芳酸及其酯类药物的分析课件

芳酸及其酯类药物的分析

典型药物鉴别试验含量测定

返回主目录杂质检查基本要求基本要求

一、掌握水扬酸类、苯甲酸类药物的鉴别和含量测定的基本原理与方法。二、熟悉其他方酸类药物鉴别和含量测定的基本原理与方法。。三、了解本类药物的体内分析方法。返回

一、水扬酸类

（一）典型药物结构第一节典型药物分类与理化性质水杨酸（salycylicacid）阿司匹林（aspirin)

对氨基水杨酸钠（sodiumaminosalicylate)双水杨酯（salsalate)贝诺酯（benorilate)

1.酸性

SA(PKa2.95)、ASA(PKa3.49)、双水杨酯均有酸性。

2.溶解性:

均为固体，有一定溶点。除钠盐溶于水，其余不溶。

3.UV和IR光谱特性：分子结构中具有苯环,有UV和IR特征吸收。

4.芳伯氨基和酚羟基特性：5.水解特性：ASA、双水杨酯及其制剂应检查水杨酸,对氨基水杨酸钠和贝诺酯检查间氨基酚和对氨基酚。（二）主要理化性质

（一）典型药物结构苯甲酸及其钠盐(benzoicacid）二、苯甲酸类羟苯乙酯(ethylparoben)丙磺舒(probenecid)甲芬那酸(mefenamicacid)（二）主要理化性质

1.溶解性:

均为固体，有一定溶点。除钠盐溶于水，其余不溶。

2.UV和IR光谱特性：分子结构中具有苯环,有UV和IR特征吸收。

3.具有酚羟基特性：

4.分解反应特性：苯甲酸钠分解为苯甲酸；丙磺舒分解为SO2

5.酸性：苯甲酸、丙磺舒和甲芬那酸有游离的羧基，可用NaOH直接滴定测定其含量。三、其他芳酸类

(一)典型药物结构氯贝丁酯（clofibrate）布洛芬（ibuprofen）

(二)主要理化性质

1.溶解性：水中不溶，有机溶剂溶解，氯贝丁酯为液体；布洛芬为固体，有一定熔点。

2.UV和IR特征吸收光谱：基于分子结构中具有苯环和特征基团。返回

一、与三氯化铁反应

含有酚羟基药物可与FeCl3反应；能与FeCl3反应不一定含酚羟基.第二节鉴别试验Ar-OH+FeCl3紫堇色铁配位化合物pH4~61.直接反应

SA在中性或弱酸性条件下，与FeCl3生成紫堇色配位化合物赭色苯甲酸（中性或碱性水溶液）+FeCl3

丙磺舒与NaOH成钠盐后，在pH5.0~6.0中与FeCl3生成米黄色布洛芬与高氯酸羟胺，N，N’-双环基己羧二亚胺及高氯酸铁反应，即显紫色[JP（14）方法]。基于分子中-COOH的结构。2.水解或分解后与三氯化铁反应ASA水解成SA后与FeCl3

