2型糖尿病合并高脂血症快速造模方法的研究

2型糖尿病合并高脂血症快速造模方法的研究

据临床报道，2型糖尿病并发症并发症的发病率最近升高，关于这种临床疾病的药物筛选试验也在增加。本实验对这种疾病的模型进行了研究。1材料和方法1.1实验动物的饲料链脲佐菌素(STZ,SigmaUSA)0.1mol/L柠檬酸缓冲液pH=4.2(自配,0.22nm滤膜过滤灭菌)。高脂饲料(H.E)(配方:10.0%猪油,10.0%蔗糖,2.5%胆固醇,0.4%胆酸钠,77.1%的基础饲料)订购于湖北省实验动物中心。Wistar大白鼠[SPF级,体重(200±20)g],雄性48只,购于湖北省实验动物中心,动物合格证号:SCXK(鄂)2003-0005。强生便携血糖仪及强生8号血糖试纸。1.2大鼠的饮食和饮水动物购进后,观察1周,选取健康动物随机分为正常组、STZ组、H.E组、H.E+STZ组,其中,正常组、STZ组给予正常饮食、饮水,H.E组和H.E+STZ组给予正常饮水和H.E,大鼠自由采食。1.3两组stz柠檬酸缓冲液的注射在实验动物给予10dH.E后,STZ组和H.E+STZ组空腹腹腔注射9g/LSTZ柠檬酸溶液(45mg/kg)一次,正常组和H.E组注射相同给药容量的柠檬酸缓冲液。全部实验动物正常饮水。1.4d空腹血糖d电STZ注射后断尾取血测定1、2、3、10、20d空腹血糖;在注射后第10天每组6只颈动脉放血处死,取血,分离血清送检验科测血脂全套,取肝脏、胰腺做病理;注射后第20天同样处理剩下的大鼠。1.5stz注射前后大鼠变化每4d观测动物外观和体重并做记录。在STZ注射之前动物皮毛光泽油亮、顺滑,精神状态佳,行动敏捷,粪尿正常。STZ注射后第3天2个注射组老鼠发生明显变化,精神萎靡,活动明显减少,皮毛干燥粗糙,尿量增多。注射组体重明显下降。随着时间推移逐渐恢复,但动物状态仍然比非注射组差,体重也比非注射组轻。体重变化见图1。1.6统计处理所有实验结果用统计软件SPSS8.0进行分析,结果均以表示,用配对t检验比较结果。2结果2.1造模和血糖检测注射STZ后大鼠血糖明显升高,其中H.E+STZ组要高于STZ组,3d时有明显趋势,但无统计学意义。10d和20d时P<0.05(表1),且两组动物都达到2型糖尿病的造模标准。H.E组血糖有少量升高。本实验中也观察到了Wistar大白鼠STZ造模后的自我恢复现象,但因为注射STZ后饲养的时间不长尚无法知道结果。2.2血液中的血液抑制见表2。说明STZ对血脂的升高有明显协同作用。其具体机制是STZ的直接作用还是造成胰岛损伤后引发,或者是其他机制还不清楚。2.3病理结果3不同剂量stz和h.e对大鼠血糖和胰腺组织结构的影响2型糖尿病作为世界第三大疾病,对人们的健康危害很大。其有一系列的并发症,并发高血脂现在比较常见。据文献报道在中国的发病率也有上升。2型糖尿病病人体内存在胰岛素抵抗,而胰岛素抵抗可以直接导致脂质代谢紊乱,高血糖易伴发高血脂。虽然这些相互作用的机制还不清楚,但在动物体内也需要考虑这些因素间的相互作用。实验结果表明联合应用STZ和H.E与单独应用其中的一种是有较大的区别的。以前曾经有血糖的变化对STZ的剂量有依从性,高脂喂养大鼠的胰岛B细胞对STZ的敏感性增大的报道。本实验研究进一步说明STZ应用后对血脂的升高作用很强,而合用H.E也可以降低STZ的用量,且同样可以有很好的高血糖造模效果。大鼠的生命周期较短,本实验室以往的研究表明单纯给予H.E,TG需要较长时间才能达到造摸标准,而且在模型成功时动物的肝脏已经发生不易逆转的脂肪肝甚至肝纤维化。一次大剂量给予STZ对动物的副作用比较大,动物的死亡率要高于低剂量STZ联合H.E,而且STZ的成本很高。所有这些表明联合应用STZ和H.E在短时间内造成可以被逆转的高血脂高血糖模型有很大的优势。特别是随着人们生活水平的提高,保健品的研究越来越多,这个造摸方法在保健品的研究领域会有更大的应用空间。实验结束时各组动物肝脏外观正常,病理显示肝小叶结构清晰,肝细胞索排列整齐,肝窦正常,细胞结构清晰可见,未见脂肪变性及炎症反应。无脂肪肝和纤维化改变,说明动物还属于高脂血症(图2~4)