药剂学课件：第二十二章 生物技术药物制剂

2023/12/3生物技术药物1第二十二章生物技术药物制剂2023/12/3生物技术药物2一、概述

基本概念、研究概况、生物技术药物的结构特点与性质、蛋白质类药物评价方法二、处方与工艺

一般处方组成、稳定化（液体和固体）三、蛋白质类药物新型给药系统

注射给药：控释微球、脉冲式给药系统非注射给药：鼻腔、口服、直肠、口腔粘膜、经皮四、评价方法

含量测定、活性测定、体外释药速率、稳定性、体内药动学、刺激性与生物相容性二十二章生物技术药物制剂内容提要2023/12/3生物技术药物3第一节概述一、生物技术的基本概念生物技术或称生物工程(bio-engineering)／是应用生物体（包括微生物、动物细胞、植物细胞）或其它组成部分（细胞器和酶），在最适条件下，生产有价值的产物或进行有益过程的技术。现代生物技术主要包括基因工程(geneengineering)、细胞工程、酶工程、发酵(fermentation)工程等。核酸包括DNA和RNA／基因（gene）就是DNA或RNA，因此基因是生物遗传信息的携带者。(中心法则：DNA-转录－RNA－翻译－蛋白质)2023/12/3生物技术药物4DNA重组技术（DNArecombinationtechnique）/就是在体外利用各种酶将遗传物质进行新的排列，必须包括两种以上不同来源的DNA片段。基因工程又称遗传工程／它是经体外非同源DNA重组使基因转移到宿主细胞中，在此表达获得活性物质。细胞工程／主要包括细胞培养和细胞杂交技术，是生产单克隆抗体一类试剂或药物的方法酶工程／是利用固相酶（或固相细胞），将底物转化为所需的产品。发酵工程(fermentationengineering)又称微生物工程/是利用微生物的作用并通过近代工程技术来实现有用物质向工业化生产或用于其他产业过程的科学技术体系。2023/12/3生物技术药物5中心法则过程示意图2023/12/3生物技术药物6基因工程过程示意图2023/12/3生物技术药物7细胞杂交技术过程示意图2023/12/3生物技术药物8发酵工程生产流程与发酵罐结构示意图2023/12/3生物技术药物9基因工程微生物工程菌发酵工程动植物细胞酶工程细胞融合原料产品基因工程、细胞工程、酶工程与发酵工程之间关系示意图2023/12/3生物技术药物102023/12/3生物技术药物112023/12/3生物技术药物122023/12/3生物技术药物132023/12/3生物技术药物142023/12/3生物技术药物152023/12/3生物技术药物162023/12/3生物技术药物172023/12/3生物技术药物182023/12/3生物技术药物192023/12/3生物技术药物20目前生物技术药物研究领域分布示意图2023/12/3生物技术药物212023/12/3生物技术药物22我国制药业市场行情预测2023/12/3生物技术药物23当今科技领域最具潜力的三大技术生物技术人类基因组计划、后基因组计划、生物工程技术等

