Y=1172.0X-44360.999824香叶醇30.4580.03Y=1345.2X-62390.9997表23种不同添加浓度下24种目标物质的回收率和精密度（n=6）序号混标：1.5μg混标：15μg混标：150μgRSD(%)RSD(%)RSD(%)1α--蒎烯3.5094.60.5796.30.662崁烯90.283.80.8595.03β-蒎烯89.588.00.8490.14月桂烯93.32.0492.64.8895.23.655α-松油烯98.43.8895.63.4796.63.906柠檬烯95.13.9997.43.8495.42.9671,8-桉叶素2.850.768青叶醛94.798.30.4497.40.969γ-萜品烯99.14.8597.73.9198.23.50对伞花烃2.963.4599.92.55萜品油烯95.04.7598.54.5196.34.25甲基庚烯酮2.200.7389.280.90.3586.2樟脑（天然）0.960.89芳樟醇0.80乙酸芳樟酯0.88乙酸异龙脑酯0.87反式石竹烯94.24.5595.34.9598.64.004-萜烯醇97.194.60.5795.620异龙脑89.483.80.8590.421α-松油醇90.988.00.8492.422马鞭草烯酮97.23.8792.64.8895.53.2023乙酸橙花酯94.44.8795.63.4798.024香叶醇4.0697.43.843.51序号纯露半成（湖南迷迭香叶）纯露半成（河南迷迭香叶）纯露半成（云南迷迭香叶）纯露半成品4（进口叶）市售市售纯露2市售纯露3市售纯露41α--蒎烯0.90.90.90.958.60.80.80.92崁烯0.50.60.00.616.0NDNDND3β-蒎烯NDNDND0.53.4NDNDND4月桂烯0.60.70.60.64.7NDNDND5α-松油烯0.60.60.50.6ND6柠檬烯0.60.60.60.67.3NDND0.571,8-桉叶素355.7370.5376.9356.3261.859.58青叶醛NDND0.99γ-萜品烯NDNDNDND1.5NDNDND对伞花烃NDNDND0.66.4NDNDND萜品油烯NDNDNDND1.2NDNDND甲基庚烯酮0.90.80.70.60.9樟脑（天然）90.080.2571.654.527.445.8芳樟醇29.723.833.816.55.927.224.4乙酸芳樟酯NDNDNDNDNDNDNDND乙酸异龙脑酯0.90.7反式石竹烯NDNDND0.92.1ND0.6ND4-萜烯醇15.222.93.57.65.38.920异龙脑NDNDNDND2.92.2NDND21α-松油醇68.674.870.1228.411.724.225.640.522马鞭草烯酮802.3762.0853.9NDND97.0322.823乙酸橙花酯NDNDNDNDNDNDNDND24香叶醇备注：ND代表未检出20.65.60.9（小于检出限:0.30mg/L）。4.626.1化合物，通过气相色谱分离检测样品中的目标化合物含量，具有较高的准确度和实用性。依据GB/T27417-2017《合格评定化学分析方法确认和验证指南》,采用实验室间方法确认的方法，与湖南先伟实业有限公司进行实验室间方法比对，对适用对象、线性范围、定量限和精密度进行考察。经验证，各项方法学参数均满足GB/T27417-2017要求。相关验证材料见附件1。图5气相色谱仪式中：X——试样中待测组分含量，单位为毫克每千克（mg/L）；ρ——由标准曲线得出的试样液中待测物的质量浓度，单位为微克每毫升(μg/mL）;V1——萃取剂四氯化碳体积，单位为毫升（mL）；V0——试样体积，单位为毫升（mL）；1000——换算系数。结果保留三位有效数字。用率低的迷迭香水的研究和标准化工作对我省迷迭香系列产品附加值的提升有地方标准验证材料2023年9月11-9月15日，湖南先伟阳光生物科技有限公司对《迷迭香水中微量芳香性化合物的测定气相色谱法（草案）》进行方法学验证。用到的试剂材料与湖南省质检院保持一致。一、适用对象的验证对国产迷迭香纯露半成品（湖南产）进行检测，检测结果与湖南省质检院结果比较，汇总结果见表1（n=4）.