肝脏特异性F蛋白的克隆表达及其多抗制备的任务书

肝脏特异性F蛋白的克隆表达及其多抗制备的任务书任务书一、题目肝脏特异性F蛋白的克隆表达及其多抗制备二、研究背景和意义肝脏特异性F蛋白是一种肝细胞特异性膜蛋白，其在肝细胞中的表达量较高，同时在其他组织中的表达量较低或者不存在。因此，肝脏特异性F蛋白可以作为肝脏细胞的标志物，在诊断肝脏疾病、观察肝脏功能状态等方面具有重要的临床价值。然而，目前对于肝脏特异性F蛋白的克隆表达及其多抗的制备尚未被深入研究，因此本研究旨在探究肝脏特异性F蛋白的克隆表达技术，并研制出其相应的多抗，为肝脏疾病的临床诊断提供较为可靠的检测方法和手段。三、研究内容1、利用基因工程技术对肝脏特异性F蛋白进行克隆表达。2、对克隆表达后的蛋白进行纯化，并对其进行鉴定和定量。3、筛选出高亲和力的肝脏特异性F蛋白多抗，并对其进行纯化和鉴定。4、对多抗进行免疫组化等方面的应用研究。四、研究方法1、克隆表达：利用基因工程技术对肝脏特异性F蛋白进行克隆表达。2、纯化：对克隆表达后的蛋白进行纯化，包括各种离子交换、凝胶过滤、亲和层析等技术。3、鉴定和定量：对纯化后的蛋白进行SDS和Westernblot等手段进行鉴定和定量。4、筛选出多抗：通过多次免疫和筛选，得到高亲和力的肝脏特异性F蛋白多抗。5、纯化和鉴定：对多抗进行纯化和鉴定，包括各种针对多抗的层析技术。6、应用研究：利用多抗进行免疫组化等方面的应用研究。五、进度安排第一年：1、收集相关文献，熟悉肝脏特异性F蛋白的基本信息和研究现状。2、对肝脏特异性F蛋白的基因进行克隆表达。3、对克隆表达后的蛋白进行纯化。第二年：1、对纯化后的蛋白进行鉴定和定量。2、筛选出高亲和力的肝脏特异性F蛋白多抗。3、对多抗进行纯化和鉴定。第三年：1、利用多抗进行免疫组化等方面的应用研究。2、总结研究成果，撰写相关论文。六、经费预算1、材料费：10000元。2、设备费：50000元。3、人员费用：300000元。4、差旅费：40000元。总计：400000元。七、参考文献1、Hernández-MuñozR.,RodrigoL..Autoimmunehepatitis:Moleculargeneticsopensnewhorizons.WorldJGastroenterol2011;17(40).2、Teng,H.etal..Identificationandexpressionofaligand-dependentcoactivatorforestrogenreceptorsbeta1andbeta2inhumanbreastcancercells.JEndocrinol2004;183:263–274.3、小林雪子,谷口裕行,两种源自哺乳动物的氧化还原酶形态及其基因的分子进化研究[J].暖带生物学报,2007(1):18-23.4、张洋.脂蛋白(a)快速检测方法及其在临床中的应用研究[D].浙江大学,2015.5、张帆.肝静脉丛高清切术治疗门系统高压症相关腹腔胃肠道下端出血的研究[D].哈尔滨医科大学,2014.6、El-Sherif,A.M.et