纳米技术新材料的发现及其微小元件和芯片的研制信息技术把世界变得更小、信息传播更快更方便2023/12/3生物技术药物24BI-BT-BE-BS(生物信息－生物技术－生物经济－生物社会）21世纪将从信息社会转向生物社会世界经济处于低迷的时候,各国都在寻找下一个经济增长点—就是生物科技美国将每年4月份的一个星期定为生物科技周日本将生物科学技术作为立国之本欧盟将每年计划框架内的45%经费用于生物科技与生态环境的研究2023/12/3生物技术药物25二、生物技术药物的研究概况随着生物技术药物的发展，多肽和蛋白质药物制剂的研究与开发，已成为医药工业中一个重要的领域，同时给药物制剂带来新的挑战。由于多肽和蛋白质类药物性能很不稳定，极易变质，因此如何将这类药物制成稳定、安全、有效的制剂，是药剂工作者面临的一个难题。例如降钙素基因相关肽是治疗高血压的有效药物，但该药物不稳定，虽早已开发，但至今未能上市。多肽和蛋白质类药物对酶敏感又不易穿透胃肠道粘膜，故一般只能制成注射给药，使用很不方便／因此研究此类药物的给药系统（口服、皮下、粘膜等）是具有很大价值和广阔前景的2023/12/3生物技术药物26生物技术与生物制药联合企业的发展正日益全球化，在生物技术企业发展中美国位居世界榜首。正在研究开发的生物技术药物品种63%在北美，25%在欧洲，7%在日本，5%在世界其它地方。生物技术药品市场45%在美国，28%在欧洲，37%在世界各地，通过对各国生物技术及其产品的专利申请分析进一步表明欧美在生物技术的研究开发中占有很大比重。2023/12/3生物技术药物27生物技术工业经过25年努力，创造了35种重要治疗药物，年销售额已超过70亿美元。全球已有生物技术制药公司2000多家，其中美国有1300家，欧洲有700家。1997年美国的生物技术研究与开发费用为76亿美元、欧洲为18亿美元。生物技术产业为美国创造了12万个就业机会，在欧洲提供了2.75万个就业机会，而且未包括其相关支撑产业与制药行业。已有20%的美国生物技术制药公司股票上市，也有相当比例的欧洲生物技术制药公司的股票上市，获利的生物技术公司正在逐年增加。2023/12/3生物技术药物28我国生物技术制药业虽已经过20多年的积累和发展，产生了可观的经济和社会效益，但就整体而言，仍处于起步阶段，其产值仅占医药工业总产值的40％左右。1999年全国生物制药业的盈利约为12亿元，2000年盈利达到25亿元。进步虽快，但在国际市场所占份额仍然很小。

预计在今后几年，我国生物制药业将会保持20％～30％的年增长率，到2005年生物制药业的市场销售额将达到130亿～150亿元，利润将达到40亿～48亿元。虽与发达国家相比，国内生物医药技术仍存在明显的差距，但生物医药业无疑正处在加速上升阶段，市场潜力巨大。

2023/12/3生物技术药物29重组药物的新剂型研究对生物技术制药工业的产业化也具有重大推动作用。尽管已有许多重组药物在临床广泛应用，但对它们的剂型研究却显得很不够。此外，这类药物在口服时存在生物利用度低，物理化学稳定性差，体内半衰期短等缺点，致使它们常常只能采用频繁地注射给药，其使用与保存也十分不便。通过剂型改良可以克服这些缺点。对提高疗效，减少不良反应十分有效。应用可降解的多聚物将重组蛋白类药物制成缓释微囊是一种有效的新剂型。蛋白质稳定剂的研究也促进了这类剂型的发展，如每月使用一次的人生长素长效制剂已进入临床。这种制剂的优点是剂量小，给药次数少，使原先难于商品化的品种进入工业化。2023/12/3生物技术药物30生物反应器2023/12/3生物技术药物31分离纯化2023/12/3生物技术药物322023/12/3生物技术药物33工厂HPLC系统2023/12/3生物技术药物34电泳系统2023/12/3生物技术药物35冷冻干燥机2023/12/3生物技术药物36气相色谱系统2023/12/3生物技术药物37示差扫描量热仪2023/12/3生物技术药物38荧光分光光度计2023/12/3生物技术药物39荧光显微镜2023/12/3生物技术药物40圆二色仪2023/12/3生物技术药物41X－Ray衍射仪2023/12/3生物技术药物42共聚焦显微镜2023/12/3生物技术药物43流式细胞仪2023/12/3生物技术药物44毛细管电泳2023/12/3生物技术药物45酶标仪与PCR仪2023/12/3生物技术药物46三、生物技术药物的结构特点与理化性质（一）蛋白质的结构特点蛋白质的组成和一般结构已在生化课程讲述／其本质就是由许多氨基酸按一定排列顺序通过肽键相连而成的多肽链。（具有一级结构和高级结构（二、三、四级））。一级结构2023/12/3生物技术药物472023/12/3生物技术药物48β-转角2023/12/3生物技术药物49超二级结构2023/12/3生物技术药物50tRNA三级结构2023/12/3生物技术药物51发夹式结构2023/12/3生物技术药物52（二）蛋白质的理化性质1、一般理化性质（1）旋光性／蛋白质分子总体旋光性由构成氨基酸各个旋光度的总和决定／通常是右旋，由螺旋结构引起，当蛋白质变性，螺旋结构松开，则其左旋性增大。（2）紫外吸收／大部分蛋白质均含有带苯核的苯丙氨酸、酪氨酸与色氨酸，苯核在紫外280nm有最大吸收，氨基酸在紫外230nm显示强吸收。（3）蛋白质两性本质与电学性质蛋白质除肽链N－末端有自由的氨基和C－末端有自由的羧基外，在氨基酸的侧链上还有很多解离基团，这些基团在一定pH条件下都能发生解离而带电，因此蛋白质是两性电解质2023/12/3生物技术药物532、蛋白质的不稳定性（1）由于共价键引起不稳定性共价键改变引起蛋白质不稳定的化学反应有水解、氧化和消旋化或蛋白质的特有反应，即二硫键的断裂与交换1）蛋白质的水解蛋白质可被酸、碱和蛋白酶催化水解，使蛋白质分子断裂，分子量逐渐变小，成为分子量大小不等的肽段和氨基酸。完全水解／在5.7mol／L盐酸中于110℃高温20h蛋白质可完全变成氨基酸或4.2mol／LNaOH水解10h。不完全水解／在酶或稀酸较温和的条件下进行，水解产物有肽段与氨基酸2023/12/3生物技术药物542）蛋白质的氧化具有芳香侧链的氨基酸如甲硫氨酸、半胱氨酸可在一些氧化剂作用下氧化／常用氧化剂有分子氧、过氧化氢、过甲酸、氧自由基等影响氧化的因素有温度、pH、缓冲介质、催化剂的种类、氧的强度等。

