医疗机构新冠核酸检测工作手册

医疗机构新冠核酸检测工作手册医疗机构新冠核酸检测工作手册全文共22页，当前为第1页。新冠病毒核酸检测策略灵敏、特异的检测新冠病毒核酸需要注意以下因素：1、取样问题：取样是影响检出率最重要的因素；2、轻症患者：强烈推荐鼻咽拭子，而不是口咽拭子；其次是取样时机3、重症患者：强烈推荐使用深部痰液、肺泡灌洗液；4、现行试剂问题：强烈建议使用两个基因片段以上的试剂盒，可以捕获更多的患者；实验室应常备两种以上不同厂家的核酸检测试剂；试剂盒必须高灵敏（检测限≤500拷贝/ml)的试剂。5、参考品问题：参考品用于生产厂商建方法时验证试剂盒性能，不用于临床实验室；6、实验室操作：经过实验室验收合格的PCR实验室完整的性能验证、每天每批检测至少有1份弱阳性质控品（第三方质控品，通常为检出限的1.5-3倍)、3份阴性质控品（生理盐水)、室间质评。医疗机构新冠核酸检测工作手册全文共22页，当前为第2页。新冠核酸样本采集

A、样本采集准备

B、采集样本类型

C、采集样本容器

D、鼻咽拭子采集方法

E、口咽拭子采集方法新冠核酸样本保存与转运要求新冠核酸样本转运人员个人防护要求新冠病毒核酸检测的注意事项院感防控要求新冠相关医疗废物的处置内容医疗机构新冠核酸检测工作手册全文共22页，当前为第3页。A新冠核酸样本采集准备个人防护用品采样人员从事核酸检测标本采集的技术人员应当经过生物安全培训（培训合格）熟悉标本种类和采集方法掌握标本采集操作流程及注意事项（记录，确保标本质量符合要求、信息追溯）采样工具（新冠核酸保存管、拭子（鼻咽拭子、口咽拭子）、压舌板）采集场所（具有有效的防止病原微生物扩散和感染的措施）填写记录采样人员防护装备要求：N95及以上防护口罩、护目镜或防护面屏、防护服、乳胶手套、防水靴套；如果接触患者血液、体液、分泌物或排泄物，戴双层乳胶手套；手套被污染时，及时更换外层乳胶手套。每采一个人应当进行严格手消毒或更换手套注意事项：严格按生物安全规范操作医疗机构新冠核酸检测工作手册全文共22页，当前为第4页。B新冠核酸检测常用的临床样本类型注意：血液标本核酸检测阳性率低，一般不采用；血清标本主要是用于（新冠抗体检测），发病7天内急性期血清以及发病后第3～4周的恢复期血清。上呼吸道标本：口咽拭子、鼻咽拭子（优先）下呼吸道标本：痰、气管吸出物和支气管肺泡灌洗液注意：临床标本应尽量采集病例发病早期的呼吸道标本（尤其是下呼吸道标本）

人群筛查及集中隔离人员的标本选择：鼻咽拭子→口咽拭子已知感染住院患者的标本选择：痰→鼻咽拭子→口咽拭子或唾液→粪便粪便（肛拭子）：以消化道症状为主的患者医疗机构新冠核酸检测工作手册全文共22页，当前为第5页。D鼻咽拭子的采集方法鼻咽拭子：采样人员一手轻扶被采集人员的头部，一手执拭子，拭子贴鼻孔进入，沿下鼻道的底部向后缓缓深入，由于鼻道呈弧形，不可用力过猛，以免发生外伤出血。（鼻咽拭子进入鼻腔深度约为鼻尖到耳垂的距离。）待拭子顶端到达鼻咽腔后壁时，轻轻捻转拭子一周（如遇反射性咳嗽，应停留片刻）并保留10-15秒，然后缓缓取出拭子。将拭子头浸入含2～5ml病毒保存液的管中，尾部弃去，旋紧管盖。关键点：“要深、要转、要取细胞”深度：4CM停留：10-15S旋转：一周医疗机构新冠核酸检测工作手册全文共22页，当前为第6页。E口咽拭子的采集方法口咽拭子：用1根配套的口咽拭子同时擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，将拭子头浸入含5ml病毒保存液的管中，弃去尾部，旋紧管盖。取样关键点：用拭子擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁3~5次为提高检出阳性率，可同时采用鼻咽拭子和口咽拭子采样，采样后放入同一管细胞保存液或病毒保存液中；必要时也可采集痰液标本，痰液标本应该取患者深咳的痰液医疗机构新冠核酸检测工作手册全文共22页，当前为第7页。新冠核酸样本保存与转运要求含胍盐保存液采样管采集的标本可根据采样管说明书要求的保存条件及时间要求进行运送和保存。24小时内无法检测的标本则应置于-70℃或以下保存(如无-70℃保存条件，则于-20℃冰箱暂存)。境外高风险区域人群以及新冠肺炎患者的密接者和密接者的密接者等集中隔离人员的核酸检测标本，检测后，应当在-20℃保存7天。其他一般人群筛查标本，则可在-4℃保存24小时。医疗机构新冠核酸检测工作手册全文共22页，当前为第8页。新冠核酸样本保存与转运要求样本转运：

