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文档简介

生殖系统

—前列腺炎动物模型的建立1.建模意义:我国超过三分之一的男性都被前列腺炎纠缠,前列腺健康问题十分突出。而由于目前列腺炎治疗方式落后、治愈率低、复发率高,造成很多患者都因为治疗不当恶化成了前列腺癌、尿毒症等恶性疾病。通过在实验动物上建立病理学模型,借此研究前列腺疾病的发生开展,为获得更好的治疗手段和预防方法,如今已受到越来越多的重视2.定义:前列腺炎(Prostatitis)指发生于前列腺组织的炎症。是指前列腺特异性和非特异感染所致的急慢性炎症,从而引起的全身或局部病症。由于前列腺在一定水平血睾丸酮作用下形成,女性仅找到组织胚胎学意义上的前列腺痕迹;没有人体解剖学意义上的前列腺,前列腺炎属于男性疾病。

3.建模依据:细菌性前列腺炎模型:主要用大肠杆菌注入大小鼠前列腺器官中制得。非细菌性前列腺炎模型:主要用化学制剂或生物制剂诱导而成。前列腺炎动物模型4.细菌性前列腺炎模型:建模方法目的原理本卷须知细菌性前列腺炎模型材料5.目的复制前列腺炎动物模型的细菌性前列腺炎模型原理通过手术途径将大肠杆菌注入大鼠前列腺器官中,使大鼠前列腺发炎材料250-300g大鼠标准大肠埃希菌液外科手术器材6.取体重250-300g大鼠,腹腔麻醉,腹部去毛消毒后,沿腹壁中线切开皮肤和肌肉,打开腹腔,暴露附于膀胱颈外侧的前列腺从前列腺背叶进针,注入O.05ml大肠杆菌,碘伏棉球轻轻按压针眼后缝合腹壁肌肉和皮肤,放回鼠笼,自由饮食在造模后第1、3、5和7d解剖大鼠,观察大鼠前列腺大小、硬度和色泽、是否有粘连.并做病理切片,显微镜下观察组织细胞的改变造模方法:7.大鼠前列腺左右两侧都可见肿大,约增加1/2,体积。左侧前列腺可见少许深褐色斑点,右侧除肿大外其他外观没有明显改变前列腺左侧(即注射侧)肿大约为正常的3倍,右侧肿大略小。左侧颜色为灰黄色,质地较硬。右侧前列腺质地稍软,没有光泽,失去红润前列腺左侧肿大约为正常的2倍,质地较硬,腺体颜色为灰黄色。右侧腺体稍微肿大,质地较软,没有光泽,组织表面显苍白两侧前列腺明显萎缩,左侧腺体明显可见包裹的被膜,质地略硬,颜色为灰黄色,右侧腺体质地较软,没有光泽,组织表面显苍白肉眼观察结果:造模1d造模3d造模5d造模7dwps/moban8.切片HE染色结果:造模第一天:可见腺腔和间质有些水肿,腺腔形态有些不规那么,间质有炎症细胞浸润;造模三天:腺腔、间质水肿,腔内和间质都有大量炎症细胞浸润;造模五天:腔内和间质炎症细胞浸润增多,有脓肿形成,腺腔上皮细胞明显压扁,少数被破坏;造模七天,腔内和间质弥漫着炎症细胞,多数需腺腔形成脓肿,局部腺腔上皮细胞被破坏,仅剩腺腔的轮廓wps/moban9.细菌性大鼠前列腺炎模型组织HE染色结果组别腺腔形态改变腔内炎细胞浸润间质炎细胞浸润间质水肿腺腔水肿肉芽组织正常------造模1d++-++++++-造模3d++++++++++++++++造模5d++++++++++++++++造模7d+++++++++++++++10.TextTet正常大鼠前列腺组织HE染色×100大肠杆菌造模7d大鼠前列腺组织HE染色×10011.本卷须知:必须严格无菌手术操作,防止手术继发感染,影响模型建立。模型大鼠体重至少200g以上,以免因动物本身的前列腺过小及前列腺包膜薄嫩影响模型操作一二12.非细菌性前列腺炎模型自发性自身免疫性年龄相关遗传倾向wps/moban13.目的复制前列腺炎动物模型的非细菌性前列腺炎模型。原理前列腺炎的发生与自体免疫有关的学说材料SD雄性大鼠雄性C57BL/6小鼠完全弗氏佐剂和百白破疫苗非细菌性前列腺炎模型:14.抗原制备:取240—260g的SD雄性大鼠,无菌获得前列腺组织,清洗,匀浆,取上清液,蛋白定量;免疫佐剂:完全弗氏佐剂和百白破疫苗;成年雄性C57BL/6小鼠经腹腔注射完全福式佐剂〔CFA〕0.5ml,第二日皮下注视0.5ml纯化的SD大鼠前列腺抗原蛋白〔剂量为1.0g/L〕,同时腹腔注射百白破疫苗0.1ml。第8周时,模型动物可出现前列腺慢性炎症病症。造模方法:wps/moban15.剥离SD大鼠前列腺时尽可能把周围组织剔除干净以利于抗原制备的纯化.1注射应多点皮下注射,以减少局部刺激,加快药液吸收,防止因局部刺激过大而造成局部组织坏死形成溃疡等不良后果2本卷须知:16.实验结果判定1.剖检:前列腺呈饱满、增大、质软。病程长者,前列腺缩小、变硬、不均匀,有小硬结。同时应用前列腺按摩获取前列腺液送检验。2.前列腺液检查:前列腺液白细胞>10个/高倍视野,卵磷脂小体减少,可诊断为前列腺炎。分段尿及前列腺液培养检查:检查前充分饮水,取初尿10ml(VB1),再排尿200ml后取中段尿10ml(VB2)。此后,作前列腺按摩,收集前列腺液(EPS)

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