9-9抗生素类药物分析课件

2023/11/27第九章

（九）

第一节青霉素钠和青霉素钾及其制剂的分析第二节阿莫西林及其制剂的分析第三节头孢氨苄及其制剂的分析第四节硫酸庆大霉素及其制剂的分析第五节盐酸四环素及其制剂的分析

抗生素类药物分析

返回2023/11/27概述：

常见的检查项目：一般杂质；有关物质；聚合物；残留溶剂；异常毒性；降压物质；热源；细菌内毒素；无菌

常用含量测定方法：

1.生物学方法：管碟法；浊度法

2.化学或物理方法：容量法；光谱法；色谱法

第十七章抗生素类药物的分析2023/11/27第一节青霉素钠和青霉素钾及其制剂的分析一、鉴别：★（1）高效液相色谱法（HPLC）：保留时间一致（2）红外光谱法：与标准图谱一致（3）焰色反应：钠盐显鲜黄色；钾盐显紫色2023/11/27二、检查：★

1．吸光度：λ=280nm或λ=325nm；A＜0.10

2．有关物质：HPLC法；3．青霉素聚合物：分子排阻色谱法（凝胶色谱法）4．干燥失重；重量法；限量＜0.5%5．细菌内毒素：细菌内毒素检查法；限量＜0.10EU6.无菌：“薄膜过滤法”第一节青霉素钠和青霉素钾及其制剂的分析2023/11/27

药典采用高效液相色谱法测定含量色谱条件与系统适用性试验：固定相：（ODS）；流动相：（流动相A：流动相B=70:30）【流动相A】（0.5mol/L磷酸二氢钾溶液：甲醇：水=10:30:60）；【流动相B】（0.5mol/L磷酸二氢钾溶液：甲醇：水=10:50:40）；检测波长（225nm）n>2000；R符合要求用外标法计算含量：三、含量测定★第一节青霉素钠和青霉素钾及其制剂的分析2023/11/27一、阿莫西林的分析★★（一）鉴别1.薄层色谱法：对照品与供试品主斑点颜色相同2.高效液相色谱法：保留时间一致3.红光谱法：与标准图谱一致第二节阿莫西林及其制剂的分析★（二）检查：1．有关物质：高效液相色谱法；3．阿莫西林聚合物：分子排阻色谱法4．水分：水分测定法2023/11/27一、阿莫西林的分析第二节阿莫西林及其制剂的分析★（三）含量测定药典采用HPLC法测定含量色谱条件与系统适用性试验：固定相：（ODS）；流动相：（0.05mol/L磷酸二氢钾溶液：乙腈=97.5:2.5）；检测波长（254nm）n>2000；R符合要求用外标法计算含量（四）贮藏遮光，密封2023/11/27二、阿莫西林制剂的分析☆第二节阿莫西林及其制剂的分析☆1.鉴别药典采用TLC法或HPLC法鉴别2.检查：溶出度检查：胶囊采用第一法（转篮法）；

片剂采用第二法（浆法）

3.含量测定药典采用HPLC法(同原料药物含量测定）2023/11/27一、头孢羟氨苄的分析★第三节头孢羟氨苄及其制剂的分析★（一）鉴别1.与三氯化铁反应：显棕黄色2.

HPLC法鉴别：保留时间一致3.红外分光光度法：与标准图谱一致★（二）检查：1.有关物质：HPLC法；不加校正因子的主成分自身对照法2.水分：水分测定法（费休氏法）2023/11/27一、头孢羟氨苄的分析★第三节头孢羟氨苄及其制剂的分析★（一）含量测定药典采用HPLC法色谱条件与系统适用性试验：固定相：（ODS）；流动相：

（0.02mol/L磷酸二氢钾溶液：甲醇=98:2）；检测波长（230nm）；n>2000；R符合要求按外标法计算含量2023/11/27一、头孢羟氨苄制剂的分析第三节头孢羟氨苄及其制剂的分析☆1.鉴别（1）化学鉴别：加三氯化铁后，显黄棕色（2）高效液相色谱法：保留时间一致☆2.检查（1）有关物质检查：HPLC法；限量＜1.0%（2）溶出度测定：紫外-可见分光光度法；（3）其他检查：胶囊需要检查水分；限量＜2.0%☆3.含量测定：与原料药物测定方法相同2023/11/27一、硫酸庆大霉素的分析★第四节硫酸庆大霉素及其制剂的分析★（一）鉴别1.薄层色谱法：供试品与对照品的斑点数、斑点颜色。斑点位置应相同2.高效液相色谱法：保留时间一致3.