3）外消旋作用（racemization）某些旋光性物质在化学反应过程中，由于不对称碳原子上的基团在空间位置上发生转移，使D型或L型化合物转变为D型和L型各50％的混合物，彼此旋光值抵销，失去旋光性，这种现象称为外消旋作用。碱水解往往会使某些氨基酸产生消旋作用。

2023/12/3生物技术药物554）二硫键及其交换二硫键（－S－S－）又叫二硫桥或硫硫桥，是很强的化学键／二硫键把同一肽链（肽链内）或不同肽链（肽链间）的不同部分连接起来，对稳定蛋白质的构象起重要作用／在某些蛋白质中，二硫键一旦破坏，则蛋白质的生物活性即丧失／蛋白质分子中二硫键愈多，则结构稳定性和抗拒外界因素的能力也愈强蛋白质分子中二硫键断裂接着重排能够改变蛋白质的三级结构，因此影响其生物活性／在一些胰岛素的处方中常见共价胰岛素二聚物的生成认为是由于二硫键交换的结果2023/12/3生物技术药物56（2）由非共价键引起的不稳定性引起蛋白质不可逆失活作用的三种主要类型：聚集(aggregation)、宏观沉淀(macro-precipatation)和表面吸附(surfaceadsorption)与蛋白质变性(denatunation)／这些均是由于与空间构象有关的非共价键力引起，这些现象在开发蛋白质与多肽类药物制剂中常常引起麻烦。

2023/12/3生物技术药物57（三）蛋白质类药物的评价方法1、液相色谱法2、光谱法3、电泳4、生物活性测定与免疫测定2023/12/3生物技术药物58

1、液相色谱法(liquid-phasechoromatography)

液相色谱法是评价蛋白质的纯度与稳定性的常用方法／在蛋白质分析中通常采用反相高压液相色谱法（RP-HPLC）等。

2、光谱法(spectrography)

