050-ACTH检验标准操作规程

XX医院检验科XX医院检验科第1页共4页ACTH检验标准操作规程文件编号：sop-050文件编号：sop-050文件名称：ACTH起草人：审核人：批准人：起草日期：审核日期：批准日期：目的：用于体外定量测定人EDTA-血浆样本中促肾上腺皮质激素的含量适用机型：LIAISON测定原理：承受免疫夹心化学发光检测方法。在磁微粒〔固相〕上包被有特异性的鼠单克隆抗体N-端，另一种单克隆抗体〔ACTH的C-端碎片〕与异鲁米诺衍生物结合〔异鲁米诺抗体结合物〕ACTH与固相上的单克隆抗体结合，然后异鲁米诺抗体结合物与已结合到固相的ACTH反响。孵育完毕后，未结合的物质会被清洗移除，最终，参加启动试剂，引发瞬时化学发光反响，产生光信(RLU)指示异鲁米诺-抗体结合物的数量，从而得出校准品、样本或质控品中的ACTH测定步骤：仪器测试预备：按LIAISON操作手册翻开系统，进展每日使用前的维护。包括清洗、光路检测等。样本的采集、原料及保存：样本中的ACTH分子降解速度很快，因此在处理样本时必需严格遵循以下要求。必需使用冷冻储存的人EDTA承受静脉穿刺方法采集血样并保存在含EDTA抗凝剂的硅化玻璃试管、真空采血管〔紫帽〕或类似的容器里。避开溶血。样本采集后应马上将样本管置于冰浴中低温保存。样本采集后120存在塑料或硅化玻璃试管里并于-20°C或以下低温冷冻。每份分装的上清液的最小体积300L。检测前，慎重解冻混匀样本，检查是否有气泡并去除气泡。解冻的样本应置于2-8℃并6高度溶血、高度脂血、含有颗粒物质或明显被微生物污染的样本不能用于检测。制止使用凝血样本。避开反复冻融。任何没有用完的分装液都应当丢弃。检测样本一次需要的最小量为300L(150L样本+150L保护体积)试剂的预备：在揭开密封纸之前，先轻轻地水平摇摆试剂整盒〔为了防止泡沫形成。粒重悬浮。将试剂盒放入仪器试剂区，等待30分钟。在此期间，磁颗粒自动地被搅拌并完全地重悬浮。定标:该测试已经用国际参考标准NIBSC1stIRR84/510〔重定标为一个的、仪器特异的测量水平。以下状况需要定标：每转变一次批号〔指试剂整盒或者激发试剂而言每使用一个的试剂盒，LIAISON的每次维护之后，当质控值不在期望范围之5℃时。质控：请使用适当的质控作为内部质控。测试：严格依据LIAISON的操作说明操作。每一个测试参数都由试剂盒上的条形码识别。需要进一步的信息请参考LIAISON反响步骤：150µl 样本，定标物或质控+200µl 示踪物+20µl 磁颗粒20min 温育，洗涤3s 测量结果计算：LIAISON借助于由主曲线两点定标而得到的一条定标曲线，自动地计算每一个样本的ACTHpg/ml1pg/ml0.2202pmol/l.需要更进一步的信息请参考LIAISON结果说明参考范围测量范围：直接计算ACTH浓度，其浓度范围为1.61500pg/mL。1pg/mL相当于0.2202pmol/L。LIAISON®ACTH589个欧洲个体样本送往试验室进展ACTH相关的临床争论。这些样本〔男=270，女=313，不明=6〕在使用参考方法检测后被归类为正常个体样本。16.3pg/mL，ACTH4.7—48.8pg/mL〔5％-95%可信区间。每个试验室应建立自己的根底参考值范围。临床样本：我们同时对51个病理样本作了临床争论，正常样本和病理样本的统计分析结果如下表所示：640例样本的临床ACTH临床病症样本数平均值pg/mL标准差pg/mL2.5th%pg/mL中值(50th%)pg/mL97.5th%pg/mL最小值pg/mL最大值pg/mL〔ST〕1510.315.02.56.746.62.463.0〔AD〕9219.1157.362.8134.3437.059.4450.0ACTH综合症〔ES〕8424.6489.9143.7187.71381.0139.01500.0〔CS〕12116.864.752.0103.1236.150.0240.0纳尔逊(氏)综合症〔NS〕4729.8625.9165.2632.11460.0155.01500.0窦岩导管插入术〔SPC〕3298.167.7225.9337.1337.3220.0337.0〔N〕58916.314.63.616.360.51.4106.1试剂的保存试剂盒密封状态下：2-8°C条件下保存至失效期。翻开密封膜后或2-8°C：至少可稳定储存2周。2周后，假设质控值仍在靶值范围内，试剂盒仍可使用。假设试剂盒已开封，必需使用同一台化学发光仪进展检测。不能冷冻。为便利以后使用时磁微粒的重悬浮，试剂盒必需直立放置。避开直射光线。校准品冻干粉：2-8°C条件下保存至失效期。配制后：2-8°C保存3天。配制后冷冻：-20°C可保存1个月。促肾上腺皮质激素分子在液体中抗热稳定性差：重配制后的校准品置于室温的时间不能长于在LIAISON®仪器上操作需要的时间。重配制的校准品溶液必需马上分装转移到系列塑料或硅化玻璃试管里并低温冷冻保存。溶解后的校准品必需在当日全部用完。分装的最小体积为600L(450L定标液+150L死体积)。分装的每份校准品仅允许一次冷冻和溶解。校准品处理过程中，承受适当的预防措施避开细菌污染分析方法的局限性此试剂盒只能用于在LIAISON®。试剂盒组分不能拆分。过效期的试剂盒不能使用。牢靠的结果依靠娴熟的技术人员和严格的操作程序。细菌污染或热灭活的样本可能影响试验结果。检测结果在正常值范围内并不能排解肾上腺皮质功能失常，必需结合其它诊断程序一起做出推断。检测结果以定量形式报告。但是，不能依据单次的检测结果来推断是否患有疾病，而应当结合临床观看结果和医学推断来下结论。每个治疗方案都应基于个体案例来打算。上海市XX医院检验科 ACTH检验标准操作规程 第4页共4页LIAISON®ACTH检测是在分析物完整和不变状态下进展的影响，故用不用的检测试剂测试可能会得到不全都的结果。即使样本中参加了HAMA中和试剂，极高浓度的HAMA〔人抗鼠抗体〕仍可能会影响检测结果。样本中ACTH水平超出测量范围的样本可用LIAISON®内分泌稀释液〔产品代号：319133〕预先稀释后再测量。警告及预防措施-此试剂盒用于检测冷冻的EDTA样本。其根底参考值范围和全部性能数据都是基于冷冻的EDTA遵守处理全部试验试剂的一般性预防措施应当依据当地法律准则废弃全部的废物全部试剂中包含的人血清均用免疫测试检测过，