1、样本包装按照B类感染性物质进行三层包装。

样本放在采集管里，拧紧。容器外贴好条码并注明标本编号。将密闭后的标本放入大小合适的带有生物安全警示标识的专用标本自封袋内密封，每袋装一份标本；使用75%酒精或0.2%含氯消毒剂喷洒消毒标本包装袋；将包装好的标本放入专用转运箱；将密闭后的标本放入转移试管架中竖立放置。注意勿使标本污染容器外部或倾翻、渗漏以免造成人员感染，以确保生物安全。转运箱封闭后，须用75%酒精或0.2%含氯消毒剂喷洒消毒转运箱表面。由经过生物安全培训的专人进行样本的运送和交接。医疗机构新冠核酸检测工作手册全文共22页，当前为第9页。新冠核酸样本保存与转运要求2、标本送检：标本采集后室温放置不超过4小时，应在2-4h内送到实验室。如果需要长途运输标本，应采用干冰等制冷方式进行保存，严格按照相关规定包装运输；标本运输途中应有缓冲设备避免剧烈振摇，应有保温设备避免高温、严寒等恶劣环境，保证标本质量。标本运送期间避免反复冻融。3、标本接收：标本接收人员的个人防护按采样人员防护装备执行。标本运送人员和接收人员对标本进行双签收；

转运箱要在生物安全柜内开启，开启后，使用0.2%含氯消毒剂或75%酒精对转运桶内壁和标本采集密封袋进行喷洒消毒。取出标本采集管后，应首先检查标本管外壁是否有破损、管口是否泄漏或是否有管壁残留物。确认无渗漏后，推荐用0.2%含氯消毒剂喷洒、擦拭消毒样品管外表面（此处不建议使用75%酒精，以免破坏标本标识）。如发现渗漏应立即用吸水纸覆盖，并喷洒有效氯含量为0.55%的含氯消毒剂进行消毒处理，不得对标本继续检测操作，做好标本不合格记录后需立即进行密封打包，压力蒸汽灭菌处理后销毁。

转运箱封闭后，使用0.2%含氯消毒剂或75%酒精喷洒消毒表面，由转运人员带走。医疗机构新冠核酸检测工作手册全文共22页，当前为第10页。新冠核酸样本转运人员个人防护要求样本转运人员防护装备要求（一级生物安全防护）：工作服或者隔离衣、一次性医用防护口罩、一次性帽子、乳胶手套、鞋套；医疗机构新冠核酸检测工作手册全文共22页，当前为第11页。新冠病毒核酸检测的注意事项

对集中隔离人员，要通过鼻咽拭子采集上呼吸道标本，并选择高灵敏（检测限≤500拷贝/ml）的试剂。原则上，提取试剂、提取仪、扩增试剂和扩增仪应当配套使用，并在检测前进行性能验证。鼓励在两个以上检测机构通过不同设备和试剂，对集中隔离人员的样本进行平行检测，进一步提高检测结果的准确性。其中，入境人员应当至少在开始集中隔离和解除隔离时各进行一次核酸检测，隔离期间如出现症状应当及时检测；入境人员要采用高灵敏（检测限≤500拷贝/ml）和双靶区域以上的试剂进行检测，以降低因试剂灵敏度不足或病毒变异可能造成的漏检风险。检测结果的处理：1.混采检测结果为阳性、灰区或单个靶标阳性，通知相关部门对该混采管的10个或5个受试者暂时单独隔离，并重新采集单管拭子进行复核；2.复核单管核酸检测如均为阴性，则按照阴性结果报告。暂时隔离人员即解除隔离；如检测结果阳性，按程序上报。医疗机构新冠核酸检测工作手册全文共22页，当前为第12页。院感防控要求1、做好日常的医疗机构感染防控工作，把标准预防理念贯穿到日常各项工作，做好消毒、隔离、预防职业暴露、医疗废物管理等工作，降低医院感染发生风险。2、加强感控专兼职人员配备，加大感控经费投入，落实各级感控管理组织责任。3、严格开展全员岗前感染防控培训工作，未经培训合格不得上岗。按照相关技术标准和规范，重点部门建筑布局和工作流程符合要求，并配备必要的设备设施。医疗机构新冠核酸检测工作手册全文共22页，当前为第13页。院感防控要求目标要求：提高新冠肺炎诊疗防控能力，预防和控制新冠病毒在医疗机构内传播，有效防范医源性感染发生，杜绝感染暴发事件，实现院内零感染目标。工作原则：1、建立“两个屏障”：物理屏障和行为屏障