通过对蛋白质吸收、辐射、散射光的定量分析可提供有价值的信息，了解蛋白质的量、构象和聚集倾向／例如紫外、红外、荧光、圆二色谱等

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3、电泳(electrophoesis)电泳技术是根据在电场的作用下，蛋白质在载体凝胶上产生特征性迁移，迁移率是所带净电荷和它的大小的函数，以此来分离蛋白质／多采用十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS）、等电点聚焦电泳（isoclectricfocusing,IEF）、毛细管电泳（EC）等SDS电泳／用SDS阴离子表面活性剂使样品变性，随后能通过聚丙烯酰胺担体进行电泳／本法用于测定蛋白质亚单位组成和分子量已取得满意效果等电点聚焦电泳／将蛋白质置于一个通直流电而产生的pH梯度体系时，不同蛋白质在电场作用下移动，并聚焦于相应其等电点的pH位置。毛细管电泳／电场驱使荷电分子通过有小孔的熔合硅胶、毛细管，以达到分离的目的，其优点是分辨率高、灵敏度高、分析时间短，易于自动化。2023/12/3生物技术药物604、生物活性测定与免疫测定生物活性检测(bioactivitydetection)／是利用体内模型或体外组织或细胞对活性蛋白质多肽的特异生物学反应，通过剂量（或浓度）效应曲线进行定量（绝对量或比活性单位）／生物活性测定是制订这类药物制剂质量标准最基本的方法。免疫测定(immuno-assay)／通常利用溶解的抗原（例如一种蛋白质）与适当比例含特异抗体血清即免疫血清（用动物免疫所得）混合，则会形成沉淀，这种建立在沉淀反应基础上的免疫化学方法非常适合于蛋白质的定性及定量分析、蛋白质制剂（杂有其它蛋白质）的均一性试验、以及蛋白质混合物组分的鉴定2023/12/3生物技术药物61第二节蛋白质类药物制剂的处方与工艺此类药物制剂研制关键是解决稳定性问题／注射给药则采用适当辅料，设计合理的处方与工艺／非注射给药还须解决生物利用度问题／本节主要讨论注射剂型一、蛋白质类药物的一般处方组成目前临床上使用的蛋白质类药物注射剂／一为溶液型注射剂，另一为冷冻干燥型注射剂溶液剂型使用方便，但需在低温（2～8℃）下保存／冷冻干燥剂型比较稳定，但工艺较复杂2023/12/3生物技术药物62举例如下：

1、α－2b干扰素（商品名IntronA）为注射用冷冻干燥产品。处方组成：每瓶含蛋白质5mg，Na2HPO49mg，NaH2PO42.25mg，NaCl43mg，聚山梨酯801.0mg贮存条件：临用前用注射用水配制，可在2～8℃下保存一个月。

2、红细胞生成素（商品名Epogen）溶液型注射液（静脉和皮下注射）处方组成：每瓶含200～10000IU红细胞生成素，HAS（人血清白蛋白）2.5mg，枸橼酸钠5.8mg，氯化钠5.8mg，枸橼酸0.06mg贮存条件：2～8℃

2023/12/3生物技术药物63二、液体剂型中蛋白质类药物的稳定化在液体剂型中蛋白质类药物的稳定化方法分为两类：（1）改造其结构；（2）加入适宜辅料。在此主要讨论加入辅料问题。

