纤维素酶系中内切β-葡聚糖苷酶的分离纯化及动力学研究的开题报告_第1页
纤维素酶系中内切β-葡聚糖苷酶的分离纯化及动力学研究的开题报告_第2页
纤维素酶系中内切β-葡聚糖苷酶的分离纯化及动力学研究的开题报告_第3页
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纤维素酶系中内切β-葡聚糖苷酶的分离纯化及动力学研究的开题报告一、研究背景与意义纤维素酶系是一组能够分解植物纤维素的酶,包括内切β-葡聚糖苷酶、外切β-葡聚糖苷酶、β-葡聚糖醛酸酶等。其中,内切β-葡聚糖苷酶是纤维素酶系中最重要的一种酶,能够将纤维素链中的β-1,4-葡萄糖苷键剪断,产生低聚葡萄糖和单糖。因此,内切β-葡聚糖苷酶在植物细胞壁分解、生物质加工等方面有着广泛的应用价值。目前,内切β-葡聚糖苷酶的分离纯化和动力学研究还比较少。因此,这项研究的意义在于:发掘纤维素酶系中内切β-葡聚糖苷酶的基本特性和反应机制,为其在生物质加工、食品工业中的应用提供理论基础和实验指导。二、研究内容和方法(一)研究内容1.内切β-葡聚糖苷酶的分离纯化;2.内切β-葡聚糖苷酶的酶学性质研究;3.内切β-葡聚糖苷酶催化纤维素降解的反应动力学研究。(二)研究方法1.浸提试验:从可降解原料中提取纤维素酶系;2.离子交换色谱柱:利用该技术从浸提液中分离纤维素酶系;3.凝胶渗透色谱柱:利用该技术纯化内切β-葡聚糖苷酶;4.酶学试验:测定内切β-葡聚糖苷酶的最适温度、最适pH值和酶动力学参数;5.降解实验:研究内切β-葡聚糖苷酶催化纤维素降解的动力学。三、预期成果1.成功分离纯化纤维素酶系中的内切β-葡聚糖苷酶;2.确定内切β-葡聚糖苷酶的最适温度、最适pH值和酶动力学参数;3.研究内切β-葡聚糖苷酶催化纤维素降解的反应动力学,并初步探讨其降解机制。四、研究进度安排第一年:1.收集纤维素酶系,进行离子交换色谱柱分离;2.进行内切β-葡聚糖苷酶的初步纯化及酶学试验。第二年:1.进一步纯化内切β-葡聚糖苷酶,进行凝胶渗透色谱柱分离;2.确定内切β-葡聚糖苷酶的最适温度、最适pH值和酶动力学参数。第三年:1.进行内切β-葡聚糖苷酶催化纤维素降解的动力学研究;2.总结研究成果,撰写论文并答辩。五、参考文献1.Abbas,A.,Linares-Pastén,J.A.,Martinelle,M.,etal.(2016).SubstratebindinginGH7glucanasesanditsimplicationsforactivityoncellulosesurfaces.JournalofMolecularGraphicsandModelling,71,11-20.2.Han,M.,Liu,Y.,&Wang,M.(2020).Catalyticpropertiesandapplicationsofintracellularβ-glucosidasesfrombacteria:Areview.BioresourceTechnology,317,124015.3.Yang,Y.,Wang,S.,&Xu,F.(2017).Engineeringβ-glucosidasesforimprovedenzymaticconversionofl

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