2、实现“双向防护”：医务人员防护和患者防护

3、落实“三防融合”：人防：规范行为，强化管控技防：提升技能，优化流程物防：适宜可及、守正创新医疗机构新冠核酸检测工作手册全文共22页，当前为第14页。环境的清洁消毒《消毒剂使用指南》做好个人手卫生隔离病区、病人住所进行随时消毒和终末消毒高频接触的门把手、电梯按钮等加强清洁消毒医院、机场、车站等人员密集场所的环境物体表面增加消毒频次垃圾、粪便和污水进行收集和无害化处理医疗机构新冠核酸检测工作手册全文共22页，当前为第15页。环境的清洁消毒《消毒剂使用指南》1、不宜对室外环境开展大规模的消毒2、不宜对外环境进行空气消毒3、不宜直接使用消毒剂（粉）对人员进行消毒4、不宜对水塘、水库、人工湖等环境中投加消毒剂（粉）进行消毒5、不得在有人条件下对空气（空间）使用化学消毒剂消毒6、不宜用戊二醛对环境进行擦拭和喷雾消毒7、不宜使用高浓度的含氯消毒剂（有效氯浓度大于1000mg/L）做预防性消毒。医疗机构新冠核酸检测工作手册全文共22页，当前为第16页。新冠相关医疗废物的处置

所有的危险性医疗废物必须按照统一规格化的容器和标示方式，完整且合规地标示废物内容。应当由经过适当培训的人员使用适当的个人防护装备和设备处理危险性医疗废物。固体废物的处理小型固体废物如检测耗材、个人防护装备等按照潜在感染性废物使用双层防渗漏专用包装袋打包密封后，由经过适当培训的人员使用适当的个人防护装备（二级生物安全防护）转运到指定的医疗废物暂存地点，集中进行灭菌处理。运送过程防止医疗废物直接接触身体，避免医疗废物泄漏和扩散。每天运送结束后，对运送工具用1000mg/L的含氯消毒液进行清洁和消毒；如果被感染性医疗废物污染时，应当及时消毒处理；医疗废物暂存地点应当有严密的封闭管理措施，设有工作人员进行管理，防止非工作人员接触医疗废物。用1000mg/L的含氯消毒液对医疗废物暂存地点地面进行消毒，每天两次。医疗机构新冠核酸检测工作手册全文共22页，当前为第17页。新冠相关医疗废物的处置1、加强医疗废物的分类收集医疗垃圾和生活垃圾规范包装容器3/4鹅颈结式封口；2、分类收集使用后的一次性手术衣、防护服等物品时，严禁挤压。

3、分区域进行处理收治新冠肺炎患者或者疑似患者的医疗废物，在离开污染区前应当对包装袋表面用1000mg/L的含氯消毒液喷洒消毒或者在其外面加套一层医疗废物包装袋；清洁区产生的医疗废物按照常规医疗废物处理。4、做好病原标本处理医疗废物中含病原体的标本和相关保存液等高危险废物，应当在产生地点进行压力蒸汽灭菌或者化学消毒处理，然后按照感染性医疗废物收集处理。5、严格执行医疗废物产生部门、运送人员、暂存处工作人员以及医疗废物处置单位运送人员逐层转运交接登记制度。

医疗机构新冠核酸检测工作手册全文共22页，当前为第18页。核酸结果判读和解释结果判断应按照说明书1.阴阳性质控在控2.内标正常：内标一般为人工合成的假病毒，用于监控核酸提取过程和反应体系可能存在的抑制因素，提示假阴性结果3.根据CT值判读结果4.结果解释依据说明书，应排除实验室污染、标本采集保存不当等导致的假阳、假阴性结果。医疗机构新冠核酸检测工作手册全文共22页，当前为第19页。核酸报告判读和解释（一）二个基因片段结果报告判读与解释ORF1ab和N基因二个同时阳性时，判定为阳性若仅ORF1ab或N基因其中之一检测结果阳性时，需重新采样复查，复查后ORF1ab或N基因仍为阳性时，判定为阳性若ORF1ab或N基因检测结果处于灰