2023/12/3生物技术药物64蛋白质类药物的稳定剂有以下几类：

1、缓冲液

2、表面活性剂

3、糖和多元醇

4、盐类

5、聚乙二醇类

6、大分子化合物

7、组氨酸、甘氨酸、谷氨酸和赖氨酸的盐酸盐等

8、金属离子

2023/12/3生物技术药物651、缓冲液／一般来说pH和离子强度对蛋白质的稳定性及溶解度有很大影响。pH的影响通常在蛋白质药物溶液配制中采用适当的缓冲系统是很必要的／盐类除了影响蛋白质的稳定性外，其浓度对蛋白质的溶解度与聚集均有很大影响。2、表面活性剂／由于离子型表面活性剂会引起蛋白质的变性，所以在蛋白质药物，如干扰素、G-CSF等制剂中均加入少量非离子表面活性剂，如吐温80来抑制蛋白质的聚集／其机理可能是因为表面活性剂倾向于排列在气－液界面上，从而使蛋白质离开界面来抑制蛋白质的变性。3、糖和多元醇／属于非特异性蛋白质稳定剂／如蔗糖、海藻糖、甘油、甘露醇、山梨醇等。4、盐类／盐可起到稳定蛋白质的作用，有时也可破坏蛋白质的稳定性／这取决于盐的种类、浓度、离子相互作用的性质及蛋白质的电荷。2023/12/3生物技术药物665、聚乙二醇类／高浓度的聚乙二醇类常作为蛋白质的低温保护剂和沉淀结晶剂／不同分子量的PEG作用不同，如PEG300浓度0.5％或2％可抑制重组人角化细胞生长因子（rhKGF）的聚集；PEG200、400、600和1000可稳定BSA和溶菌酶。6、大分子化合物／其机制可能是通过大分子的表面活性、蛋白质－蛋白质相互作用的空间隐蔽以及提高粘度来限制蛋白质运动或通过优先吸附于大分子以起到稳定作用／如人血清白蛋白（HAS）已在许多蛋白质类生物技术来源的药物制剂中作稳定剂；如2－羟丙基－β环糊精是较有前途的稳定剂，其本身又是增溶剂可静脉注射，可用来抑制rhKGF的聚集，稳定白介素－2和牛胰岛素等。7、组氨酸、甘氨酸、谷氨酸和赖氨酸的盐酸盐等／可不同程度的抑制45℃10mM磷酸盐缓冲液中yhKGF的聚集。8、金属离子／如钙、镁、锌与蛋白质结合，使整个蛋白质结构更加紧密、结实、稳定。不同金属离子的稳定作用视离子的种类、浓度不同而不同，应通过稳定性试验选择金属离子的种类和浓度。

2023/12/3生物技术药物67三、固体状态蛋白质药物的稳定性与工艺在一些蛋白质药物不能采用溶液型制剂时，往往用冷冻干燥与喷雾干燥的工艺解决这类制剂的稳定性问题／这两种工艺均可用于热敏感药物的脱水以延缓溶液中常见的分解作用。（一）冷冻干燥(freeze-drying)蛋白质药物制剂主要考虑两个问题：（1）选择适宜的辅料，优化蛋白质药物在干燥状态下的长期稳定性；（2）考虑辅料对冷冻干燥过程一些参数的影响，如最高和最低干燥温度，干燥时间，冷冻干燥产品的外观等。

2023/12/3生物技术药物68冻干状态与溶液状态的稳定机制不同，冻干状态的稳定机制可能是除去水化层后，辅料作为水的替代物结合在蛋白质上／这些替代物如海藻糖和乳糖可满足干燥蛋白质极性基团对氢键的需要。单剂量的蛋白质药的量很少，冻干后瓶内只剩很少物质，也不会形成冻干饼块／因此用填充剂来改善产品的外观，甘露醇是常用的填充剂，还可用作冻干保护剂／还有如山梨醇、蔗糖、葡萄糖、右旋糖酐等2023/12/3生物技术药物69（二）喷雾干燥蛋白质药物制剂喷雾干燥时，加入液流经雾化后，表面积很大，在与热空气接触过程中，水份迅速气化，粒子在几秒钟内得到干燥。喷雾干燥的特点：所得产品可控制颗粒大小与形状，生产出流动性很好的球状颗粒／此项工艺对制备蛋白质类药物的控释制剂特别是发展新的给药系统是很有用的。在喷雾干燥过程中也可加入稳定剂／如蔗糖对氧血红蛋白就有稳定作用。

2023/12/3生物技术药物70第三节蛋白质类药物新型给药系统一、新型注射（植入）给药系统（一）控释微球制剂为达到蛋白质类药物控制释放，可将其制成生物可降解的微球制剂。生物可降解材料有聚乳酸（PLA）或聚丙交酯－乙交酯（PLGA）或聚乳酸乙醇酸共聚物等。2023/12/3生物技术药物71例如：醋酸亮丙瑞林聚丙交酯－乙交酯微球此制剂是美国FDA批准的蛋白质类药物微球制剂／亮丙瑞林是LHRH类似物，用于治疗前列腺癌，可控制释放达30天，不须每天用药，使用方便。制备方法：将醋酸亮丙瑞林，明胶和水混合加热至60℃为内水相，油相为PLGA溶于二氯甲烷，然后将油相在搅拌或超声处理逐渐倒入水相制成W/O微乳剂，此乳剂冷却至15℃，与聚乙烯醇溶液混合制成W/O/W复乳，在30℃下缓慢搅拌2h或旋转蒸发除去二氯甲烷，的引发的圆形微球（或微囊）／平均粒径20μm，药物缓俩路约10％2023/12/3生物技术药物72根据不同性质的载体材料可选择不同的制备方法如相分离凝聚法、乳化蒸发法、复乳液中干燥法、低温喷雾提取法、喷雾干燥法、超临界萃取法等2023/12/3生物技术药物73

