女性妇女阴道乳酸杆菌感染因素分析

女性妇女阴道乳酸杆菌感染因素分析

在这项工作中，我们调查了不同年龄、不同月经周期、不同感染状态和不同行为的影响，并研究了不同年龄下阴道乳酸杆菌的变化，以及不同感染之间的关系。1数据和方法1.1研究主题2005年10月至2006年3月来我院妇科门诊进行体检的妇女,资料完备并最终进行统计学分析的共197例。1.2方法1.2.1传统妇幼保健查体情况详细记录入选对象年龄、月经周期、社会行为因素(包括职业特点、受教育程度、居住情况、洗浴方式、吸烟、饮酒、性伴侣数、经期性交、经期清洗、阴道冲洗及冲洗频率)及常规妇科查体情况。1.2.2阴道侧壁真菌多样性检测(1)用无菌刮板从阴道侧壁上1/3取得阴道分泌物,用pH3.8~5.4精密pH试纸测定阴道pH,涂盐水湿片一张,直接光镜检查,记录清洁度及有无滴虫。同时涂干片一张,直径约2cm,厚薄均匀,在酒精灯火焰上加热固定,然后用Gram染色,显微镜下检查菌群、真菌、Nugent评分。(2)定量(0.1mL)取阴道侧壁上1/3分泌物,进行乳酸杆菌计数。(3)衣原体检测:取宫颈脱落细胞采用DNA-聚合酶链反应(PCR)方法进行检测。(4)人乳头瘤病毒(HPV)检测:取宫颈脱落细胞采用导流杂交法检测HPV及分型。1.2.3革兰染色及生化反应将定量采集的标本用无菌生理盐水10倍稀释后,分别将各稀释度的标本液滴种到MRS选择培养基上,在37℃5%CO2培养箱培养48h后,挑取典型菌落涂于干净的载玻片上进行革兰染色,油镜下观察形态并通过生化反应鉴定到乳酸菌属。然后记录菌落数。所有标本在1h内完成接种。1.2.4阴道假丝酵母菌病(1)细菌性阴道病(BV)实验室诊断标准:采用Nugent标准积分≥7分诊断为阳性。(2)外阴阴道假丝酵母菌病(VVC):有临床症状并显微镜检查见到假菌丝诊断为阳性。(3)滴虫性阴道炎:用生理盐水湿片法检查滴虫。1.3统计学分析所得数据采用SPSS12.0软件包进行统计学分析。计量资料均数(乳酸杆菌计数)用中位数表示。不同年龄组、不同月经周期、不同感染状态组间乳酸杆菌数量分布比较采用卡方检验。2结果2.1组患者1.097/l、1.0133/l、1.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512/l的情况>20岁、>30岁、>40岁不同年龄组间阴道乳酸杆菌的数量分布(1.0×107/L、1.0×109/L、1.5×108/L)有一定的差异,但差异无统计学意义(P>0.05)。>50岁年龄组中的8例研究对象,均表现为乳酸杆菌的缺失,且均存在不同的阴道感染。见表1。2.2不同月经期阴道乳酸杆菌的数量增殖期、分泌期阴道乳酸杆菌的数量(5.1×1010/L、5.9×1010/L)差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。2.3阴道乳酸杆菌的数量分布通过对研究对象的职业特点、受教育程度、居住情况、洗浴方式、吸烟、饮酒、性伴侣数、经期性交、经期清洗、阴道冲洗及冲洗频率进行单因素方差分析,结果显示,在以上各种不同因素影响下,阴道乳酸杆菌的数量分布差异均无统计学意义(P>0.05)。2.4阴道假丝酵母菌的计数结果见表1.2,2.3;bv为3.细菌性阴道病患者的阴道乳酸杆菌计数(4×106/L)明显比正常人(5×1010/L)减少,且差异有统计学意义(χ2=22.660,P﹤0.05)。外阴阴道假丝酵母菌病患者的阴道乳酸杆菌计数(1.3×107/L)也比正常人减少,且差异有统计学意义(χ2=10.413,P﹤0.05)。但其检出率(42.1%)较BV患者(31.8%)高。