温氏附红细胞体体外培养、药物筛选及疾病治疗的试验研究的开题报告_第1页
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温氏附红细胞体体外培养、药物筛选及疾病治疗的试验研究的开题报告一、研究背景及意义：目前红细胞体外培养技术已经非常成熟，可以通过体外培养方式大量生产红细胞。但红细胞的病毒污染、过敏反应、传染病等问题仍然是瓶颈。因此，低血红蛋白疾病等血液疾病的治疗有望借助红细胞的体外培养方式得到更好的解决。温氏集团拥有完整的生物和化学研发体系，能够进行红细胞的体外培养研究和药物筛选。本研究旨在通过温氏附红细胞体体外培养、药物筛选及疾病治疗的试验研究，探索红细胞体外培养制备的可行性和可能的关键环节，为红细胞治疗血液疾病提供新思路和新方法。二、研究内容及方法：（一）研究内容：1.1体外培养方法的优化及红细胞生长因子的筛选。1.2利用药物筛选法筛选合适的红细胞维持剂和生长因子。1.3不同培养条件下红细胞质量和红细胞存储的稳定性研究。1.4体外培养红细胞的生化特性分析。1.5通过动物试验研究红细胞在体内的生物学特性。（二）研究方法：2.1体外培养:（1）获得红细胞骨髓。（2）用含50µMβ-mercaptoethanol、1×insulin-transferrin-selenium-A（ITS-A）和0.5U/mLheparin的克罗兹细胞培养基（KBM）培养红细胞。（3）筛选最佳培养条件，包括适宜的初始细胞数、培养时间和生长因子等。（4）监测红细胞培养过程中生长和分化的特征，包括形态、细胞密度和分化程度。2.2药物筛选：（1）采用高通量筛选法，筛选红细胞生长因子。（2）采用流式细胞术，评估药物对红细胞生长和分化的影响。2.3红细胞质量及稳定性研究：（1）评估体外培养红细胞的质量和稳定性，包括内源性多孔性丝突变体的含量、酸素亲和力和红细胞的稳定性等。（2）研究红细胞的冷冻保存方式。2.4生化特性分析：（1）利用流式细胞术和蛋白质组学研究红细胞在不同生长条件下的变化。（2）分析红细胞血红蛋白、葡萄糖转运蛋白、氨基酸转运蛋白等基因的表达。2.5动物试验：（1）在小鼠体内注射体外培养的红细胞，观察红细胞的存储、分布和生物学特征。（2）评估红细胞的毒性和免疫原性。三、研究预期结果及价值：3.1通过优化体外培养方法和筛选红细胞生长因子，获得高质量、稳定的体外培养红细胞。3.2建立体外培养红细胞的生化特性和质量评估体系。3.3探

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