（二）脉冲式给药系统例如肝炎、破伤风、白喉等疾病所用疫苗或类毒素均为抗原蛋白，使用这些疫苗全程免疫至少进行三次接种，才能确证免疫效果，由于种种原因，全世界不能完成全程免疫接种约有70％，因此为了提高免疫接种的覆盖率，WHO疫苗发展规划主要目标之一就是将多剂疫苗发展为单剂控释疫苗／其中之一就是研制脉冲式给药系统，例如将破伤风类毒素制成PLGA脉冲式控释微球制剂／一次注射该制剂可在1～14天、1～2个月与9～12个月内分三次脉冲释放，达到全程免疫的目的2023/12/3生物技术药物74二、非注射给药系统多肽和蛋白质类药物非注射途径给药包括鼻腔、口服、直肠、口腔、透皮和肺部等／其中鼻腔给药似乎最具前景，然而口服给药是目前最受欢迎的给药途径，尽管难度很大，但有进一步研究的必要。多肽蛋白质类药物非注射途径系统存在的主要问题是：1、药物穿透粘膜能力差；

2、易受酶的降解；

3、以致生物利用度很低2023/12/3生物技术药物75为提高这类药物制剂生物利用度。一般采用以下方法：（1）对药物进行化学修饰或制成前体药物；（2）应用吸收促进剂；（3）

使用酶抑制剂；（4）

皮肤给药采用离子电渗法。2023/12/3生物技术药物76其中吸收促进剂应用较多／吸收促进剂的作用机制有：（1）

增强药物的热力学运动，使药物不易聚集，溶解性增加，易于吸收；（2）

改变上皮细胞的体积，使细胞间转运更易进行；（3）

增加生物膜的流动性，使药物容易穿过，或引起膜磷脂排列的混乱；（4）

抑制药物的水解，如制成胆酸盐。2023/12/3生物技术药物77

（一）鼻腔给药系统是一个较有希望的给药途径／由于鼻腔粘膜中动静脉和毛西淋巴管分布十分丰富，鼻腔呼吸区细胞表面具有大量微小绒毛，鼻腔粘膜的穿透性较高而酶相对较少，对蛋白质类药物的分解作用比胃肠道粘膜低，因而有利于药物的吸收并直接进入体内血液循环。目前已上市的制剂主要有滴鼻剂与喷鼻剂等／如LHRH激动剂布舍瑞林（buserelin）、去氨加压素、降钙素、催产素等。为提高蛋白质药物鼻腔给药的生物利用度，可采用吸收促进剂／常用的有甘胆酸盐、胆酸盐、去氧胆酸盐、牛磺胆酸盐、葡萄糖胆酸盐、鹅去氧胆酸盐等以及脂肪酸及酯类如癸酸酯、辛酸酯、月桂酸酯；还有醚类如聚氧乙烯－5－辛醚、聚氧乙烯－5－月桂基醚等。

2023/12/3生物技术药物78胰岛素鼻腔给药系统进行了广泛的研究／不用促进剂时生物利用度小于1％，用葡萄糖胆酸酯作吸收促进剂，其生物利用度可达10～30％／也有报道将胰岛素制成淀粉微球，采用剂量0.75IU／kg和1.70IU／kg动物实验，喷入大鼠鼻腔，达峰时为8min，30～40min后，血糖分别下降40％和64％,维持时间为4h，生物利用度约为30％。鼻腔给药系统当前存在的主要问题是有些分子量大的药物穿透性较差，生物利用度达不到要求。2023/12/3生物技术药物792023/12/3生物技术药物80（二）口服给药系统蛋白质类药物口服给药主要存在四个问题：（1）