HPV阳性和衣原体阳性患者阴道乳酸杆菌计数(3×1010/L、8×107/L)与正常人相比,差异无统计学意义(χ2=3.460,χ2=3.376,P>0.05)。见表3。3讨论3.1阴道乳酸杆菌的年际分布目前,阴道分泌物中已分离到29种微生物。其中最重要的是乳酸杆菌,它在健康女性的阴道排出物标本中分离率高达80%~100%。可通过产生乳酸、H2O2、细菌素样物质而对条件致病菌有拮抗作用,保护机体免受致病菌的侵袭。随年龄增加,女性雌激素分泌减少或停止,阴道上皮细胞糖原储存减少或缺如,衰老引起阴道菌群的演替最大特点是乳酸杆菌分离率明显下降,阴道环境逐渐变成中性或弱碱性。绝经后妇女阴道内乳酸杆菌数量比绝经前明显减少,相反B族链球菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌升高。本次研究结果也显示,>20岁、>30岁、>40岁不同年龄组间阴道乳酸杆菌的数量分布有一定的差异,但差异无统计意义。而>50岁年龄组8例研究对象,均表现为乳酸杆菌的缺失,且研究资料还显示其均存在不同的阴道感染。可以看出,随着年龄的增加,尤其是绝经后妇女阴道内乳酸杆菌的数量减少,而维持一定的阴道乳酸杆菌数量是降低阴道炎发病率的必要条件。因此,临床上治疗绝经后阴道炎患者时,在针对明确病原体进行治疗的基础上,可考虑应用局部激素补充治疗,提高阴道乳酸杆菌数量,恢复阴道内微生态平衡,以菌膜屏障抑制病菌生长,提高阴道内免疫防御机能,降低阴道炎发病率。3.2阴道乳酸杆菌的分布月经周期阴道微生物群发生生态演替,主要表现为类杆菌的动态变化,而大肠埃希菌、葡萄球菌和乳酸杆菌及棒状杆菌未有明显的变化。本实验将研究对象分为增殖期、分泌期两组,研究结果证实了两组间阴道乳酸杆菌计数差异无统计学意义。另有文献报道,体外实验表明,在月经周期内雌激素水平较高的几天里,乳酸杆菌对阴道上皮细胞有较高的粘附率。因此,有待今后进一步研究不同月经周期阴道乳酸杆菌的定植情况,为阴道炎的治疗用药选择更佳时机。本研究对研究对象的职业特点、受教育程度、居住情况、洗浴方式、吸烟、饮酒、性伴侣数、经期性交、经期清洗、阴道冲洗及冲洗频率进行单因素方差分析,由于研究对象为门诊就诊的健康体检人群,并非高危人群,且问卷原始资料显示存在不良行为习惯人群例数少。统计学分析结果显示,在以上不同单因素影响下,阴道乳酸杆菌的数量分布差异无统计学意义。但值得一提的是不良的行为习惯应该引起临床上的足够重视,在治疗中应注意保护和保持阴道内环境中正常菌群的平衡,选用对乳酸杆菌影响小的药物(比如在抗生素的选用上),同时告知纠正不洁生活习惯。3.3阴道乳酸杆菌与阴阴道假丝酵母菌的关系本次研究结果显示:健康体检人群阴道乳酸杆菌计数为5×1010/L,与以往有报道(8×1010/L)类似。而细菌性阴道病患者的阴道乳酸杆菌计数明显比正常人减少,且差异有统计学意义,再次证实了细菌性阴道病是由于阴道生态环境的改变所致。特别是由于阴道乳酸杆菌与厌氧菌群在数量对比上的根本变化,即乳酸杆菌减少或缺失而厌氧菌大量繁殖所引起。外阴阴道假丝酵母菌病患者的阴道乳酸杆菌计数也比正常人减少,且差异有统计学意义(P﹤0.05),但其检出率(42.1%)较细菌性阴道病患者(31.8%)高。假丝酵母菌是一种条件致病菌,正常阴道微生态环境下,能抵抗假丝酵母菌生长,预防其侵入黏膜,特别是乳酸杆菌对阴道上皮细胞有保护功能。当阴道乳酸杆菌缺乏或减少时,假丝酵母菌感染有明显增加的趋势。本实验结果与以上结论一致,可以推测阴道乳酸杆菌对假丝酵母菌存在拮抗作用。有文献报道乳酸杆菌在体外干扰白色假丝酵母菌对阴道上皮的粘附。但国内也有不同的报道,认为乳酸杆菌与假丝酵母菌呈共生关系。因此,乳酸杆菌与外阴阴道假丝酵母菌病的关系还有待进一步研究。关于HPV和衣原体患者阴道乳酸杆菌的数量及种类分布情况,目前国内外尚未有