红外分光光度法：与标准图谱一致4.硫酸盐反应：与可溶性钡盐反应生成白色沉淀2023/11/27一、硫酸庆大霉素的分析第四节硫酸庆大霉素及其制剂的分析★（二）检查1.硫酸盐检查：HPLC法，用线性回归方程计算硫酸盐含量；限量为32.0%-35.0%2.有关物质检查：HPLC法；按小诺霉素线性回归方程计算；各个杂质限量＜2.0%；总杂质限量＜5.0%3.水分:水分测定法；限量＜15.0%（3）其他检查：胶囊需要检查水分；限量＜2.0%4.庆大霉素C组分：HPLC法色谱条件与系统适用性试验：固定相：（ODS）；流动相：（0.2mol/L三氟醋酸溶液：甲醇=92:8）；蒸发光散射检测器；采用标准曲线法测定含量2023/11/27一、硫酸庆大霉素的分析第四节硫酸庆大霉素及其制剂的分析★（三）含量测定药典采用微生物法测定含量；管碟法或浊度法效价>590庆大霉素单位二、硫酸庆大霉素制剂的分析☆1.鉴别：同原料药物2.检查：注射液需要检查C组分；方法同原料药物

缓释片需要检查释放度；第一法

颗粒剂需要检查干燥失重；减失重量＜0.2%3.含量测定：微生物检定法2023/11/27第四节硫酸庆大霉素及其制剂的分析三、硫酸庆大霉素体内样品的分析☆常用方法：微生物法、放射免疫测定法、荧光偏振测定法、柱前衍生化荧光或紫外检测HPLC法1.色谱条件与系统适用性试验：固定相：（ODS）；流动相：甲醇：乙腈：水（烟酰胺0.05mol/L、庚烷磺酸钠5mmol/L、磷酸0.05mol/L）=27:18:55流速：1.0ml/min；柱温：40℃±1℃检测波长：268nm；2.样品处理：见讲义3.结果：见讲义2023/11/27一、盐酸四环素的分析第五节盐酸四环素及其制剂的分析★（一）鉴别1.三氯化铁反应：

本品+硫酸→深紫色——→红棕色2.高效液相色谱法：保留时间一致3.红外分光光度法：与标准图谱一致4.氯化物反应：三氯化铁2023/11/27一、盐酸四环素的分析第五节盐酸四环素及其制剂的分析★（二）检查1.有关物质检查：HPLC法；加校正因子的主成分自身对照法；2.杂质吸光度：分光光度法；λ=530nm；限量A＜0.12（三）含量测定药典采用HPLC法；色谱条件与系统适用性试验：固定相：（ODS）；流动相：（醋酸铵溶液：乙腈=83:17）；检测波长：280nm；采用外标法计算含量2023/11/27一、盐酸四环素制剂的分析第五节盐酸四环素及其制剂的分析（一）片剂和胶囊剂1.鉴别：与原料药物鉴别方法相同2.检查：与原料药物鉴别方法相同，限度有所放宽3.含量测定测定方法与原料药物相同（二）注射剂1.鉴别：与原料药物鉴别方法相同2.检查：与原料药物鉴别方法相同，限度有所放宽3.含量测定测定方法与原料药物相同2023/11/27一、阿奇霉素的分析★第六节阿奇霉素及其制剂的分析★（一）鉴别1.薄层色谱法：供试品与对照品的斑点数、斑点颜色。斑点位置应相同2.高效液相色谱法：保留时间一致性3.红外光谱法：与标准图谱一致★（二）检查1.结晶性：结晶检查法；符合规定2.碱度：pH值测定法；pH=9.0-11.03.有关物质：HPLC法；4.水分：水分测定法；5.炽灼残渣：重量法6.重金属：重金属检查项下的第二法2023/11/27一、阿奇霉素的分析第六节阿奇霉素及其制剂的分析★（三）含量测定