在胃内酸催化降解；（2）

在胃肠道内的酶水解；（3）

对胃肠道粘膜的穿透性差；（4）

肝的首过效应。2023/12/3生物技术药物81某些酶抑制剂和吸收促进剂与多肽蛋白质类药物共用可促进其吸收。胰岛素口服给药是人们关注的重点／因为胰岛素目前主要靠注射给药，而且每天需频繁注射（3～4次），某些病人需终身给药，给病人带来极大的不便，研制口服胰岛素制剂十分必要2023/12/3生物技术药物822023/12/3生物技术药物83以下是研究的几种主要剂型：

1、微乳制剂磷脂、胆固醇、油酸及抗氧剂和防腐剂为油相，胰岛素、枸橼酸、抑肽酶为水相，乳化剂主要为聚氧乙烯（40）硬脂酸酯制成W/O型微乳，或将微乳喷于羟丙基纤维素或羧甲基纤维素上干燥装入胶囊中／以1IU／kg的剂量用于3个糖尿病患者约半年，血中胰岛素水平上升而血糖明显下降／也有人制成口服复乳（W／O／W）和皮下注射制剂降糖效果相当2023/12/3生物技术药物84

2、纳米囊将胰岛素制成聚氰基丙烯酸异丁酯纳米囊，平均粒径为220nm，包封率54.9％，以50IU／kg给大鼠灌胃，2天降低糖尿病大鼠血糖50～60％，效果可维持20天

3、胰岛素肠用软胶囊将胰岛素、十六醇及花生油混匀装入软胶囊，然后用EudragitRS与S或EudragitRS与L的丙酮溶液包衣，大鼠灌胃给药，2h后降糖效果明显。

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4、胰岛素微球制剂将胰岛素制成Eudragie微球制剂／采用EudragitL100与S100／也取得较好的降糖效果。见后表19－6

5、胰岛素脂质体以二棕榈酰磷脂酰胆碱（DPPC）、胆固醇（Ch）为膜材制得胰岛素脂质体／粒径为100nm，包封率约17.9～33.6％／结果表明药理利用度最高达31.6％（如静脉注射比较），这是令人鼓舞的。见后表19－72023/12/3生物技术药物862023/12/3生物技术药物872023/12/3生物技术药物88（三）直肠给药系统由于直肠内水解酶活性比胃肠道低。而且pH接近中性，所以药物破坏较少，且药物吸收后基本上可避免肝的首过效应，直接进入全身血液循环，同时也不像口服药物受到胃排空及食物的影响，因此肽类与蛋白质类药物直肠给药是一条可选择的途径。为提高直肠吸收效果／一般采用直肠吸收促进剂如水杨酸、5－甲氧基水杨酸、去氧胆酸钠、DL－苯基苯胺乙酰乙酸乙酯等例如胰岛素不加促进剂直肠给药生物利用度小于1％，加入DL－苯基苯胺乙酰乙酸乙酯，则吸收可达27.5％2023/12/3生物技术药物892023/12/3生物技术药物90（四）口腔粘膜给药系统口腔粘膜较鼻粘膜厚，但表层不像皮肤那样角质化，由于面颊部血管丰富，药物吸收后可经颈静脉、上腔静脉直接进入全身循环，可避免胃肠道消化液及肝的首过作用。例如胰岛素直接从口腔粘膜吸收也很少，需要使用吸收促进剂／但口腔粘膜吸收促进剂的影响比口服要小。将胰岛素与甘胆酸钠及可可豆脂制成内层，外周粘附层则为HPC(羟丙基纤维素)与卡比普／制成粘膜粘附制剂／用狗做实验，在狗的口粘膜上可粘附6h，但胰岛素口腔粘膜剂生物利用度与肌肉注射相比，仅为0.5％2023/12/3生物技术药物912023/12/3生物技术药物92（五）经皮给药系统皮肤的穿透性低是肽和蛋白