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文档简介
免疫浊度测定及其临床应用1免疫测定分类免疫浊度测定
g~
ng标记免疫测定ng~
pg免疫浊度测定免疫沉淀反应海德堡曲线Heidelberg’s
Curve抗原浓度测定范围抗体过剩抗原过剩Ag
*Ab免疫浊度测定分类透射浊度法散射浊度法透射浊度法和散射浊度法的光路检测器A(透射浊度法)检测器B(散射浊度法)θI0I浑浊样品光源散射浊度法AnalyteAntibodyOther
stuffAnalyte-antibody
complexingNow
big
enough
to
scatter
lightToo
small
to
detect
opticallyWhat
happens
inside
the
flowcell?31ScatterScatter
Signal
Versus
TimeNephelometry1.
Buffer
additionTime2.
Sample
Addition3.
Antibody
additionFluid
in
the
cell
has
causes
little
scatter2Adding
sample
increases
scatter
slightlyAdding
antibody
causes
a
largeincrease
in
light
scattering免疫浊度测定分类2终点法速率法终
点
法固定时间法速率散射浊度法速率峰的测定速率峰的测定ScatterMeasure
the
RATE
After
Antibody
AdditionRate
Nephelometry321Time1.
Buffer
addition 2.
Sample
Addition 3.
Antibody
additionFirst
derivative:
rate
of
change
of
scatter
over
time;this
is
the
SLOPE
of
thecurveRatePEAKRATETIMERATERate
of
Change
of
Scatter
Signal
versus
TimeCONCENTRATIONRATE在速率峰基础上完成的标准曲线抗原过剩的测定Analyte-antibody
complexingAnalyteAntibodyAntigen
ExcessRATEofSCATTER抗体过量时的反应抗原过量时的反应60085反应时间(秒)ARRAY抗原过量自动检测加入校正液药物浓度测定免疫浊度抑制测定(小分子物质)12Conjugate-antibody
complexing213Inhibition
of
complexing
by
hapten
(drug)Conjugate
(hapten
on
carrier)AntibodyHapten
(drug)免疫浊度测定试剂抗体试剂的要求1特异性2亲和力3反应时保持抗体过剩455测定范围应包括高于及低于正常值的50%测定的精密度应在5%左右校正曲线:聚乙二醇的增强作用抗原浓度C1C2C3吸光度4%聚乙二醇不加聚乙二醇试剂组成配方举例~
8.2试剂1100mmol Tris或磷酸缓冲液
pH7.24% 聚乙二醇(分子量6000或10000)1%非离子型表面活性剂150mmol氯化钠或硫酸钠0.1
g/l
叠氮钠~
8.2试剂2100mmol Tris或磷酸缓冲液
pH7.220% 多克隆羊抗血清150mmol氯化钠0.1
g/l
叠氮钠抗原浓度测定范围抗体过剩抗原过剩Ag
*Ab技术特性并行的检测系统:Rate
NIPIARate
NephelometryNIPIA:近红外颗粒速率法免疫分析BenefitsAbility
to
expand
the
menuinto
high
sensitivity
assaysincluding:
Ferritin,
Digoxin,
and
IgE.NIR
eliminates
the
interferenceof
biological
substancessuch
as
biliribin
andhemoglobin.NIPIA:近红外颗粒速率法免疫分析优点扩展检测菜单,增加高敏项目分析:
如铁蛋白,地高辛 ,IgE,超敏CRP等近红外波长分析消除生物物质如胆红素和血色素的干扰NIR:940nm波长近0oC检测角检测颗粒大小:200~500nm直径速率法测定NIPIA:940nmLED光源速率散射法:670nm激光光源蛋白应用分类心血管功能监测载脂蛋白A1载脂蛋白B脂蛋白a11、最灵繁的人也看不见自己的背脊。、最灵繁的人也看不见自己
的背脊。————非洲非洲22、最困难的事情就是认识自己。、最困难的事情就是认识自己。————希腊希腊33、有勇气承担命运这才是英雄好汉。、有勇气承担命运这才是英
雄好汉。————黑塞黑塞44、与肝胆人共事,无字句处读书。、与肝胆人共事,无字句处读
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