反应，成紫堇色二、重氮化-偶合反应

凡是分子结构中含有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物均可反应。

1.直接反应

对氨基水杨酸钠

2.水解后反应

贝诺酯具有潜在芳伯氨基

3.甲芬那酸与对-硝基苯重氮盐在NaOH介质中偶合产生橙红色。

+K2Cr2O7

深蓝色

棕绿色甲芬那酸+H2SO4

黄色

绿色荧光[JP(14)△三、氧化反应

1.ASA酸水解生成SA和CH3COOH：SA的mp为156℃～161℃。

2.双水杨酯水解生成SA：SA的mp为158℃。

3.氯贝丁酯碱水解后与盐酸羟胺生成异羟肟酸盐，在弱酸条件下再与三氯化铁反应生成紫色的异羟肟酸铁。四、水解反应

1.苯甲酸盐加热分解生成苯甲酸升华物，可用于鉴别。

2.丙磺舒与NaOH熔融分解成Na2SO3,经硝酸氧化成Na2SO4。

3.丙磺舒加热分解，生成SO2气体，有臭味五、分解产物反应

1.测定λmax；λmin。

例如：布洛芬用0.4%NaOH溶液制备0.25mg/ml；λmax；265nm,273nm;λmin。245nm,271nm。

2.在λmax处测定一定浓度供试液的吸收度A。

例如：羟苯乙酯，5μg/mlλmax=295nm;A=0.48

3.在λmax处测定供试液的百分吸收系数。

例如：贝诺酯在λmax=240nm;E1%1cm=730~760

六、紫外吸收光谱法

4.在规定的波长测定吸收度比值（即双波长吸收度比值法）

例如：对氨基水杨酸钠10μg/ml;A265/A299=1.56~1.56

再例如：甲芬那酸14μg/ml;A278~280/A348~352=1.15~1.30

七、红外吸收光谱法水杨酸的红外吸收图谱3700~2900cm-1

N-H、

O-H1660cm-1

C=O1610,15701480,1440

C=C775cm-1

Ar-H返回3700~2900cm-1

N-H、

O-H1640cm-1

N-H1580cm-11500cm-1

C=C1300cm-1

C-N1188cm-1

C-O对氨基水杨酸钠的红外吸收图谱第三节特殊杂质检查一、ASA中特殊杂质的检查

1.溶液的澄清度

主要检查Na2CO3中不溶物，有苯酚；醋酸苯酯；水杨酸苯酯；乙酰水杨酸苯酯。ASA溶解因此ASA溶液应澄清。

2.游离水杨酸检查

利用SA可与FeCl3呈色，用比色法检查。

3.易炭化物检查

主要检查ASA中能被硫酸炭化显色的低分子有机杂质。采用与标准比色液比色的方法检查。

主要检查成品药物中可能残留的间氨基酚。间氨基酚易氧化呈色，而且有毒性，因此要严格控制。

双向滴定法：利用间氨基酚溶于乙醚，取3.0g样品用乙醚提取0.02mol/LHCl测定方法滴定V＜0.3ml。

HPLC法：采用内标法，以磺胺作内标（USP）

二、对氨基水杨酸钠中特殊杂质的检查三、羟苯乙酯中有关物质的检查BP收载的方法，由于杂质的结构不清，故采用TLC法中的供试品自身对照法：固定相：GF254C18化学键合硅胶展开剂：甲醇-水-冰醋酸反相TLC法

甲芬那酸是以邻-氯苯甲酸和2，3-二甲基苯胺在Cu的催化下缩合而成，因此成品药物中要检查铜盐及有关物质。分光光度法：利用Cu2+与Na-DDC呈色后测定A

1.铜盐检查法

原子吸收分光光度法：BP（2000）

2.有关物质的检查主要检查的是酰胺、二甲基苯胺和邻氯苯甲酸各国药典均采用TLC法中的自身高低浓度对照法。四、甲芬那酸中特殊杂质的检查五、氯贝丁酯中特殊杂质的检查

主要检查成品药物中残留的对氯酚原料和挥发性杂质GC-FID法HPLC法：以对-羟乙基酚作内标，用正相HPLC2.挥发性杂质的检查方法

GC法1.对氯酚检查返回

一、酸碱滴定法（一）直接滴定法

基于本类药物-COOH；可用碱直接滴定，如ASA的含量测定，其原理如下：第四节

含量测定1.原理：2.条件：在中性乙醇中，以酚酞作指示剂；摩尔比为1:1。3.应用：多国药典用于双水杨酯、苯甲酸、丙磺舒、布洛芬测定；USP和BP还用于甲芬那酸的测定。（二）水解后剩余滴定法

1.ASA含量测定原理：条件：水溶液

具体试验：I份NaOHI份NaOHVVOVo-V相当于ASA消耗

硫酸的ml数ASA%=(Vo–V)×F×T/W×100%2.羟苯乙酯的含量测定（三）两步滴定法

1.ASA片的含量测定第一步为中和ASA+NaOHASA-Na+H2O水解产物SA+NaOHSA-Na+H2O酸性稳定剂+NaOH中性盐第二步为水解与测定

2.氯贝丁酯含量测定

第一步：中和酸性杂质

第二步：水解与测定

二、亚硝酸钠滴定法

对氨基水杨酸钠有芳伯氨基,在HCl中与NaNO2发生重氮化反应Ar-NH2+NaNO2+2HClAr-N2Cl+NaCl+2H2O

因此可用亚硝酸钠滴定法测定其含量，此法在下章重点讨论。三、双相滴定法

是指在水相和有机相中的滴定。如苯甲酸钠的含量测定：

生成的苯甲酸不溶于水，终点pH突跃不明显，不易观察。苯甲酸在乙醚中易溶，在水相中加入乙醚将滴定中产生的苯甲酸萃取入醚层。因此用双相滴定可使反应完全终点明显。（一）直接紫外分光光度法

丙磺舒片的测定：Ch.P(2000)在HCl中，采用百分吸收系数法。

BP(1998)再盐酸-乙醇,采用百分吸收系数法.

USP(24)用氯仿提取后，采用对照品比较法。四、紫外分光光度法（二）离子交换-紫外分光光度法

氯贝丁酯及其制剂Ch.P(2000)采用酸碱滴定法；当含有酸性杂质对氯酚时，可采用强碱性阴离子交换树脂吸附酸性杂质后，在甲醇溶液中，226nm波长处，采用对照品比较法。

具体计算：W×1000×1/100×1/100=Cu(μg/ml)Au/As=Cu/CCu=C(Au/As)W(mg)=10×Cu=10×C(Au/As)（三）柱分配色谱-紫外分光光度法

USP(24)采用此法同时测定ASA胶囊中ASA和SA。

1.SA的限量测定

色谱柱的制备；对照品溶液的制备；供试品溶液的制备。供试品液：CHCl3液洗脱液1：CHCl3洗脱液2：HAC-

乙醚硅藻土，FeCl3-尿素玻璃棉硅藻土，Na2CO3供试品液：CHCl3-HCl液洗脱液1：HAC-CHCl3

(1:10)10ml洗脱液2：HAC-CHCl3(1:100)85ml

1-杂质先洗脱2-SA后洗脱

max=306nmAu＜As1-杂质先洗脱2-ASA后洗脱

max=280nmASA(mg)=C(Au/As)

2.ASA的含量测定色谱柱的制备；对照品溶液