表1半成品检验结果比较（n=4）序号湖南省质检院结果（mg/L）湖南先伟结果（mg/L）偏差（%）1α--蒎烯NDND/2崁烯NDND/3β-蒎烯NDND/4月桂烯NDND/5α-松油烯NDND/6柠檬烯NDND/71,8-桉叶素355.7332.8-6.78青叶醛+6.59γ-萜品烯NDND/对伞花烃NDND/萜品油烯NDND/甲基庚烯酮-8.0+8.0樟脑（天然）90.088.2-2.0芳樟醇29.728.0-5.9乙酸芳樟酯NDND/乙酸异龙脑酯+11.8反式石竹烯NDND/4-萜烯醇-4.920异龙脑NDND/21α-松油醇68.665.8-4.222马鞭草烯酮802.3810.8+1.123乙酸橙花酯NDND/24香叶醇ND代表未检出（定量限：1.0mg/L）-7.2表2成品检验结果比较（n=4）序号目标物质湖南省质检院结果（mg/L）湖南先伟结果（mg/L）偏差（%）NDND/2崁烯NDND/3β-蒎烯NDND/4月桂烯NDND/5α-松油烯NDND/6柠檬烯NDND/71,8-桉叶素8青叶醛0.90.89γ-萜品烯NDND/10对伞花烃NDND/11萜品油烯NDND/+7.70.90.92+2.214樟脑（天然）45.848.0+4.715芳樟醇24.421.716乙酸芳樟酯NDND/17乙酸异龙脑酯0.918反式石竹烯NDND/194-萜烯醇8.9-9.420异龙脑NDND/21α-松油醇40.538.2-5.822马鞭草烯酮322.8338.7+4.823乙酸橙花酯NDND/24香叶醇26.124.3-7.1ND代表未检出（定量限：1.0mg/L）由表1和表2可知，在湖南省质检院和湖南先伟检测的迷迭香纯露半成品（湖南产）和市售迷迭香纯露成品中24种目标物质含量的偏差范围在±15%范围内。二、线性范围配制2.0、5.0、10.0、20.0、50.0、100.0、800.0μg/mL的混合标准系列工作溶液，绘制标准曲线，线性方程和相关系数r2见表3.表3线性回归方程和相关系数（n=2）1α--蒎烯Y=1230.5X-54430.9997Y=865.7X-3631.00002崁烯Y=1238.6X-53100.9997Y=827.9X-2600.99993β-蒎烯Y=1308.6X-59290.9997Y=859.8X-3930.99994月桂烯Y=1208.8X-55030.9997Y=696.9X-2050.99995α-松油烯Y=1350.1X-62080.9997Y=818.3X-3281.00006柠檬烯Y=1392.1X-65140.9997Y=834.6X-3930.999971,8-桉叶素Y=1321.1X-66210.9997Y=697.4X-2581.00008青叶醛Y=811.7X-41080.9997Y=586.7X-2091.00009γ-萜品烯Y=1260.9X-58310.9997Y=862.6X-7430.9999对伞花烃Y=1376.0X-64930.9997Y=934.6X-3130.9999萜品油烯Y=1152.9X-53220.9997Y=736.4X-5121.0000甲基庚烯酮Y=1039.5X-52980.9997Y=665.6X-2480.9999Y=984.6X-49570.9997Y=602.8X-2861.0000樟脑（天然）Y=1473.7X-71870.9997Y=760.8X-2380.9999芳樟醇Y=1091.4X-51260.9997Y=726.4X-3071.0000乙酸芳樟酯Y=1240.2X-54350.9997Y=667.1X-6460.9999乙酸异龙脑酯Y=1492.2X-72090.9997Y=705.1X-4450.9999反式石竹烯Y=1901.2X-77220.9997Y=756.3X-4040.99994-萜烯醇Y=1613.3X-76820.9997Y=848.5X-3701.000020异龙脑Y=1256.6X-55700.9998Y=769.4X-5790.999821α-松油醇Y=924.5X-36380.9998Y=459.7X-2300.999922马鞭草烯酮Y=1396.2X-74400.9997Y=741.1X-1200.999923乙酸橙花酯Y=1172.0X-44360.9998Y=667.5X-7360.999624香叶醇Y=1345.2X-62390.9997Y=732.0X-6940.9998线性范围和线性回归方程相关系数符合GB/T27417-2017《合格评定化学分析方法确认和验证指南》5.3要求（线性范围包含6个校正点，相关系数≥0.99）。三、检出限和定量限按照《迷迭香水中微量芳香性化合物的测定气相色谱法（草案）》中规定的检出限（0.30mg/L）和定量限（1.0mg/L）浓度，湖南先伟添加混标溶液，考察在规定检出限浓度下，24种目标物质的信噪比是否大于等于3；考察在规定定量限浓度下，24种目标物质的信噪比是否大于等于10（n=3）.结果见表4.表4检出限和定量限（n=3）1α--蒎烯5.612崁烯4.883β-蒎烯5.394月桂烯4.345α-松油烯5.516柠檬烯5.5171,8-桉叶素6.38青叶醛5.819γ-萜品烯7.05对伞花烃6.9320.68萜品油烯5.82甲基庚烯酮6.298.8723.70樟脑（天然）7.5822.50芳樟醇6.33乙酸芳樟酯5.58乙酸异龙脑酯5.07反式石竹烯8.4321.564-萜烯醇3.7920异龙脑7.6821α-松油醇5.2122马鞭草烯酮6.32